曲桂娟, 孟鶴媛, 魏佳淇, 張明遠(yuǎn), 董曉慶
(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,吉林 長(zhǎng)春 130118)
自2020 年7 月1 日起, 禁止在飼料中添加促生長(zhǎng)類抗生素以來(lái), 為保障水產(chǎn)養(yǎng)殖的可持續(xù)發(fā)展, 尋求抗生素替代品成為當(dāng)前水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)研究的焦點(diǎn)問(wèn)題。 中草藥是一種應(yīng)用前景廣闊的綠色飼料添加劑,其具有天然、高效、抗藥性小、無(wú)殘留等特性。研究表明,單味中草藥以及復(fù)方中草藥添加劑具有促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng),提高機(jī)體抗氧化能力,抗菌、抗病毒、增強(qiáng)機(jī)體免疫的作用。然而,由于中草藥種類繁多以及動(dòng)物的品種、 生長(zhǎng)階段等的不同, 導(dǎo)致中草藥在不同種屬動(dòng)物上的應(yīng)用存在一定的差異(劉海芳等,2022;王偉等,2022;陳福斌等,2022;常洪淼等,2022;靳二輝等,2017)。 本試驗(yàn)以黃金鯽為研究對(duì)象, 利用中草藥相輔相成的藥性,藥食同源的特點(diǎn),選取歷史悠久,來(lái)源廣泛的金銀花、黃芪、杜仲、山楂為原料,等比配制,分別在基礎(chǔ)飼糧中添加0.6%、1.2%、1.8%、 2.4%濃度的復(fù)方中草藥, 探討其對(duì)黃金鯽幼魚生長(zhǎng)及抗氧化能力的影響, 為復(fù)方中草藥添加劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域的應(yīng)用提供理論依據(jù)。
1.1 中草藥添加劑 本研究使用的中草藥由金銀花、黃芪、杜仲、山楂組成,各組分的比例為1:1:1:1,均購(gòu)自長(zhǎng)春市百草大藥房,以上四種中草藥充分混勻粉碎后,過(guò)篩,備用。
1.2 基礎(chǔ)日糧 按照鯽幼魚的飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制基礎(chǔ)日糧,具體情況見(jiàn)表1。
表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分
1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 選取體質(zhì)健壯、規(guī)格整齊的10 g左右黃金鯽300 尾, 隨機(jī)分成5 組, 每組3 個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)20 尾。 隨機(jī)放養(yǎng)在15 個(gè)水族箱中,水源為曝氣自來(lái)水,水溫控制在24 ~26 ℃。 試驗(yàn)期為42 d。 將中草藥混合物分別按0.6%、1.2%、1.8%、2.4%的濃度添加到基礎(chǔ)日糧中, 制備成直徑為0.3 cm 的顆粒料備用。
1.4 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)期間每日分別于8:30、16∶30各投喂一次,每天記錄攝食量、水溫變化情況、死亡尾數(shù)。 每周根據(jù)魚體的生長(zhǎng)及攝食情況調(diào)整投喂量。
1.5 樣本采集及指標(biāo)測(cè)定
1.5.1 樣本采集與制備 于試驗(yàn)的第14、28、42天統(tǒng)計(jì)各組存活魚尾數(shù), 并對(duì)每個(gè)重復(fù)組進(jìn)行稱重, 每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取5 尾魚尾靜脈采血,3500 r/min離心10 min 制備血清。
1.5.2 生長(zhǎng)性能的測(cè)定 生長(zhǎng)性能各指標(biāo)計(jì)算公式如下:
1.5.3 抗氧化指標(biāo)的測(cè)定 過(guò)氧化物歧化酶(SOD)采用WST-1 法測(cè)定,丙二醛(MDA)采用TBA 法測(cè)定,過(guò)氧化氫酶(CAT)采用鉬酸銨法測(cè)定。所需試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。
1.6 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析(ANOVA), 通過(guò)Duncan’s 法進(jìn)行多重比較,P<0.05 表示差異顯著,P<0.01 表示差異極顯著。
2.1 不同濃度中草藥添加劑對(duì)黃金鯽幼魚生長(zhǎng)性能的影響 由表2 可以看出,飼喂14 d,各組平均日增重、采食量、餌料系數(shù)差異均不顯著(P>0.05),隨著飼喂時(shí)間的延長(zhǎng),到飼喂28 d,添加0.6%、1.2%和1.8%組平均日增重均顯著高于對(duì)照組 (P<0.05 ), 分別提高了25.71%,25.71%和42.86%(P<0.05)。到飼喂的42 d,添加1.2%組的黃金鯽幼魚平均日增重顯著高于對(duì)照組 (P<0.05),提高了34.21%;餌料系數(shù)顯著低于對(duì)照組(P<0.05), 降低了20.99%。 而且從飼喂時(shí)間來(lái)看,添加中草藥組平均日增重均高于對(duì)照組,說(shuō)明添加中草藥可以提高黃金鯽的增重率, 并且適當(dāng)?shù)奶砑铀娇梢燥@著提高增重率,降低餌料系數(shù)。
表2 不同濃度中草藥添加劑對(duì)黃金鯽幼魚生長(zhǎng)性能的影響
2.2 不同濃度中草藥添加劑對(duì)黃金鯽幼魚血清抗氧化能力的影響 由表3 可以看出, 在飼喂的14 d,CAT 的活性顯著高于對(duì)照組(P<0.05),分別提高了2.35%、3.02%、4.03%和4.03%。 到飼喂的28 d,SOD 和CAT 的活性和對(duì)照組相比, 均出現(xiàn)了顯著性的差異(P<0.05)。 SOD 的活性較對(duì)照組分別提高了8.06%、9.92%、12.09%、12.71%,CAT 的活性分別提高了5.19%、6.87%、10.05%、11.39%。 隨著飼喂時(shí)間的延長(zhǎng),在飼喂的42 d,試驗(yàn)組SOD、CAT、MDA 的活性和對(duì)照組相比,均出現(xiàn)了顯著性的差異 (P<0.05)。 和對(duì)照組相比,SOD 的活性分別提高了 15.97% 、19.17% 、12.14% 、17.73% ,CAT 的活性分別提高了18.83%、22.26%、22.09%、22.60%,MDA 的活性分別降低了3.19%、4.35%、5.80%、6.38%。
表3 中草藥添加劑對(duì)黃金鯽幼魚血清抗氧化指標(biāo)的影響
3.1 中草藥添加劑對(duì)黃金鯽幼魚生長(zhǎng)性能的影響 中草藥由于含有多種活性成分和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),靳淑委等(2022)、 郝敬友等(2021)、 袁小陵等(2022)研究表明,中草藥具有抗菌、抗病毒、促生長(zhǎng)、增強(qiáng)免疫等多種功效。 仉連平等(2022)、王曼鴻(2022)、鄧培華等(2021)研究發(fā)現(xiàn),在日糧中添合適濃度的中草藥可以促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,進(jìn)而提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能。鄒立君等(2019)研究表明, 在日糧中添加1%的復(fù)方中草藥超微粉制劑可以提高肉鵝的生長(zhǎng)性能,肖穎等(2021)研究表明, 日糧中添加以8 g/kg 中草藥可以顯著提高鯉魚的增重率,李金鳳等(2021) 研究表明,飲水中添加40 g/L 甘草、黃芪等藥液組方可以顯著提高AA 肉雞的增重率和屠宰性能,改善肉品質(zhì)。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明,飼喂42 d 時(shí),日糧中添加1.2%濃度中草藥可以顯著提高鯽魚的增重率,降低餌料系數(shù),本復(fù)方中含有的山楂、金銀花、黃芪和杜仲,山楂具有促進(jìn)食欲、助消化、促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收的功效,趙銀麗(2015)研究表明,金銀花具有抗炎、調(diào)節(jié)魚類腸道有益菌群的種類,降低致病菌的活性。易丙學(xué)(2014)、徐楠楠等(2021)對(duì)黃芪和杜仲的研究表明,它們具有補(bǔ)益健脾、抗菌抗病毒,提高機(jī)體免疫力,調(diào)節(jié)腸道菌群等作用,本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn), 復(fù)方中草藥具有促進(jìn)魚類的健康生長(zhǎng),提高鯽魚生產(chǎn)性能的作用。
3.2 中草藥添加劑對(duì)黃金鯽幼魚抗氧化能力的影響 抗氧化系統(tǒng)是動(dòng)物機(jī)體抵抗自由基侵害的重要防御系統(tǒng), 機(jī)體抗氧化能力越強(qiáng), 也就越健康。SOD、CAT、GSH-Px 等是機(jī)體抗氧化的第一道防線, 而MDA 含量是反映機(jī)體過(guò)氧化損傷情況的重要指標(biāo)。張瀟屹等(2021)研究發(fā)現(xiàn),日糧中添加0.4%的復(fù)合中草藥可以顯著提高肉雞血清中SOD 和GSH-Px 活性, 并且肉雞血清中丙二醛(MDA) 含量隨著中藥發(fā)酵產(chǎn)物用量的提高有下降趨勢(shì)。邱時(shí)秀等(2020)研究表明,日糧中添加復(fù)方中草藥, 可以顯著提高新西蘭兔血清SOD 和T-AOC 水平。 肖傳剛等(2020)研究表明,淫羊藿多糖和刺五加多糖可以增強(qiáng)抗氧化活性物質(zhì)SOD、CAT 和GSH-Px 的活性,降低MDA 的含量。本研究結(jié)果表明, 通過(guò)在基礎(chǔ)日糧中添加復(fù)方中草藥, 飼喂42 d, 能夠提高黃金鯽幼魚血清中SOD、CAT 的活性, 而且隨著添加水平的升高,酶活性呈升高的趨勢(shì)。 另外,血清中MDA 的含量降低, 說(shuō)明添加一定濃度的復(fù)方中草藥能夠提高鯽的抗氧化能力。
在日糧中添加適量濃度的中草藥可以促進(jìn)黃金鯽幼魚的生長(zhǎng)及提高抗氧化能力。 飼喂42 d,以添加1.2%的濃度效果最佳。