高旭紅， 張俊麗， 岳彩娟， 梁小軍

（寧夏農(nóng)林科學(xué)院動(dòng)物科學(xué)研究所，寧夏 銀川 750002）

獨(dú)活（Heracleum hemsleyanum）是傘形科，屬多年生草本植物， 植株高可達(dá)1.5 m， 主產(chǎn)于四川、湖北、陜西，常見于山坡陰濕的灌叢林下（郭曉亮等，2014）。 傳統(tǒng)藥用其根部，性辛、味苦、微溫，臨床多用于治療腰膝痹痛、少陰伏風(fēng)頭痛、兩足痛痹、足趾腫脹等癥狀（周璐麗等，2019）。 獨(dú)活莖葉中不僅含有粗蛋白質(zhì)、粗纖維、粗脂肪和礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分，還含有具有抗炎、鎮(zhèn)痛、降壓、抗凝血、抗腫瘤等藥理活性的蛇床子素， 在畜牧業(yè)中具有潛在的經(jīng)濟(jì)價(jià)值（張俊麗等，2021；Li 等，2013；林黎等，2013）。

近年來，為緩解畜禽飼料資源短缺、豐富畜禽飼料的功能性，已有科學(xué)工作者開展了中草藥副產(chǎn)物（莖葉）在畜禽飼料中的應(yīng)用研究，并取得良好效果。中草藥副產(chǎn)物（莖葉）有助于提高畜禽機(jī)體免疫力，維持腸道微生態(tài)平衡，并對(duì)屠宰性能、肉品質(zhì)和風(fēng)味有一定的促進(jìn)作用（楊建中等，2021；尹德成等，2021；陳凌鋒等，2017）。 但目前國(guó)內(nèi)鮮有對(duì)獨(dú)活莖葉應(yīng)用于養(yǎng)殖業(yè)中的研究報(bào)道。本試驗(yàn)通過在基礎(chǔ)飼糧中添加不同水平的獨(dú)活莖葉粉，研究其對(duì)西雜牛生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)、免疫和抗氧化指標(biāo)的影響，以期為畜牧業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用獨(dú)活莖葉作為功能性飼料添加劑提供參考依據(jù)。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)用獨(dú)活莖葉來源于寧夏隆德縣葆易圣藥業(yè)有限公司種植基地， 經(jīng)測(cè)定含有0.01%的蛇床子素，獨(dú)活莖葉營(yíng)養(yǎng)成分見表1。

表1 獨(dú)活莖葉營(yíng)養(yǎng)成分（干物質(zhì)基礎(chǔ)）%

試驗(yàn)選取體況良好、 平均體重 （472.31±40.80）kg 的西雜牛（西門塔爾×本地黃牛）公牛20頭，隨機(jī)分為4 組，每組5 頭。 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧參照中國(guó)肉牛飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 815-2004）配制，分育肥前期和育肥后期兩個(gè)階段飼喂。 對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組分別在每頭牛基礎(chǔ)飼糧中添加150、300、450 g/d 的獨(dú)活莖葉粉。基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表2。

表2 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.2 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)預(yù)試期15 d， 正試期90 d，共105 d。 每日由固定飼養(yǎng)員投料2 次，自由采食和飲水。

1.3 樣品指標(biāo)測(cè)定和計(jì)算方法

1.3.1 西雜牛生產(chǎn)性能的測(cè)定 每日記錄飼喂量，次日投料前稱量前一天剩料量，統(tǒng)計(jì)采食量；試驗(yàn)開始和結(jié)束當(dāng)天早晨空腹稱量試驗(yàn)牛體重，計(jì)算平均干物質(zhì)采食量（DMI）、日增重（ADG）和料重比（F/G）。

1.3.2 西雜牛血清生化、 免疫和抗氧化指標(biāo)的測(cè)定 飼喂試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天早晨對(duì)試驗(yàn)牛進(jìn)行頸靜脈采血10 mL，室溫靜置，待血樣在采血管中凝固析出血清后，于3000 r/min 離心15 min，分裝上層透明血清于離心管中-20 ℃冷凍保存。 測(cè)定血清中葡萄糖（GLU）、球蛋白（GLB）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、肌酐（CREA）、尿素氮（UREA）、膽堿酯酶（CHE）、亮氨酸-腦啡肽（L-ENK）、β-內(nèi)啡肽（β-EP）、 免疫球蛋白A （IgA）、 免疫球蛋白G（IgG）、 免疫球蛋白M （IgM）、 總抗氧化能力（TAOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽-過氧化物酶（GSH-Px）、過氧化氫酶（CAT）、白細(xì)胞介素-2（IL-2）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-10 （IL-10） 丙二醛 （MDA） 和腫瘤壞死因子-a（TNF-α）含量，均委托北京華英生物技術(shù)研究所測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用Excel 進(jìn)行整理后， 采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件One-Way ANOVA方法進(jìn)行方差分析，結(jié)果用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P＜0.01 為差異極顯著，P＜0.05 為差異顯著，P＞0.05 為差異不顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼喂獨(dú)活莖葉對(duì)西雜牛生產(chǎn)性能的影響由表3 可知，各組西雜牛的IBW 差異不顯著（P＞0.05），飼喂獨(dú)活莖葉對(duì)西雜牛的FBW、ADG、DMI和F/G 均無顯著影響（P＞0.05）。但試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組的ADG 比對(duì)照組高22.34% ～30.85%，F(xiàn)/G 比對(duì)照組低4.82% ～31.59%。

表3 飼喂獨(dú)活莖葉對(duì)西雜牛生產(chǎn)性能的影響

2.2 飼喂獨(dú)活莖葉對(duì)西雜牛血清生化指標(biāo)的影響 由表4 可知，各組GLU、UREA、CREA、CHE、TP 和ALB 含量無顯著性差異（P＞0.05），但試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組的GLU、CREA、CHE、TP 和ALB 含量整體高于對(duì)照組，UREA 含量低于對(duì)照組。試驗(yàn)Ⅲ組的GLB 含量比對(duì)照組顯著高20.25%（P＜0.05），與試驗(yàn)Ⅰ組和Ⅱ組差異不顯著（P＞0.05）；L-ENK 含量比對(duì)照組極顯著高43.72%（P＜0.01）， 比試驗(yàn)Ⅰ組和Ⅱ組分別顯著高19.37%和16.93%（P＜0.05）；β-EP 含量比對(duì)照組極顯著高46.86%（P＜0.01），比試驗(yàn)Ⅰ組顯著高12.00%（P＜0.05），與試驗(yàn)Ⅱ組差異不顯著（P＞0.05）。

表4 飼喂獨(dú)活莖葉對(duì)西雜牛血清生化指標(biāo)的影響

2.3 飼喂獨(dú)活莖葉對(duì)西雜牛免疫指標(biāo)的影響由表5 可知， 試驗(yàn)Ⅲ組的IgA 含量比對(duì)照組極顯著高24.60%（P＜0.01）， 與試驗(yàn)Ⅰ組和Ⅱ組差異不顯著 （P＞0.05）；IgM 含量比對(duì)照組顯著高18.75%（P＜0.05）， 與試驗(yàn)Ⅰ組和Ⅱ組差異不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)Ⅲ組的IgG 含量比對(duì)照組極顯著高16.93%（P＜0.01）， 比試驗(yàn)Ⅰ組顯著高11.28%（P＞0.05）， 與試驗(yàn)Ⅱ組差異不顯著（P＞0.05）；IL-2、IL-6 和TNF-α 含量極顯著低于對(duì)照組、試驗(yàn)Ⅰ組和Ⅱ組（P＜0.01）；IL-10 含量比對(duì)照組、 試驗(yàn)Ⅰ組和Ⅱ組極顯著高68.70%、31.26%和18.10%（P＜0.01）。隨獨(dú)活莖葉添加量的增加，IgA、IgM、IgG 和IL-10 含量均有上升趨勢(shì)，IL-2、IL-6 和TNF-α 含量有下降趨勢(shì)。

表5 飼喂獨(dú)活莖葉對(duì)西雜牛免疫指標(biāo)的影響

2.4 飼喂獨(dú)活莖葉對(duì)西雜牛機(jī)體抗氧化指標(biāo)的影響 由表6 可知， 試驗(yàn)Ⅲ組的T-AOC 含量和GSH-PX 活性比對(duì)照組、試驗(yàn)Ⅰ組和Ⅱ組極顯著高50.12%和23.06%、22.05%和25.76%、27.56%和12.12%（P＜0.01）；SOD 和CAT 活性比對(duì)照組和試驗(yàn)Ⅰ組極顯著高38.59%和57.24%、18.96%和23.78%（P＜0.01）， 與試驗(yàn)Ⅱ組差異不顯著 （P＞0.05）；MDA 比對(duì)照組、 試驗(yàn)Ⅰ組和Ⅱ組極顯著低58.06%、50.78%和42.60%（P＜0.01）。 隨獨(dú)活莖葉添加量的增加，T-AOC 含量、SOD、CAT 和GSHPX 活性均有上升趨勢(shì)；MDA含量有下降趨勢(shì)。

表6 飼喂獨(dú)活莖葉對(duì)西雜牛機(jī)體抗氧化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 飼喂獨(dú)活莖葉對(duì)西雜牛生產(chǎn)性能的影響動(dòng)物的生產(chǎn)性能是衡量動(dòng)物經(jīng)濟(jì)價(jià)值的一項(xiàng)重要指標(biāo)。 飼糧中添加植物免疫添加劑有利于動(dòng)物機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，改善生長(zhǎng)性能，可作為生長(zhǎng)促進(jìn)劑促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育 （楊正早等，2022；趙正偉等，2022）。有研究表明中草藥通過為動(dòng)物提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)， 改善飼料風(fēng)味， 刺激畜禽唾液、胃液、腸液的分泌量增加，降低瘤胃環(huán)境pH、優(yōu)化瘤胃內(nèi)環(huán)境等方面提高動(dòng)物生長(zhǎng)及生產(chǎn)性能（郝晨曲等，2020）。 雷石標(biāo)等（2020）和李俊峰等（2017）研究表明，在家禽飼糧飼料中添加1%黃芪莖葉粉和人參莖葉超微粉可以提高生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)及經(jīng)濟(jì)效益。因此，中草藥副產(chǎn)物（莖葉）因與它們的藥用部分有著相同的藥理活性成分，或許對(duì)畜禽有著相似的促生長(zhǎng)功能。本試驗(yàn)中，飼喂獨(dú)活莖葉對(duì)西雜牛的FBW、ADG、DMI 和F/G 均無顯著影響，但試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組的ADG 比對(duì)照組高22.34% ～30.85%，F(xiàn)/G 比對(duì)照組低4.82% ～31.59%。 結(jié)合本試驗(yàn)后續(xù)血清生理生化指標(biāo)的結(jié)果分析， 可能由于獨(dú)活莖葉的添加促進(jìn)了西雜牛機(jī)體蛋白質(zhì)合成代謝，提升了機(jī)體免疫功能，從而生長(zhǎng)性能獲得一定效果的提升。

3.2 飼喂獨(dú)活莖葉對(duì)西雜牛血清生化指標(biāo)的影響 葡萄糖被用作衡量反芻動(dòng)物能量狀態(tài)的指標(biāo)。 TP 是由ALB、GLB 等多種蛋白質(zhì)組成的復(fù)合物，是機(jī)體蛋白質(zhì)的來源之一，主要用于組織的修補(bǔ)和能量的供給， 在一定程度上代表了飼糧中蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)水平及動(dòng)物對(duì)蛋白質(zhì)的消化吸收程度（楊建中等，2021）。CREA 和UREA 水平是衡量腎功能的重要指標(biāo)，其中UREA 直接反映機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)分解代謝狀況，蛋白質(zhì)代謝良好時(shí)，其濃度降低（魯利萍等，2021）。 CHE 是肝臟合成蛋白質(zhì)功能的指標(biāo)。 本試驗(yàn)中獨(dú)活莖葉添加組的TP、ALB、GLB 和CHE 含量整體高于對(duì)照組，UREA 含量低于對(duì)照組，各組CREA 含量差異不顯著，表示獨(dú)活莖葉不影響西雜牛腎功能， 可使體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成代謝加強(qiáng)。 L-ENK 和β-EP 是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中一種類嗎啡性神經(jīng)遞質(zhì)，結(jié)合于細(xì)胞表面受體，似同阿片一樣能鎮(zhèn)靜和提高痛閾， 并與風(fēng)濕病和關(guān)節(jié)炎治療機(jī)制有關(guān)（王迪等，2021；李艷，2015）。本研究中試驗(yàn)組L-ENK 和β-EP 含量顯著高于對(duì)照組，且隨獨(dú)活莖葉添加量增加而上升，說明獨(dú)活莖葉對(duì)西雜牛肢蹄有潛在的保健作用。 這與彭程等（2021）發(fā)現(xiàn)獨(dú)活寄生湯對(duì)大鼠類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎治療有一定治療效果的研究結(jié)果一致。

3.3 飼喂獨(dú)活莖葉對(duì)西雜牛免疫指標(biāo)的影響許多中草藥副產(chǎn)物具有免疫調(diào)節(jié)作用， 能刺激動(dòng)物免疫系統(tǒng)激活免疫細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子，增加機(jī)體抗體的合成，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，從而起到動(dòng)物保健的作用 （Abdallah 等，2019）。 IgA、IgM、IgG 是由動(dòng)物免疫系統(tǒng)淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)，經(jīng)過一系列的轉(zhuǎn)化可以轉(zhuǎn)化為抗體， 是體液免疫應(yīng)答反應(yīng)中發(fā)揮重要功能的免疫分子， 可體現(xiàn)血清中免疫球蛋白的整體水平（趙曉雅等，2022）。本研究表明， 在西雜牛飼糧中添加獨(dú)活莖葉可顯著提高其血清IgA、IgM 和IgG 含量， 表明獨(dú)活莖葉可降低動(dòng)物機(jī)體因應(yīng)激造成的損傷， 從而使機(jī)體免疫球蛋白表達(dá)量增加。

細(xì)胞因子IL-2、IL-6、TNF-α 為促炎因子，主要介導(dǎo)細(xì)胞免疫， 對(duì)細(xì)胞內(nèi)病原體具有抗感染作用；IL-10 是抗炎因子，輔助B 細(xì)胞分化、成熟，介導(dǎo)體液免疫， 它們通過調(diào)節(jié)免疫和炎癥反應(yīng)在宿主防御中發(fā)揮重要作用（郭廣振等，2022；Liao 等，2021）。有研究表明獨(dú)活中存在的蛇床子素和哥倫比亞苷可降低TNF-α、IL-1β 和IL-6 的水平（Li等，2016）。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，獨(dú)活莖葉可顯著上調(diào)西雜牛血清IL-10 含量， 下調(diào)血清IL-2、IL-6 和TNF-α 含量，與上述研究結(jié)果一致。 且隨獨(dú)活莖葉添加量的增加，IgA、IgM、IgG 和IL-10 含量均有上升趨勢(shì)，IL-2、IL-6 和TNF-α 含量有下降趨勢(shì)， 每頭西雜牛添加450 g/d 的獨(dú)活莖葉的抗炎效果最明顯。 可見獨(dú)活莖葉可提高西雜牛血清免疫球蛋白水平，降低炎癥因子的釋放，從而提高機(jī)體的免疫水平。

3.4 飼喂獨(dú)活莖葉對(duì)西雜牛機(jī)體抗氧化指標(biāo)的影響 關(guān)于獨(dú)活莖葉對(duì)育肥牛血清抗氧化指標(biāo)的研究鮮見報(bào)道， 但研究表明獨(dú)活提取物具有明顯的抗氧化活性：Min 等（2007）發(fā)現(xiàn)，獨(dú)活的甲醇或水提取物具有明顯的抗氧化活性， 可以用作天然抗氧化劑；胡昱等（2013）研究顯示，獨(dú)活95%乙醇提取物、石油醚提取物、乙酸乙酯提取物和石油醚-乙酸乙酯提取物均能增強(qiáng)SOD 活性， 降低MDA 含量。 裴媛等（2014）研究表明，獨(dú)活香豆素類藥理活性成分可提高大鼠血清中T-SOD 活性，降低MDA 含量。 本試驗(yàn)結(jié)果表明，在西雜牛飼糧中添加獨(dú)活莖葉可顯著提高其血清T-AOC 含量、SOD、CAT 和GSH-PX 活性， 降低血清MDA含量；且隨獨(dú)活莖葉添加量的增加，T-AOC 含量、SOD、CAT 和GSH-PX 活性均有上升趨勢(shì)，MDA含量有下降趨勢(shì)。 說明獨(dú)活莖葉可提高西雜牛機(jī)體抗氧化能力， 且以每頭牛添加量為450 g/d 時(shí)效果最明顯。

4 結(jié)論

在飼糧中添加獨(dú)活莖葉對(duì)西門塔爾雜交牛機(jī)體蛋白質(zhì)合成代謝及生長(zhǎng)性能有一定促進(jìn)作用，且能顯著提高機(jī)體免疫和抗氧化性能， 建議每頭牛添加量為450 g/d。