張延超，劉 帥，劉 菁，吳 燕

（天津市藥品檢驗研究院，天津 300070）

甘油分子式為C3H8O3，分子量為92.09，CAS號：56-81-5，甘油最早由斯柴爾（Scheel）于1779年首先發(fā)現(xiàn)，1823年人們逐漸認識到油脂成分中含有Chevreul，希臘語為甘甜的意思，因此命名為甘油（glycerol）。在一戰(zhàn)期間，曾作為制造火藥的原料而大量生產(chǎn)。此后，甘油作為潤滑性瀉藥或藥用輔料，溶劑和助懸劑等，被廣泛應(yīng)用在原料藥和藥用輔料中。

藥品的穩(wěn)定性是指原料藥及其制劑保持其物理、化學(xué)、生物學(xué)和微生物學(xué)性質(zhì)的能力。穩(wěn)定性特性也是藥品質(zhì)量控制研究的重要內(nèi)容，與藥品質(zhì)量研究和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立緊密相關(guān)［1-2］。藥品的穩(wěn)定性直接關(guān)系到臨床用藥安全，通常條件下，隨著儲存時間的延長，化學(xué)藥品會出現(xiàn)降解，導(dǎo)致有效成分的減少和有害物質(zhì)的增加，有的藥品生產(chǎn)企業(yè)無法厘清留樣、穩(wěn)定性試驗與持續(xù)穩(wěn)定性考查三種行為之間的關(guān)系和區(qū)別，不同程度地存在著概念不清、措施混淆、質(zhì)量風(fēng)險和法律風(fēng)險并存等情形［3］。

因此，通過對藥品穩(wěn)定性研究，對產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定性的確定，對推測產(chǎn)品的有效期都具有實際指導(dǎo)意義［2］。本文按照國家新藥注冊管理辦法中藥品穩(wěn)定研究指導(dǎo)原則，以及《中國藥典》原料藥與藥物制劑穩(wěn)定性試驗指導(dǎo)原則，對甘油原料藥進行穩(wěn)定性考查。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 電子天平（METTLER）；折光儀（RUDOLPH J257）；紅外光譜儀（BRUKER TENSOR 27）；氣相色譜儀（Agilent 7890A）；水分儀（METTLER V20）；高溫爐（Thermo BF51794JC-1）；加熱板（萊玻特瑞）；紫外-可見分光光度計（島津UV-2450）；pH計（METTLER Seveneasy）；電熱恒溫水浴鍋（HBYQ HHS型）；純水儀（MillAdvantage A10）。

1.2 試藥 原料藥甘油（廠家A，批號072703-01、072803-01、072903-01）；氫氧化鈉（天津市化學(xué)試劑三廠）；重鉻酸鉀（天津市華東試劑廠）；甲醇（Merck，色譜純）；硝酸（Merck，色譜純）；鹽酸（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）；硫酸銅（天津市贏達稀貴化學(xué)試劑廠）；氫氧化鉀（天津市化學(xué)試劑三廠）；二甘醇（中國食品藥品檢定研究院，批號101127-201302）；乙二醇（中國食品藥品檢定研究院，批號101111-201904）；1，2-丙二醇（Dr.Ehrenstorfer GmbH，批號G1007429）；正己醇（Dr.Ehrenstorfer GmbH，批號G1021183）；鐵單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（國家有色金屬及電子材料分析測試中心，國家標(biāo)準(zhǔn)樣品編號：GSB 04-1762-2004，批號16031）；草酸銨（天津市風(fēng)帆化學(xué)試劑科技有限公司）；鉛單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（國家有色金屬及電子材料分析測試中心，國家標(biāo)準(zhǔn)樣品編號：GSB 04-1742-2004，批號208021-1）。

2 方法與結(jié)果

2.1 穩(wěn)定性試驗

2.1.1 性狀 按照《中國藥典》方法［1］，本品為無色、澄清的黏稠液體。相對密度：本品在25℃時的相對密度為1.258~1.268。折光率：本品的折光率為1.470~1.475。

2.1.2 酸堿度 按照《中國藥典》方法［1］，取本品25.0 g，用水稀釋至50 ml，搖勻，加酚酞指示劑0.5 ml，溶液應(yīng)無色，加0.l mol/L氫氧化鈉溶液0.2 ml，溶液應(yīng)顯粉紅色。

2.1.3 顏色 按照《中國藥典》方法［1］，取本品50 ml，置50 ml納氏比色管中，與對照液（取比色用重鉻酸鉀溶液0.2 ml，加水稀釋至50 ml制成）比較，不得更深。

2.1.4 糖 按照《中國藥典》方法［1］，采用滴加硫酸銅試液的顯色反應(yīng)，應(yīng)為藍色澄清溶液，繼續(xù)在水浴上加熱5 min，溶液應(yīng)仍為藍色，無沉淀產(chǎn)生。

2.1.5 脂肪酸與脂類 按照《中國藥典》方法［1］，采用氫氧化鈉滴定法，進行測定，消耗的氫氧化鈉滴定液（0.1 mol/L）不得過4.0 ml。

2.1.6 丙烯醛與銨鹽 按照《中國藥典》方法［1］，不得顯黃色或發(fā)生氨臭。

2.1.7 易炭化物 按照《中國藥典》方法［1］，結(jié)果應(yīng)符合規(guī)定。

2.1.8 有關(guān)物質(zhì) 按照《中國藥典》方法［1］，采用氣相色譜加內(nèi)標(biāo)方法，扣除內(nèi)標(biāo)峰按面積歸一化法計算，單個未知雜質(zhì)不得過0.1%；雜質(zhì)總量（包含二甘醇、乙二醇和1，2-丙二醇）不得過1.0%。

2.1.9 水分 按照《中國藥典》方法［1］，含水分不得過2.0%。

2.1.10 含量測定 按照《中國藥典》方法［1］，采用滴定法，按無水物計算，甘油含量不得少于98.0%。

2.2 影響因素試驗 此項試驗是在比加速試驗更激烈的條件下進行。其目的是探討藥物的固有穩(wěn)定性、了解影響其穩(wěn)定性的因素及可能的降解途徑與降解產(chǎn)物，為制劑生產(chǎn)工藝、包裝、貯存條件和建立降解產(chǎn)物分析方法提供科學(xué)依據(jù)［4］。

2.2.1 光照試驗 取072703-01、072803-01、072903-01共3批樣品，開口放在光照箱中，以4 500 lx光照射10 d，分別在5和10 d取樣測定。結(jié)果本品經(jīng)強光照射后，外觀性狀、相對密度、折光率、酸堿度、顏色、糖、脂肪酸與脂類、丙烯醛與銨鹽、易炭化物、有關(guān)物質(zhì)、含量測定均未見明顯變化，水分稍有增加，表明本品對光照較穩(wěn)定。見表1。

2.2.2 高溫試驗 取072703-01、072803-01、072903-01共3批樣品，開口放在恒溫箱中，于60℃溫度下放置30 d，在第5、10和30 d取樣測定。結(jié)果經(jīng)60℃高溫試驗后，外觀性狀、相對密度、折光率、酸堿度、顏色、糖、脂肪酸與脂類、丙烯醛與銨鹽、易炭化物、有關(guān)物質(zhì)、含量測定均未見明顯變化，雜質(zhì)總量為0.05%，最大單個未知雜質(zhì)含量為0.04%，水分稍有增加，說明本品對熱較穩(wěn)定。見表1。

2.2.3 高濕試驗 取072703-01、072803-01、072903-01共3批樣品，開口置恒濕密閉容器中，于相對濕度75%RH和92.5%RH下，室溫放置5 d，取樣測定。結(jié)果經(jīng)75%RH和92.5%RH高濕試驗后，外觀性狀、相對密度、折光率、酸堿度、顏色、糖、脂肪酸與脂類、丙烯醛與銨鹽、易炭化物、有關(guān)物質(zhì)未見明顯變化，有關(guān)物質(zhì)中雜質(zhì)總量為0.05%，最大單個未知雜質(zhì)含量為0.04%，無明顯變化。由于本品極具引濕性，高濕條件下水分和含量測定試驗無法繼續(xù)進行，說明本品對高濕環(huán)境極不穩(wěn)定。見表1。

2.3 加速試驗 藥品穩(wěn)定性加速試驗屬于藥品上市后階段的穩(wěn)定性研究，其考查條件一般等同于長期穩(wěn)定性試驗樣品放置條件，供試品在溫度（40±2）℃、相對濕度75%±5%的條件下放置6個月［4］。通過考查產(chǎn)品在高于長期貯藏溫度和濕度條件下的穩(wěn)定性，根據(jù)試驗結(jié)果確定是否需要進行中間條件下的穩(wěn)定性試驗及確定長期試驗的放置條件。本試驗取3批樣品，在溫度為40℃，相對濕度為RH75%的恒溫恒濕箱中放置，于3和6個月取樣測定?？疾闃悠吠庥^性狀、相對密度、折光率、酸堿度、顏色、糖、脂肪酸與脂類、丙烯醛與銨鹽、易炭化物、有關(guān)物質(zhì)、含量測定的變化。結(jié)果經(jīng)40℃加速試驗6個月后，外觀性狀、酸堿度、顏色、糖、脂肪酸與脂類、丙烯醛與銨鹽、易炭化物考查指標(biāo)均符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求，相對密度、折光率、有關(guān)物質(zhì)、水分、含量測定均未見明顯變化，有關(guān)物質(zhì)有所增加，3批樣品總雜質(zhì)分別為0.11%、0.12%和0.12%，仍符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。見表2。

表2 原料藥甘油加速試驗結(jié)果（40℃，RH75%）

3 討論

穩(wěn)定性研究是基于對原料藥或制劑及其生產(chǎn)工藝的系統(tǒng)研究和理解，通過設(shè)計試驗獲得原料藥或制劑的質(zhì)量特性在各種環(huán)境因素（如溫度、濕度、光線照射等）的影響下隨時間變化的規(guī)律，并據(jù)此為藥品的處方、工藝、包裝、貯藏條件和有效期的確定提供信息支持［5］。

影響因素試驗表明，經(jīng)60℃高溫試驗后，水分稍有增加，其余項目未見明顯變化，說明本品對熱較穩(wěn)定。本品對高濕環(huán)境極不穩(wěn)定，極具引濕性，高濕條件下水分和含量變化明顯。經(jīng)強光照射后，水分稍有增加，其余項目未見明顯變化，表明本品對光照較穩(wěn)定。

加速試驗表明，本品經(jīng)40℃加速試驗6個月后，外觀性狀、相對密度、折光率、酸堿度、顏色、糖、脂肪酸與脂類、丙烯醛與銨鹽、易炭化物、有關(guān)物質(zhì)、水分和含量測定均未見明顯變化，有關(guān)物質(zhì)有所增加，3批樣品總雜質(zhì)分別為0.11%、0.12%和0.12%，仍符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。

本試驗通過對原料藥甘油穩(wěn)定性和加速試驗研究，考查原料藥甘油在質(zhì)量周期內(nèi)的變化，為其制備、包裝、貯藏條件和有效期的確定與質(zhì)量控制提供技術(shù)支持。也為藥品生產(chǎn)企業(yè)梳理清留樣、穩(wěn)定性試驗與持續(xù)穩(wěn)定性考查三種行為之間的關(guān)系和區(qū)別提供技術(shù)參考。