楊亞南 孫 祁 徐廉竹 丁元翠 袁宇塵 胡倩倩 李升和 任 曼

(安徽科技學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)調(diào)控與健康安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，鳳陽(yáng)233100)

我國(guó)是世界養(yǎng)鵝大國(guó)，2021年世界肉鵝出欄量約6.6億只，我國(guó)商品鵝出欄5.7億只[1]。除了養(yǎng)殖和消費(fèi)數(shù)量大，我國(guó)鵝品種豐富、地方特色鮮明，本文所選用的皖西白鵝享有“世界珍禽”稱(chēng)號(hào)，1981年首批列入《中國(guó)家禽品種志》，其羽絨質(zhì)量得到了世界公認(rèn)[2]，具有抗病力強(qiáng)、幼齡生長(zhǎng)速度快、耐粗飼等特點(diǎn)。但是，隨著鵝養(yǎng)殖的規(guī)模化，鵝腸道性疾病(鵝副黏病毒病、鵝大腸桿菌病、新型病毒性腸炎等)激增。大量研究表明，一些氨基酸除了參與合成動(dòng)物體蛋白，還具有調(diào)控免疫功能和影響腸道健康作用。異亮氨酸可以減輕斷奶仔豬模型中的輪狀病毒感染和免疫反應(yīng)，改善生長(zhǎng)性能和免疫功能[3]，提高魚(yú)類(lèi)腸道淀粉酶和胃蛋白酶活性[4]。蘇氨酸參與機(jī)體蛋白質(zhì)合成和免疫等生理功能[5]。同時(shí)，作為腸道黏蛋白的重要組成部分，蘇氨酸可改善仔豬、雞和鴨的小腸組織形態(tài)[6-7]，維持空腸形態(tài)的完整性和修復(fù)大腸桿菌引起的絨毛損傷[8]，調(diào)節(jié)蛋雞腸道微生物種群[9]。上述研究為蘇氨酸和異亮氨酸的功能提供了重要線索，但二者在皖西白鵝中的研究和應(yīng)用較少。與雞和鴨不同，鵝作為草食性動(dòng)物，盲腸的結(jié)構(gòu)和功能對(duì)其健康和生長(zhǎng)具有重要作用。因此，本試驗(yàn)旨在研究蘇氨酸和異亮氨酸對(duì)生長(zhǎng)期皖西白鵝生長(zhǎng)性能、盲腸組織結(jié)構(gòu)、細(xì)胞因子和微生物區(qū)系的影響，為氨基酸在鵝飼糧中應(yīng)用提供借鑒，也為鵝腸道性疾病的營(yíng)養(yǎng)性預(yù)防提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

選取30日齡皖西白鵝(購(gòu)自六安市皖西白鵝原種場(chǎng))180只，隨機(jī)分為3組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只，各重復(fù)之間體重接近。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧；試驗(yàn)組分為蘇氨酸組和異亮氨酸組，蘇氨酸組在基礎(chǔ)飼糧中添加2.0 g/kg的蘇氨酸，異亮氨酸組在基礎(chǔ)飼糧中添加2.5 g/kg的異亮氨酸。蘇氨酸和異亮氨酸純度均為98%，添加形式分別為L(zhǎng)-蘇氨酸和L-異亮氨酸。試驗(yàn)期60 d。飼養(yǎng)場(chǎng)地包含鵝舍、運(yùn)動(dòng)場(chǎng)和水池。皖西白鵝自由采食、充足飲水，按正常免疫程序進(jìn)行免疫接種。飼糧營(yíng)養(yǎng)水平參考《中國(guó)飼料成分及營(yíng)養(yǎng)價(jià)值表(2019年第30版)》[10]計(jì)算，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目Items30～60日齡30 to 60 days of age61～90日齡61 to 90 days of age稻殼 Rice hull5.008.00L-賴(lài)氨酸鹽酸鹽 L-Lys·HCl0.05L-蘇氨酸 L-Thr0.120.20DL-蛋氨酸 DL-Met0.060.07氯化膽堿 Choline chloride0.500.50碘化鉀 KI0.010.01合計(jì) Total100.00100.00營(yíng)養(yǎng)水平 Nutrient levels3)粗蛋白質(zhì) CP17.1515.23粗脂肪 EE2.989.05代謝能 ME/(MJ/kg)11.7010.51粗纖維 CF4.346.71鈣 Ca0.800.80總磷 TP0.670.65有效磷 AP0.430.36賴(lài)氨酸 Lys0.930.77蛋氨酸 Met0.400.33蘇氨酸 Thr0.800.77異亮氨酸 Ile0.700.58

1.2 樣品采集

試驗(yàn)第30天和第60天，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取2只鵝，每組共6只鵝，頸靜脈放血處死，取左、右2段盲腸中段組織，一段置于4%多聚甲醛中固定，一段置于-80 ℃冰箱中保存。取中段盲腸食糜，置于滅菌EP管里，置于液氮中保存，待測(cè)。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)與方法

1.3.1 生長(zhǎng)性能

每天記錄皖西白鵝采食量，每15 d稱(chēng)1次空腹體重，計(jì)算平均日采食量(average daily feed intake，ADFI)、平均日增重(average daily gain，ADG)和料重比(feed/gain，F(xiàn)/G)。

1.3.2 盲腸組織形態(tài)

取固定24 h后的皖西白鵝盲腸組織，自來(lái)水沖洗24 h，經(jīng)過(guò)乙醇梯度脫水、二甲苯透明、石蠟包埋等處理后，以5 μm的厚度切片，常規(guī)蘇木精-伊紅(HE)染色。使用正置熒光顯微鏡(BX63，日本Olympus公司)對(duì)切片進(jìn)行拍照，每張切片選擇5個(gè)視野，使用Image-Pro Plus 6.0軟件(Media，美國(guó)Cybernetics公司)測(cè)量盲腸絨毛高度、隱窩深度，計(jì)算絨毛高度/隱窩深度(V/C)。

1.3.3 盲腸細(xì)胞因子含量

取盲腸中段組織0.1 g，按1∶9質(zhì)量體積比加勻漿介質(zhì)，制備10%組織勻漿，3 000 r/min離心10 min，取上清，采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)法和酶標(biāo)儀(Multiskan，美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司)檢測(cè)盲腸組織上清液中免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、干擾素-γ(IFN-γ)、白細(xì)胞介素-2(IL-2)、白細(xì)胞介素-4(IL-4)含量。

1.3.4 盲腸內(nèi)容物16S rRNA高通量測(cè)序

取中段盲腸食糜，將樣品送至深圳微生太科技有限公司，使用DNA抽提試劑盒E.Z.N.A.?Soil DNA Kit(美國(guó)Omega Bio-Tek公司)提取DNA，以16S rRNA V3～V4區(qū)為目標(biāo)片段，擴(kuò)增引物為338F(5’-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3’)和806R(5’-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3’)。運(yùn)用QIIME2 demux插件對(duì)不同樣本的序列進(jìn)行拆分[11]。將拆分后的序列，運(yùn)用QIIME2 dada2插件進(jìn)行質(zhì)控、修剪、去噪、拼接以及去除嵌合體后，得到最終的特征序列[12]。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 25.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)和LSD多重比較，試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(mean±SE)表示，P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著。

2 結(jié) 果

2.1 蘇氨酸和異亮氨酸對(duì)皖西白鵝生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，各組之間30、60、90日齡體重?zé)o顯著差異(P>0.05)。各組之間30～60日齡ADG、F/G無(wú)顯著差異(P>0.05)，異亮氨酸組30～60日齡ADFI顯著高于蘇氨酸組(P<0.05)。各組之間61～90日齡ADG、ADFI無(wú)顯著差異(P>0.05)，蘇氨酸組和異亮氨酸組61～90日齡F/G極顯著低于對(duì)照組(P<0.01)。各組之間30～90日齡ADG、ADFI、F/G無(wú)顯著差異(P>0.05)。

2.2 蘇氨酸和異亮氨酸對(duì)皖西白鵝盲腸組織形態(tài)的影響

通過(guò)觀察組織切片(圖1)，盲腸管壁分為黏膜層、黏膜下層、肌層和漿膜。盲腸黏膜層絨毛較少，腸腺長(zhǎng)而直，比較密集。

表2 蘇氨酸和異亮氨酸對(duì)皖西白鵝生長(zhǎng)性能的影響

續(xù)表2項(xiàng)目Items對(duì)照組Control group蘇氨酸組Threonine group異亮氨酸組Isoleucine group平均日采食量 ADFI/g301.27±8.21288.87±7.81307.17±7.36料重比 F/G6.01±0.165.83±0.165.99±0.15

Ⅰ：60日齡對(duì)照組；Ⅱ：60日齡蘇氨酸組；Ⅲ：60日齡異亮氨酸組；Ⅳ：90日齡對(duì)照組；Ⅴ：90日齡蘇氨酸組；Ⅵ：90日齡異亮氨酸組。比例尺：200 μm。

由表3可知，60日齡時(shí)，異亮氨酸組盲腸絨毛高度極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)，顯著高于蘇氨酸組(P<0.05)；異亮氨酸組盲腸隱窩深度顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；各組之間盲腸絨毛高度/隱窩深度無(wú)顯著差異(P>0.05)。90日齡時(shí)，蘇氨酸組盲腸絨毛高度顯著高于異亮氨酸組(P<0.05)，蘇氨酸組盲腸隱窩深度顯著高于對(duì)照組和異亮氨酸組(P>0.05)，蘇氨酸組和異亮氨酸組盲腸絨毛高度/隱窩深度顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。

2.3 蘇氨酸和異亮氨酸對(duì)90日齡皖西白鵝盲腸細(xì)胞因子含量的影響

由表4可知，90日齡時(shí)，各組之間盲腸IgG、IgA、IgM、SIgA、IL-2含量無(wú)顯著差異(P>0.05)，蘇氨酸組和異亮氨酸組盲腸TNF-α含量顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，蘇氨酸組盲腸IFN-γ顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，蘇氨酸組盲腸IL-4含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

2.4 蘇氨酸和異亮氨酸對(duì)90日齡皖西白鵝盲腸微生物區(qū)系的影響

2.4.1 操作分類(lèi)單元(OTUs)稀釋曲線圖和盲腸菌群的OTUs韋恩圖

由圖2-Ⅰ可知，序列數(shù)量在5 000個(gè)以?xún)?nèi)各組OTUs數(shù)量增長(zhǎng)較多，在序列數(shù)量超過(guò)5 000個(gè)以后，OTUs數(shù)量增加較平緩，序列數(shù)量已基本覆蓋樣品細(xì)菌物質(zhì)，各個(gè)樣品豐富度差異較大。

由圖2-Ⅱ可知，在相似度97%的水平下，共鑒定5 580個(gè)OTUs，每個(gè)樣本平均有(372±22)個(gè)。對(duì)照組和蘇氨酸組共有528個(gè)相同的OTUs，蘇氨酸組和異亮氨酸組共有452個(gè)相同的OTUs，對(duì)照組和異亮氨酸組有452個(gè)相同的OTUs，3組共有398個(gè)相同的OTUs。

2.4.2 各組盲腸樣品alpha多樣性分析

由表5可知，各組之間盲腸菌群Chao1指數(shù)、Shannon指數(shù)、Simpson指數(shù)無(wú)顯著差異(P>0.05)。

2.4.3 各組盲腸樣品beta多樣性分析

盲腸菌群beta多樣性的主坐標(biāo)分析(PCoA)和無(wú)度量多維標(biāo)定法(NMDS)分析結(jié)果如圖3所示，圖中每1個(gè)點(diǎn)代表1個(gè)樣本，相同顏色的點(diǎn)為同1個(gè)分組，2點(diǎn)之間得到距離越近表明二者的群落構(gòu)成差異越小。當(dāng)應(yīng)力值(stress)<0.2時(shí)，說(shuō)明數(shù)據(jù)可靠。通過(guò)NMDS分析和PCoA，顯示樣本相似性較好。主成分1貢獻(xiàn)率約為21.5%，主成分2貢獻(xiàn)率約為12.2%。

表3 蘇氨酸和異亮氨酸對(duì)皖西白鵝盲腸組織形態(tài)的影響

表4 蘇氨酸和異亮氨酸對(duì)90日齡皖西白鵝盲腸細(xì)胞因子含量的影響

CON90D1～CON90D6代表對(duì)照組6個(gè)樣品，BAA90D1～BAA90D4代表蘇氨酸組4個(gè)樣品，PAA90D1～PAA90D5代表異亮氨酸組5個(gè)樣品。A、B、C分別代表對(duì)照組、蘇氨酸組、異亮氨酸組。下圖同。

表5 90日齡皖西白鵝盲腸菌群alpha多樣性分析

圖3 90日齡皖西白鵝盲腸菌群beta多樣性

2.4.4 物種菌群分析

皖西白鵝盲腸微生物在門(mén)水平上組成如圖4所示，16個(gè)門(mén)中排名靠前的優(yōu)勢(shì)菌門(mén)有擬桿菌門(mén)(Bacteroidetes)、厚壁菌門(mén)(Firmicutes)、變形菌門(mén)(Proteobacteria)、梭桿菌門(mén)(Fusobacteria)、放線菌門(mén)(Actinobacteria)、螺旋菌門(mén)(Spirochaetes)、脫鐵桿菌門(mén)(Deferribacteres)、疣微菌門(mén)(Verrucomicrobia)。各組最優(yōu)勢(shì)地位的菌門(mén)均為擬桿菌門(mén)，次級(jí)優(yōu)勢(shì)地位的菌門(mén)為厚壁菌門(mén)，從整體上看，蘇氨酸組和異亮氨酸組的厚壁菌門(mén)相對(duì)豐度大于對(duì)照組。

圖4 各組(Ⅰ)和各樣品(Ⅱ)皖西白鵝盲腸菌群在門(mén)水平上的相對(duì)豐度

由表6可知，90日齡時(shí)，異亮氨酸組盲腸軟壁菌門(mén)(Tenericutes)相對(duì)豐度極顯著高于對(duì)照組和蘇氨酸組(P<0.01)。各組之間盲腸其余菌門(mén)相對(duì)豐度無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表6 90日齡皖西白鵝盲腸菌群門(mén)水平相對(duì)豐度

皖西白鵝盲腸微生物在屬水平上組成如圖5所示，在屬水平上物種注釋共獲得21個(gè)屬，位于前10的優(yōu)勢(shì)菌屬分別為：擬桿菌屬(Bacteroides)、瘤胃球菌科未分類(lèi)菌屬(unspecified_Ruminococcaceae)、糞桿菌屬(Faecalibacterium)、顫螺旋菌屬(Oscillospira)、普雷沃菌屬(Prevotella)、梭菌未分類(lèi)屬(unspecified_Clostridiales)、擬桿菌未分類(lèi)屬(unspecified_Bacteroidales)、瘤胃球菌屬(Ruminococcus)、罕見(jiàn)小球菌屬(Subdoligranulum)、消化球菌屬(Peptococcus)。

圖5 各組(Ⅰ)和各樣品(Ⅱ)皖西白鵝盲腸菌群在屬水平上的相對(duì)豐度

由表7可知，90日齡時(shí)，蘇氨酸組盲腸顫螺旋菌屬、消化球菌屬和S24_7科未分類(lèi)菌屬(unspecified_S24_7)相對(duì)豐度顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。蘇氨酸組盲腸消化球菌屬和S24_7科未分類(lèi)菌屬相對(duì)豐度顯著異高于異亮氨酸組(P<0.05)。各組之間盲腸其余菌屬相對(duì)豐度無(wú)顯著差異(P>0.05)。

表7 90日齡皖西白鵝盲腸菌群屬水平相對(duì)豐度

3 討 論

3.1 蘇氨酸和異亮氨酸對(duì)皖西白鵝生長(zhǎng)性能的影響

作為功能性氨基酸，蘇氨酸和異亮氨酸可改善畜禽生長(zhǎng)性能。額外補(bǔ)充蘇氨酸和異亮氨酸可提高仔豬和育肥豬的生長(zhǎng)性能[13-14]。Lin等[15]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加5.5、5.7、6.9和8.1 g/kg的異亮氨酸可顯著增加黃羽肉雞體重。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加異亮氨酸提高了30～60日齡皖西白鵝的ADFI，飼糧中添加異亮氨酸和蘇氨酸均降低了61～90日齡皖西白鵝的F/G。蘇氨酸是胃腸道黏蛋白的重要組成部分，在調(diào)節(jié)營(yíng)養(yǎng)代謝、大分子生物合成和腸道平衡方面起著重要作用[16]。異亮氨酸在整個(gè)機(jī)體的生理功能中起著生長(zhǎng)、免疫、蛋白質(zhì)代謝、脂肪酸代謝和葡萄糖運(yùn)輸?shù)裙δ?，其還可以改善免疫功能[17]。異亮氨酸對(duì)葡萄糖和脂質(zhì)代謝有顯著影響，低水平的異亮氨酸會(huì)降低禽類(lèi)的體重，相反，高水平的異亮氨酸可以改善畜禽的脂質(zhì)和葡萄糖代謝，減少脂肪積累[18-20]。前人報(bào)道和本試驗(yàn)結(jié)果均表明，適宜水平的蘇氨酸和異亮氨酸可提高畜禽的生長(zhǎng)性能，異亮氨酸和蘇氨酸提高皖西白鵝生長(zhǎng)性能的可能機(jī)制是與盲腸微生物組成和組織結(jié)構(gòu)變化有關(guān)，后文將進(jìn)行深入討論。另外，基于此2種氨基酸在鵝體內(nèi)代謝特點(diǎn)研究較少，下一步可探究蘇氨酸和異亮氨酸在鵝體內(nèi)的消化代謝特點(diǎn)及其生物學(xué)功能。

3.2 蘇氨酸和異亮氨酸對(duì)皖西白鵝盲腸組織形態(tài)和細(xì)胞因子含量的影響

與哺乳動(dòng)物不同，禽類(lèi)盲腸結(jié)構(gòu)具有皺襞和絨毛。鵝是草食性的家禽，盲腸是其消化纖維并吸收的主要部位。因此，盲腸的組織結(jié)構(gòu)和盲腸內(nèi)微生物對(duì)鵝的生長(zhǎng)和健康有重要的作用。腸道的絨毛高度、隱窩深度和絨毛高度/隱窩深度是衡量腸道消化吸收的重要指標(biāo)[18-21]。Tang等[16]發(fā)現(xiàn)額外補(bǔ)充蘇氨酸會(huì)增加空腸絨毛高度與隱窩深度的比率。我們前期研究發(fā)現(xiàn)，飲水中添加2.5 mg/mL異亮氨酸顯著提高了小腸的絨毛高度和絨毛高度/隱窩深度，顯著降低了隱窩深度[22]。但是關(guān)于氨基酸對(duì)水禽尤其鵝的盲腸結(jié)構(gòu)和功能影響的研究較為缺乏。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加異亮氨酸提高了60日齡皖西白鵝盲腸絨毛高度，飼糧中添加蘇氨酸對(duì)鵝盲腸絨毛高度和隱窩深度影響不顯著。盲腸屬于消化道后端，絨毛比前段的短，盲腸主要依靠微生物消化，所以盲腸菌群是其消化能力的體現(xiàn)。

Azzam等[23]發(fā)現(xiàn)補(bǔ)充蘇氨酸顯著增加了蛋雞回腸IgM、IgG和SIgA含量。Dong等[24]發(fā)現(xiàn)飼糧中添加1.0、2.0、3.0和4.0 g/kg的異亮氨酸對(duì)血清IgM、IgG和SIgA含量無(wú)顯著影響，對(duì)回腸SIgA、TNF-α、IL-2含量無(wú)顯著影響。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，各組之間盲腸IgG、IgA、IgM、SIgA、IL-2含量無(wú)顯著差異，與對(duì)照組相比，蘇氨酸組和異亮氨酸組的盲腸TNF-α含量顯著下降，蘇氨酸組的盲腸IL-2、IFN-γ含量顯著增加。TNF-α是腸道黏膜免疫中的促炎因子，過(guò)多會(huì)造成不必要的炎癥反應(yīng)，使血管通透性增加、細(xì)胞損傷，影響動(dòng)物的健康；IL-2、IL-4在抗腫瘤調(diào)節(jié)起到了至關(guān)重要的作用。蘇氨酸組盲腸IFN-γ含量顯著增加，與Wils-Plotz等[25]研究結(jié)果相反，Wils-Plotz等[25]發(fā)現(xiàn)添加高蘇氨酸組的感染球蟲(chóng)病肉雞盲腸扁桃體IFN-γ基因的表達(dá)最低。IFN-γ是一種病毒抑制性細(xì)胞因子[26]，IFN-γ含量高說(shuō)明體內(nèi)病毒含量也高。IFN-γ主要是由自然殺傷(NK)細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的[27]，在NK和T淋巴細(xì)胞中白細(xì)胞介素-12(IL-12)和白細(xì)胞介素-18(IL-18)結(jié)合會(huì)進(jìn)一步增加IFN-γ的產(chǎn)生[28]，而IL-2有刺激NK和T淋巴細(xì)胞增殖的作用，本試驗(yàn)的蘇氨酸組盲腸IFN-γ含量顯著高于對(duì)照組，可能與蘇氨酸組盲腸IL-2含量顯著升高有關(guān)。這說(shuō)明皖西白鵝額外添加蘇氨酸和異亮氨酸對(duì)皖西白鵝免疫功能有一定影響。

3.3 蘇氨酸和異亮氨酸對(duì)皖西白鵝盲腸微生物區(qū)系的影響

鵝能消化利用纖維素主要依賴(lài)于腸道微生物[29]。多樣性高的腸道微生物宿主可能更健康[30]。多種因素可以影響鵝盲腸微生物，在養(yǎng)殖水體中添加光合細(xì)菌可以顯著改變揚(yáng)州鵝腸道菌群結(jié)構(gòu)[31]。在門(mén)水平上，厚壁菌門(mén)、變形菌門(mén)和擬桿菌門(mén)是鵝的主要腸道菌群，強(qiáng)制喂食加糖飼糧可以使天府肉鵝空腸厚壁菌門(mén)相對(duì)豐度增加，盲腸擬桿菌門(mén)相對(duì)豐度增加[32]；在基礎(chǔ)飼糧添加5%木薯葉處理對(duì)海南本地鵝盲腸中的微生物群落有顯著影響[33]。

鵝利用纖維素是腸道中的微生物分泌消化酶，特別是纖維素酶，其盲腸的纖維素酶活性最高[34]。類(lèi)桿菌屬、瘤胃球菌屬、梭狀芽孢桿菌屬和假單胞菌屬是重要的纖維素分解細(xì)菌[35]。本研究發(fā)現(xiàn)，蘇氨酸組和異亮氨酸組的盲腸瘤胃球菌科未分類(lèi)菌屬相對(duì)豐度較對(duì)照組都有提高，同時(shí)蘇氨酸組的盲腸消化球菌屬相對(duì)豐度顯著高于對(duì)照組，說(shuō)明飼喂蘇氨酸和異亮氨酸可以提高纖維素的消化能力。飼糧中添加蘇氨酸和異亮氨酸后皖西白鵝的生長(zhǎng)性能提高可能與盲腸內(nèi)菌群變化有關(guān)，蘇氨酸和異亮氨酸都增加了盲腸內(nèi)厚壁菌門(mén)、擬桿菌屬和顫螺旋菌屬相對(duì)豐度。首先，厚壁菌門(mén)與從飼料中獲取能量和養(yǎng)分吸收(如不溶性纖維降解)的能力有關(guān)[36]；其次，擬桿菌屬能促進(jìn)腸道食糜分解，提高其利用率，提高免疫能力，維持腸道維生態(tài)平衡[37]；再次，顫螺旋菌能將糖、淀粉等發(fā)酵轉(zhuǎn)化為短鏈脂肪酸，短鏈脂肪酸作為腸上皮細(xì)胞的首選能量，能抑制腸炎保護(hù)腸上皮細(xì)胞，對(duì)腸道健康具有重要作用[38]。盲腸微生物菌群的變化也影響盲腸組織結(jié)構(gòu)的改變，包括絨毛生長(zhǎng)和隱窩深度變化，另外，由于微生物組成改變?cè)斐杉?xì)菌對(duì)盲腸上皮刺激改變，因此盲腸的免疫功能相關(guān)因子表達(dá)水平也受到影響。

4 結(jié) 論

① 飼糧中添加2.0 g/kg蘇氨酸或2.5 g/kg異亮氨酸均可一定程度提高皖西白鵝生長(zhǎng)性能，異亮氨酸對(duì)60日齡盲腸組織結(jié)構(gòu)的影響較大，蘇氨酸對(duì)90日齡盲腸組織結(jié)構(gòu)的影響較大。

② 飼糧中添加2.5 g/kg異亮氨酸增加了皖西白鵝盲腸軟壁菌門(mén)相對(duì)豐度，飼糧中添加2.0 g/kg蘇氨酸增加了皖西白鵝盲腸顫螺旋菌屬、消化球菌屬和S24_7科未分類(lèi)菌屬相對(duì)豐度。