朱嵐　　申衛(wèi)紅　　劉敏

[摘要] 目的 探討2018～2020年江南大學附屬醫(yī)院細菌室血培養(yǎng)檢出的陽性菌株的分布及其相關藥敏的數據，為醫(yī)院科室挑選抗微生物用藥提供理論數據。方法? 收集2018～2020年江南大學附屬醫(yī)院收治的住院患者血培養(yǎng)陽性菌株，采用儀器法或手工法進行藥敏試驗，從而得出2018～2020年血培養(yǎng)分離出臨床病原菌的分布情況及耐藥性。結果? 3年間檢驗科微生物室共分離出血培養(yǎng)病原菌1816株，其中革蘭陰性桿菌1058株，占58.26%，革蘭陽性球菌682株，占37.56%，真菌76株，占4.18%。其中前幾位主要為肺炎克雷伯菌（461株，25.38%）、凝固酶陰性葡球菌（301株，16.58%）、大腸埃希菌（335株，18.44%）、金黃色葡萄球菌（205株，11.29%）和腸球菌屬（118株，6.48%）。藥物敏感試驗發(fā)現：革蘭陰性桿菌對哌拉西林、頭孢唑啉以及氨芐西林的耐藥率高于其他抗菌藥物;G-細菌對阿米卡星以及多黏菌素B、碳青酶烯類敏感度較高。另外，革蘭陽性球菌中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）的耐藥率分別為40.63%和65.32%。革蘭陽性球菌對大部分青霉素相關藥物、環(huán)丙沙星、四環(huán)素等抗菌藥物的耐藥性逐漸上升，對萬古霉素、利奈唑胺均敏感。結論? 2018～2020年江南大學附屬醫(yī)院住院患者血培養(yǎng)陽性細菌大部分為G-細菌，其中肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌、大腸埃希菌這三種細菌的耐藥率逐漸上升。因此，臨床細菌室和必須定期監(jiān)測陽性細菌的耐藥率，從而為臨床合理用藥提供理論依據。

[關鍵詞] 血培養(yǎng);血流感染;耐藥性;抗菌藥物;病原菌

[中圖分類號] R446.5? ? ? ? ? [文獻標識碼] B? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2022）16-0120-04

Analysis on the distribution and drug resistance of pathogenic bacteria causing blood stream infections in Affiliated Hospital of Jiangnan University from 2018 to 2020

ZHU Lan? ?SHEN Weihong? ?LIU Min

Department of Laboratory Medicine， Affiliated Hospital of Jiangnan University， Wuxi 214041， China

[Abstract] Objective? To investigate the composition and drug resistance distribution of pathogenic strains isolated from blood cultures in the clinical microbiology laboratory of the Affiliated Hospital of Jiangnan University from 2018 to 2020， so as to provide references for rational selection of anti-infective drugs in clinical practice. Methods The blood culture positive strains of inpatients in the Affiliated Hospital of Jiangnan University from January 2018 to December 2020 were collected. The antimicrobial susceptibility testing was carried out by French bioMérieux fully automated drug susceptibility instrument method or disk diffusion method （K-B method）， and the distribution and drug resistance of clinical pathogenic bacteria isolated from blood cultures from January 2018 to December 2020 were retrospectively analyzed. Results In the three years， a total of 1816 strains of pathogenic bacteria were isolated from blood cultures in the microbiology laboratory of the Department of Laboratory Medicine， including 1058 strains of gram-negative bacilli， accounting for 58.26%， 682 strains of gram-positive cocci， accounting for 37.56%， and 76 strains of fungi， accounting for 4.18%. The top pathogenic bacteria were Klebsiella pneumoniae （461 strains， 25.38%）， coagulase-negative staphylococcus （301 strains， 16.58%）， Escherichia coli （335 strains， 18.44%）， Staphylococcus aureus （205 strains， 11.29%） and Enterococcus （118 strains， 6.48%）. Drug susceptibility testing showed that the drug resistance rate of gram-negative bacilli to piperacillin， cefazolin and ampicillin was higher than that to other antibiotics. Gram-negative bacilli were highly sensitive to aminoglycosides including amikacin， polymyxin B and carbapenems. In addition， we found that for gram-positive cocci， the drug resistance rates of methicillin-resistant Staphylococcus aureus （MRSA） and methicillin-resistant coagulase-negative Staphylococci （MRCNS） in clinic were 40.63% and 65.32% respectively. The resistance rate of gram-positive cocci to most penicillins， ciprofloxacin， tetracycline and other related drugs showed an upward trend， and no gram-positive cocci resistant to vancomycin and linezolid were found. Conclusion From January 2018 to December 2020， the pathogens causing blood stream infections in inpatients in the Affiliated Hospital of Jiangnan University were mainly gram-negative bacilli， and the drug resistance rates of Klebsiella pneumoniae， Escherichia coli and Acinetobacter baumannii showed an upward trend year by year. Therefore， the microbiology laboratory and the infection department in the hospital shall regularly monitor the drug resistance of various pathogenic bacteria for clinical rational drug use.

[Key words] Blood culture; Blood stream infection; Drug resistance; Antibiotics; Pathogenic bacteria

近年來，臨床上不同部位多次血培養(yǎng)陽性，診斷為血液感染的病例不斷增加。它由不同致病細菌侵入人體血液而導致的疾病，血流感染病死率高，給人們的生活帶來嚴重的危害。因而，臨床上如何減少血液感染的發(fā)生，給醫(yī)務工作者帶來很大的挑戰(zhàn)。各家醫(yī)院由于許多抗感染藥物的廣泛使用，使得越來越多的病原微生物耐藥性逐年上升，給臨床用藥帶來極大的挑戰(zhàn)。各種超級耐藥的細菌層出不窮，使患者的生命健康得到很大威脅[1，2]。江南大學附屬醫(yī)院臨床細菌室重點通過血培養(yǎng)檢查，即時開展血流感染致病菌的監(jiān)測，從而大致明確各種致病菌的種類以及對抗生素的耐藥性等，給臨床醫(yī)生在用藥方面提供理論數據，減少各種“超級細菌”的出現，增加用藥的準確性及有效性。通過與醫(yī)院感染科共同協(xié)作，臨床微生物室通過血培養(yǎng)常規(guī)監(jiān)測，從而為降低血流感染的發(fā)病率提供實驗數據，減少醫(yī)院感染的發(fā)生率，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 資料來源

采集2018～2020年江南大學附屬醫(yī)院各科室送檢的血培養(yǎng)樣本，包括需氧和厭氧血培養(yǎng)，并從其中篩選出致病菌菌株。按臨床微生物實驗室血培養(yǎng)操作規(guī)范[1]中列出的菌株診斷標準，所得菌株為病原菌。3年間微生物室共分離出血培養(yǎng)病原菌1816株，其中革蘭陰性桿菌1058株（58.26%），革蘭陽性球菌682株（37.56%），真菌76株（4.18%）。

1.2 方法

1.2.1 細菌鑒定及藥物敏感度試驗? 采用法國生物梅里埃公司生產的全自動質譜分析儀鑒定分離出的病原菌，藥物敏感試驗采用機器法或手工藥敏法進行測定。操作步驟見儀器廠家操作說明以及《全國臨床檢驗操作規(guī)程第3版》[3]補充操作。相關質控菌株分別為：金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、肺炎鏈球菌以及大腸埃希菌，以上菌株均來自國家衛(wèi)生健康委員會下發(fā)的室間比對菌株。藥敏試驗的判讀與解釋參照2017年美國臨床和實驗室標準化協(xié)會（American Society for clinical and laboratory standardization，CLSI）推薦的標準及方法進行操作[4]。

1.2.2 病原菌種分布? 收集2018～2020年江南大學附屬醫(yī)院各病區(qū)送檢的血培養(yǎng)標本，共分離出病原菌1816株，分析其分布。

1.2.3 分析血培養(yǎng)分離的革蘭陰性桿菌對部分藥物的耐藥率? 通過對梅里埃VITEK 2 Compact儀器法及紙片擴散法（K-B）的藥敏結果進行統(tǒng)計，分析常見革蘭陰性桿菌對部分藥物的敏感度。

1.2.4 分析血培養(yǎng)分離的革蘭陽性球菌對部分藥物的耐藥率? 通過對通過法國生物梅里埃公司生產的手工真菌藥敏試劑盒結果梅里埃VITEK 2 Compact儀器法及紙片擴散法（K-B）的藥敏結果進行統(tǒng)計，分析G+球菌對藥物的耐藥性。

1.2.5 分析血培養(yǎng)分離的常見真菌對部分藥物的耐藥率? 通過對通過法國生物梅里埃公司生產的手工真菌藥敏試劑盒結果進行統(tǒng)計，分析常見真菌對部分藥物的敏感度。

1.3 統(tǒng)計學方法

使用WHONET 5.6研究血流感染病原菌對相關藥物的敏感度，導出數據從而得出相關的數據進行耐藥性分析，指導臨床合理用藥。

2 結果

2.1 病原菌種分布

統(tǒng)計2018～2020年本院各科室送來的血培養(yǎng)樣本，陽性致病菌株共1816株，其中G-桿菌共1058例，占58.26%，G+球菌共682例，占37.56%，真菌76株，占4.18%。見表1。

2.2 血培養(yǎng)分離的革蘭陰性桿菌對部分藥物的耐藥率

通過梅里埃VITEK 2 Compact儀器法及紙片擴散法（K-B）的藥敏結果顯示，分離出的常見革蘭陰性桿菌對一代頭孢類藥物如頭孢唑啉以及替卡西林的藥物敏感度僅10.0%左右，而臨床分離的銅綠假單胞菌對大部分青霉素的藥物的敏感度也僅有10.0%左右，因而要引起臨床醫(yī)生格外重視;非發(fā)酵革蘭陰性桿菌對氨基糖苷類藥物如阿米卡星以及多黏菌素B、碳青酶烯類敏感度較高;而對對亞胺培南、頭孢替坦、頭孢他啶及氨芐西林/舒巴坦的敏感度是逐年下降的，也屬于院內感染的重要致病菌。見表2。

2.3 血培養(yǎng)分離的常見革蘭陽性球菌對部分藥物的耐藥率

通過梅里埃VITEK 2 Compact機器法及紙片擴散法（K-B）的藥敏結果表明：革蘭陽性球菌中MRSA的耐藥率為40.63%。各種葡萄球菌對萬古霉素、利奈唑胺敏感度均為100%;革蘭陽性球菌對克林霉素以及紅霉素的敏感度<34%;凝固酶陰性葡萄球菌對四環(huán)素、氨基糖苷類以及氟奎諾酮類藥物的敏感度高于金黃色葡萄球菌。見表3～4。

2.4 常見真菌對部分藥物的耐藥率

2018 ～2020年微生物室血培養(yǎng)標本鑒定出的真菌主要為白色念珠菌、光滑念珠菌和近平滑念珠菌，通過法國生物梅里埃公司生產的手工真菌藥敏試劑盒結果顯示，主要對伊曲康唑、5-氟胞嘧啶、兩性霉素B的耐藥率較低，耐藥率<4.4%;對氟康唑等藥物的耐藥率較高，耐藥率>28%。見表5。

3 討論

臨床血流所引起的感染，相關臨床癥狀為：驟發(fā)寒戰(zhàn)、高熱、皮疹、肝脾腫大等常見臨床表現。血流感染病死率高，給人們的生活帶來嚴重的危害，需要引起臨床醫(yī)務工作者的重視[5]。本研究統(tǒng)計2018～2020年江南大學附屬醫(yī)院各科室送來的血培養(yǎng)樣本，陽性致病菌株共1816株，其中G-桿菌共1058例，占58.26%，G+球菌共682例，占37.56%，真菌76株，占4.18%。數據與同一時段中國耐藥監(jiān)測網的血培養(yǎng)數據大致相當[6，7]。

本研究結果顯示，常見革蘭陰性桿菌對一代頭孢類藥物如頭孢唑啉以及替卡西林的藥物敏感度僅有10.0%左右，而臨床分離的銅綠假單胞菌對大部分青霉素的藥物的敏感度也僅有10.0%左右，這要引起臨床醫(yī)生格外重視;非發(fā)酵革蘭陰性桿菌普遍對多黏菌素B、氨基糖苷類藥物如阿米卡星以及多黏菌素B、碳青酶烯類敏感度較高;但臨床發(fā)現鮑曼不動桿菌對亞胺培南、頭孢他啶、及氨芐西林/舒巴坦的敏感度也是逐漸下降的;但對多黏菌素B以及米諾環(huán)素則是非常敏感的，因此臨床在治療由腸桿科細胞感染的疾病里，必須選合適的藥物進行治療，從而提高藥物敏感度[8～10]。非發(fā)酵菌如鮑曼不動桿菌只能選擇如替加環(huán)素、多黏菌素B等昂貴且副作用很大的藥物，這對患者的負擔非常重[9～12]。

另外，這三年間的藥敏結果分析顯示，葡萄球菌對萬古霉素和利奈唑胺的敏感度均為100%，而對苯唑西林以及青霉素等耐藥率>73%，臨床應避免使用這些藥物;金黃色葡萄球菌對四環(huán)素、左氧氟沙星以及慶大霉素的敏感度越來越低，這需引起臨床重視。未檢測出對利奈唑胺、萬古霉素耐藥的腸球菌[13～16]。

綜上所述，通過對2018～2020年江南大學附屬醫(yī)院各病區(qū)送檢的血培養(yǎng)標本的研究發(fā)現，許多病原菌對各種藥物的耐藥率呈不高程度的上升，這給臨床醫(yī)生合理用藥帶來很大挑戰(zhàn)，必須綜合分析藥敏報告，結合病史進行聯合用藥，從而達到減少細菌耐藥的目的。

[參考文獻]

[1]? ?臨床微生物實驗室血培養(yǎng)操作規(guī)范 臨床微生物實驗室血培養(yǎng)操作規(guī)范[S].中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準WS/T 503-2017，2017.

[2]? ?Ursula T，Kevin O，Aleks E，et al. The global preclinical antibacterial pipeline[J].Nat Rev Microbiol，2020，18（5）：275-285.

[3]? ?葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版.南京：東南大學出版社，2006：744-745.

[4]? ?Clinical and Laboratory Standards Institute （CLSI）. Performance standards for antimicrobial susceptibility testing[S].2020：M100.

[5]? ?陳云波，嵇金如，應超群，等.2014至2015年全國血流感染細菌耐藥監(jiān)測報告[J].中華臨床感染病雜志，2019， 12（1）：24.

[6]? ?胡付品，郭燕，朱德妹，等.2016年中國CHINET細菌耐藥性監(jiān)測[J].中國感染與化療雜志，2017，17（5）：481-491.

[7]? ?胡付品，郭燕，朱德妹，等.2017年CHINET中國細菌耐藥性監(jiān)測[J].中國感染與化療雜志，2018，18（3）：241-251.

[8]? ?Seok HN，Dong CM，Hee YK，et al. Molecular characteristics of extended-spectrum β-lactamase/AmpC-producing Salmonella enterica serovar Virchow isolated from food-producing animals during 2010—2017 in South Korea[J].Int J Food Microbiol，2020，24（2）：322.

[9]? ?Zhang JM，Liu J，Wang K，et al. Observations of bacterial biofilmon ureteral stent andstudies on the distribution of pathogenic bacteria and drug resistance[J].Urol Int，2018， 13：1-7.

[10]? Lee CR，Lee JH，Park M，et al. Biology of Acinetobacter baumannii： Pathogenesis，antibiotic resistance mechanisms，and prospective treatment options[J].Front Cell Infect Microbiol，2017，7：55.

[11]? 廖平明.金黃色葡萄球菌分布及耐藥性分析[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2017，14（A01）：65-67.

[12]? 徐慧，徐岷，劉彩林，等.2014—2019年鄭州大學第一附屬醫(yī)院血培養(yǎng)分離病原菌臨床布及耐藥性分析[J].現代檢驗醫(yī)學雜志，2021，36（1）：136-140.

[13]? Kang CM，Chen XJ，Chih CC，et al. Rapid identification of bloodstream bacterial and fungal pathogens and their antibiotic resistance determinants from positively flagged blood cultures using the BioFire FilmArray blood culture identification panel[J].J Microbiol Immunol Infect，2020， 53（6）：882-891.

[14]? Chen SZ，Lin KN，Xiao M，et al. Distribution and drug resistance of pathogens of blood stream infection in patients with hematological malignancies after chemotherapy[J].Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi，2017，38（11）：951-955.

[15]? Mao SL，Ge Z，Zhao H，et al. Analysis on distribution and drug resistance of pathogen caused community-onset bloodstream infection[J].Zhonghua Wei Zhong Bing Ji Jiu Yi Xue，2019，31（1）：67-72.

[16]? 錢璞，申衛(wèi)紅，朱嵐，等.2017—2019年江南大學附屬醫(yī)院病原菌的分布及耐藥性分析[J].現代藥物與臨床，2020，7：1478-1483

（收稿日期：2021-11-01）