劉傳敏 陳海棠

摘要：隨著新冠疫情的爆發(fā)，生物制藥受到越來越多的關注，生物藥由于本身的特性其清潔工藝開發(fā)和驗證方面的研究較化藥復雜和滯后，正文基于國內外清潔驗證相關法規(guī)與指南介紹了基于生命周期理論的清潔工藝開發(fā)、清潔確認、持續(xù)清潔確認三階段清潔驗證。

關鍵詞：生物制藥;清潔工藝;驗證;質量管理

【中圖分類號】 S859.79+7 【文獻標識碼】 A? ? ? 【文章編號】2107-2306（2022）10--01

0引言

近年來，生物技術藥物發(fā)展迅猛，生物制藥已逐漸發(fā)展為重點高新技術的支柱產(chǎn)業(yè)之一。生物藥設備、容器的清潔驗證作為生物制品質量體系中不可或缺的一環(huán)，其重要性愈加凸顯。越來越多的生物制藥企業(yè)也在關注如何有效開展生物藥的清潔驗證?；谒幤飞芷诶碚摰那鍧嶒炞C包括清潔工藝開發(fā)、清潔確認、持續(xù)清潔確認。

1清潔工藝開發(fā)

清潔工藝開發(fā)可按照“質量源于設計”的理念，進行相應的分析和研究，應制定清潔工藝，盡可能降低工藝殘留物水平，并為此確定合適的清潔劑。通過選擇最合適的清洗劑和清洗參數(shù)來優(yōu)化清洗工藝，在最短的時間內將工藝殘留物降低到風險最低的水平。在實驗室研究和中試研究階段應進行清潔工藝開發(fā)相關工作，實驗室研究包括清潔方法開發(fā)、產(chǎn)品理化性質分析、設備結構和材質分析、實驗室可清潔性研究等。在中試階段進行清潔效果確認?；谏锼幰鬃冃缘奶攸c，還需要關注水解后物質的特性和去除方式。若隨后的工藝步驟中可以去除早期清潔過程中所留下的殘留物，可以考慮不對早期的設備進行殘留物清潔驗證。

2 清潔確認

2.1? 風險評估

應進行清潔驗證前的評估，通過評估新增產(chǎn)品、批量擴大、已清潔設備保存期限、清潔方法、設備鏈、設備材質發(fā)生變化等情況確定需要是否需要開展清潔驗證、進行清潔驗證的產(chǎn)品、清潔驗證的設備、取樣點和檢測項目、可接受標準、需要開展的分析方法和取樣方法驗證等。

2.1.1 清潔驗證產(chǎn)品選擇：

清潔程序的驗證應當反映實際的設備使用及清潔情況。對同一或等同設備單元生產(chǎn)多個藥品，而清潔程序又相同的設備定義成一個產(chǎn)品組，對于這種，就要選擇代表性的藥品來做清潔驗證。根據(jù)溶解度、毒性、ADE/PDE值以及粘附力等方面來確定代表性的產(chǎn)品。

2.1.2 檢測項目與限度

目視檢查，目視檢查一般作為擦拭法和沖洗水法的前提，目視檢查一般不能作為單一的可接受標準，只有當風險評估顯示風險較低，且設備表面100%可以在適當?shù)挠^察條件下進行檢查時，僅使用目視檢查進行驗證才可以接受。目視檢查者應進行資格確認。

活性成分殘留，殘留物限度的確立建立在對所有相關物質的性質有足夠了解的基礎上，且所定的限度必須是務實、可確認的、可達到的、科學合理的。殘留物限度的確立需要考慮使用允許日暴露量PDE、10ppm、最低日治療劑量MDD、毒性數(shù)據(jù)LD50原則進行計算，選取最小值作為殘留限度。對于生物制品，可以基于工藝的特點，對上游和下游制定不同的限度標準。一般而言，下游工藝的TOC限度通常會更嚴格一些。對于只生產(chǎn)一種產(chǎn)品時，更高水平的限度是可以接受的?；谏镏破诽匦?，活性成分的限度可以根據(jù)分析方法進行轉換，如果分析方法是TOC，活性物質的限度可以基于TOC在活性成分中的含量（百分比）轉換成TOC限度。

2.1.3 取樣點

取樣位置的選擇應首先明確哪些部位和產(chǎn)品直接接觸，然后從直接接觸部分選擇較難清洗的部位作為取樣位置，比如形狀不規(guī)則、拐角處等，另外也可根據(jù)清洗人員的經(jīng)驗來確定較難清洗的點。對于不和產(chǎn)品直接接觸但某些情況下可能間接接觸的部分在也需要進行分析。對于設備設計、操作模式和可清潔性“相同”或“相似”的設備，可在評估后選擇具有代表性的設備或通過交叉法選擇清潔驗證設備。

2.1.4 取樣方法

取樣方法包括目檢，沖洗法，擦拭法，在取樣過程中，可采用多種取樣方法相結合的方式。所有的設備都要進行目檢。擦拭法適用于設備表面的取樣，沖洗法適用于無法采用擦拭法進行取樣的區(qū)域。取樣方法需要進行取樣回收率驗證。

2.2? 驗證文件

驗證方案要說明如何開展驗證活動，并包含明確的可接受標準。清潔驗證具體內容包括但不限于：概述、職責、清潔方法、取樣程序、分析方法說明、設備保留時間監(jiān)測說明、驗證過程中的注意事項、清潔驗證前條件確認、清潔驗證執(zhí)行、異常情況處理、清潔驗證報告、附件、確認記錄等。

驗證報告將包括驗證結果總結和數(shù)據(jù)分析、異常情況處理、總結與結論組成。清潔驗證分析與評價中需要對最終檢測結果詳細總結，包括失敗的試驗數(shù)據(jù)，當不能包括原始數(shù)據(jù)時，應說明原始數(shù)據(jù)的來歷和如何找到原始資料。對清潔數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，并根據(jù)數(shù)據(jù)建議出后續(xù)持續(xù)監(jiān)測需要進行監(jiān)測的位置和檢測項目、接受標準等。

3 再驗證

清潔再驗證分為兩種情況。

持續(xù)清潔工藝確認：每年對經(jīng)驗證合格的清潔方法進行周期性的回顧，確保該清潔方法一直處于被驗證的狀態(tài)，且符合現(xiàn)行法規(guī)的要求。對清潔方法的回顧內容至少包括：清潔操作是否始終按照經(jīng)驗證的方法進行操作和記錄;是否有新的法規(guī)要求;清潔過程中出現(xiàn)的偏差;周期性的回顧應保留書面的回顧記錄?；仡檻贸雒鞔_的結論，即是否需要重新進行清潔方法驗證。清潔驗證再驗證周期為5年，上述回顧分析如不開展再驗證工作，則按照原驗證效期執(zhí)行。

改變性驗證，在發(fā)生以下情況之一時，需進行再驗證：清潔劑濃度或處方、種類發(fā)生變化時;清潔程序或關鍵清潔參數(shù)有重要修改;清潔設備有重大變更;增加新產(chǎn)品（更差產(chǎn)品）等其他經(jīng)過評估需要進行時。

4 清潔效果持續(xù)監(jiān)控

清潔驗證完成后，應該對直接接觸產(chǎn)品的設備清潔方法進行持續(xù)監(jiān)控，按照清潔驗證中的數(shù)據(jù)分析對風險比較高、或者清潔工藝不穩(wěn)定或檢測結果偏高的點進行持續(xù)的監(jiān)測，可采用PAT技術。針對非PAT技術可以采用定期離線取樣快速分析的方法進行持續(xù)監(jiān)控。根據(jù)產(chǎn)品特性及清潔劑類型，選擇合適的分析方法，比如pH、電導率法、TOC等。

5.總結

綜合以上來看，應基于藥品生命周期理論的三階段清潔驗證開展清潔相關工作，并在研發(fā)階段對產(chǎn)品清潔工藝進行研究與分析，這些知識的積累將加深對藥品本身的理解，提高藥品全生命周期中質量風險的識別，建立更健全的生物制藥質量管控機制。

參考文獻：

[1]中國《藥品生產(chǎn)質量管理規(guī)范》（2010版），附錄：確認與驗證，第八章 清潔驗證

[2]《中國藥典》2020年版

[3]美國注射劑協(xié)會（PDA）TR29 清潔驗證考慮要點

[4]APIC? 活性藥物成分清潔驗證指南，2016年