朱榮英，朱艷芳，習(xí)靜

妊娠期糖尿?。╣estational diabetes mellitus，GDM）是以孕期出現(xiàn)糖代謝異常為主要特征的疾病，孕期血糖控制不佳將導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局的風(fēng)險(xiǎn)明顯增加［1］。目前，GDM的具體發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。部分研究發(fā)現(xiàn)，GDM患者存在明顯的氧化應(yīng)激反應(yīng)和炎癥反應(yīng)，兩者在疾病的發(fā)生、發(fā)展中起到了重要的作用［2-3］。親環(huán)素A（cyclophile A，Cyp A）是親環(huán)素家族的一員，為一種氧化應(yīng)激誘導(dǎo)分泌因子，可有效反映機(jī)體的氧化應(yīng)激水平，也可調(diào)控機(jī)體的免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)［4-5］。相關(guān)研究證實(shí)，Cyp A在糖尿病合并高血壓患者血清中異常高表達(dá)，且其表達(dá)水平與患者的氧化應(yīng)激反應(yīng)和炎癥反應(yīng)程度有關(guān)［6］。Wang等［7］研究也發(fā)現(xiàn)，GDM、子癇前期等妊娠常見并發(fā)癥患者的血清Cyp A水平明顯高于正常妊娠女性。本研究旨在進(jìn)一步探討Cyp A在GDM中的表達(dá)及其與氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)和妊娠結(jié)局的關(guān)系，以期為臨床提供參考。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選取2019年1月—2020年12月甘肅醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院收治的GDM患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）初次診斷為GDM，根據(jù)《妊娠合并糖尿病診治指南（2014）》中的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行診斷。（2）單胎妊娠，且為自然受孕。（3）臨床資料齊全，在本院分娩，有完整的隨訪資料。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并有心血管疾病、惡性腫瘤者。（2）肝腎功能異常或妊娠前糖尿病患者。（3）孕期因意外原因影響妊娠結(jié)局者。（4）治療依從性不好。共納入符合標(biāo)準(zhǔn)的患者96例（GDM組），年齡（27.47±5.21）歲，體質(zhì)量指數(shù)（23.96±2.64）kg/m2，入組孕周（26.41±1.06）周。另選取同期在我院孕檢顯示各項(xiàng)指標(biāo)均正常的妊娠女性40例作為對(duì)照組，年齡（26.98±3.26）歲，體質(zhì)量指數(shù)（23.79±2.31）kg/m2，入組孕周（26.12±1.23）周。2組年齡、體質(zhì)量指數(shù)及入組孕周差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t分別為0.551、0.354及1.386，均P＞0.05）。本研究已通過醫(yī)院倫理委員會(huì)審批，研究對(duì)象均簽署知情同意書。

1.2 研究方法 抽取研究對(duì)象空腹靜脈血10 mL，3 000 r/min離心10 min。硫代巴比妥酸比色法檢測(cè)血清丙二醛（malondialdehyde，MDA）水平；黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)血清超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）水平；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清8-異前列腺素F2α（8-iso-prostaglandin F2α，8-iso-PGF2α）、白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-6、超敏C反應(yīng)蛋白（high-sensitivity C-reactive protein，hs-CRP）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）以及Cyp A的水平。相關(guān)酶聯(lián)免疫試劑盒均購自上海信裕生物科技有限公司，相關(guān)檢測(cè)步驟均嚴(yán)格遵循試劑盒中的操作指南進(jìn)行。另收集所有研究對(duì)象的空腹血糖（fasting blood glucose，F(xiàn)BG）、糖化血紅蛋白（glycosylated hemoglobin，HbA1c）等臨床資料。

1.3 GDM治療方案及分組 參照《妊娠合并糖尿病診治指南（2014）》對(duì)GDM患者進(jìn)行規(guī)范性治療，前期主要采用飲食控制、合理運(yùn)動(dòng)控制血糖；若效果不明顯，必要時(shí)采用胰島素治療，血糖控制目標(biāo)為FBG＜5.3 mmol/L。對(duì)GDM患者的妊娠結(jié)局進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，包括巨大兒、新生兒低血糖、胎膜早破、胎盤早剝、早產(chǎn)、子癇前期等不良妊娠結(jié)局的發(fā)生情況。出現(xiàn)以上情況中的一種或多種即可判定為存在不良妊娠結(jié)局，作為不良妊娠組（39例），未出現(xiàn)不良妊娠結(jié)局的作為正常妊娠組（57例），比較2組的相關(guān)指標(biāo)差異。GDM組血清Cyp A中位數(shù)水平為5.26（4.13，6.21）mg/L，據(jù)此水平又分為高表達(dá)組（Cyp A＞5.26 mg/L）47例和低表達(dá)組（Cyp A≤5.26 mg/L）49例，比較這2組的不良妊娠的發(fā)生情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 22.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以±s表示，2組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以例或例（%）表示，2組間比較采用χ2檢驗(yàn)或Fisher確切概率法。相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)照組和GDM組相關(guān)因子表達(dá)及FBG、HbA1c水平比較 與對(duì)照組比較，GDM組Cyp A、MDA、8-iso-PGF2α、IL-6、hs-CRP、TNF-α、FBG、HbA1c水平升高，SOD水平降低（P＜0.05），見表1。

Tab.1 Serum expression levels of Cyp A,oxidative stress index and inflammatory factors in the control group and the GDMgroup表1對(duì)照組和GDM組血清Cyp A、氧化應(yīng)激指標(biāo)、炎性因子的表達(dá)情況 （±s）

Tab.1 Serum expression levels of Cyp A,oxidative stress index and inflammatory factors in the control group and the GDMgroup表1對(duì)照組和GDM組血清Cyp A、氧化應(yīng)激指標(biāo)、炎性因子的表達(dá)情況 （±s）

＊＊P＜0.01。

組別對(duì)照組GDM組t n 40 96 Cyp A（mg/L）3.54±1.02 5.18±1.69 5.712＊＊氧化應(yīng)激指標(biāo)MDA（μmol/L）4.56±1.37 6.46±2.34 4.798＊＊SOD（U/L）108.64±17.21 80.39±12.48 10.705＊＊8-iso-PGF2α（μg/L）18.64±2.28 23.45±4.33 6.643＊＊組別對(duì)照組GDM組t炎性因子指標(biāo)IL-6（pg/L）13.16±5.32 21.78±7.34 6.722＊＊hs-CRP（mg/L）4.07±1.25 14.23±4.11 15.313＊＊TNF-α（ng/L）9.42±3.18 16.96±5.21 8.506＊＊FBG（mmol/L）4.54±0.38 5.54±0.42 12.999＊＊HbA1c（%）5.62±0.33 6.97±0.83 9.947＊＊

2.2 不同妊娠結(jié)局的GDM患者的血清相關(guān)指標(biāo)表達(dá)情況比較 與正常妊娠組比較，不良妊娠組Cyp A、MDA、8-iso-PGF2α、IL-6、hs-CRP、TNF-α、FBG、HbA1c水平升高，SOD水平降低（P＜0.05），見表2。

2.3 GDM患者血清Cyp A水平與其他指標(biāo)的相關(guān)性 GDM患者血清Cyp A水平與FBG、HbA1c、MDA、8-iso-PGF2α、IL-6、hs-CRP、TNF-α均呈正相關(guān)（r分別為0.396、0.331、0.458、0.427、0.321、0.496、0.438，P＜0.05），與SOD呈負(fù)相關(guān)（r=-0.394，P＜0.05）。

Tab.2 Serum expression levels of Cyp A,oxidative stress index and inflammatory factors in GDMpatients with different pregnancy outcomes表2不同妊娠結(jié)局的GDM患者血清Cyp A、氧化應(yīng)激指標(biāo)、炎性因子的表達(dá)情況比較 （±s）

Tab.2 Serum expression levels of Cyp A,oxidative stress index and inflammatory factors in GDMpatients with different pregnancy outcomes表2不同妊娠結(jié)局的GDM患者血清Cyp A、氧化應(yīng)激指標(biāo)、炎性因子的表達(dá)情況比較 （±s）

＊P＜0.05，＊＊P＜0.01。

組別正常妊娠組不良妊娠組t n 57 39 Cyp A（mg/L）4.52±1.62 6.14±1.73 4.681＊＊氧化應(yīng)激指標(biāo)MDA（μmol/L）5.98±1.97 7.16±2.51 2.576＊SOD（U/L）83.13±12.68 76.38±10.12 2.773＊8-iso-PGF2α（μg/L）22.10±4.02 25.42±4.51 3.781＊＊組別正常妊娠組不良妊娠組t炎性因子指標(biāo)IL-6（pg/L）20.16±7.24 24.15±7.53 2.609＊hs-CRP（mg/L）12.12±3.98 17.32±4.81 5.773＊＊TNF-α（ng/L）15.42±5.08 19.21±6.02 3.328＊FBG（mmol/L）5.39±0.36 5.76±0.45 4.464＊＊HbA1c（%）6.69±0.75 7.38±0.85 4.193＊＊

2.4 GDM患者的血清Cyp A表達(dá)水平與不良妊娠的關(guān)系 高、低表達(dá)組的新生兒低血糖、胎膜早破、胎盤早剝及早產(chǎn)發(fā)生率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與低表達(dá)組比較，高表達(dá)組巨大兒、子癇前期發(fā)生率較高（P＜0.05），見表3。

Tab.3 Relationship between serum Cyp A expression level and adverse pregnancy in patients with GDM表3 GDM患者的血清Cyp A表達(dá)水平與不良妊娠的關(guān)系［例（%）］

3 討論

近年來，隨著二胎政策的開放，我國GDM的發(fā)病率呈升高趨勢(shì)［8］。GDM可對(duì)孕婦、胎兒以及新生兒產(chǎn)生不利的影響，且還會(huì)增加產(chǎn)后糖尿病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，因此合理防治GDM具有重要的臨床意義。

氧化應(yīng)激是指機(jī)體氧化和抗氧化能力失衡，活性氧大量產(chǎn)生而抗氧化體系的清除能力不足，從而損傷胰島β細(xì)胞，導(dǎo)致其發(fā)生功能障礙，并可促進(jìn)細(xì)胞凋亡［9］。此外，氧化應(yīng)激反應(yīng)還會(huì)影響胰島素受體和受體底物的磷酸化，進(jìn)而促進(jìn)胰島素抵抗的發(fā)生、發(fā)展［10］。已有大量研究顯示，GDM患者存在明顯的炎癥狀態(tài)，IL-6、TNF-α等炎性因子均具有明顯的胰島素拮抗作用，而機(jī)體的炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)可相互促進(jìn)，兩者共同推進(jìn)GDM的進(jìn)展［11-12］。MDA、8-iso-PGF2α均是重要的過氧化產(chǎn)物，而SOD則是機(jī)體最重要的內(nèi)源性抗氧化酶。IL-6、hs-CRP、TNF-α是臨床常見的炎性因子，三者均可有效反映機(jī)體的炎癥反應(yīng)程度。本研究結(jié)果顯示，GDM組MDA、8-iso-PGF2α、IL-6、hs-CRP、TNF-α水平均高于對(duì)照組，SOD水平低于對(duì)照組，提示GDM患者存在明顯的氧化應(yīng)激反應(yīng)和炎癥反應(yīng)；而進(jìn)一步的分析發(fā)現(xiàn)，不良妊娠組的MDA、8-iso-PGF2α、IL-6、hs-CRP、TNF-α水平均高于正常妊娠組，SOD水平低于正常妊娠組，表明氧化應(yīng)激反應(yīng)和炎癥反應(yīng)與GDM患者的妊娠結(jié)局存在一定關(guān)聯(lián)，這與相關(guān)研究［13-14］結(jié)果一致。

Cyp A是在生物界廣泛存在的一種蛋白，編碼基因位于染色體7p13，由165個(gè)氨基酸組成，分子質(zhì)量為18 ku，是一種典型的小親環(huán)素，參與了胞內(nèi)運(yùn)輸、信號(hào)傳導(dǎo)、蛋白折疊及其組裝等生物活動(dòng)［4］。本研究結(jié)果顯示，GDM組的Cyp A水平高于對(duì)照組，提示Cyp A在GDM患者血清中呈異常高表達(dá)，這與Wang等［7］研究結(jié)果一致。Cyp A是一種氧化應(yīng)激誘導(dǎo)分泌因子，當(dāng)機(jī)體存在明顯的氧化應(yīng)激反應(yīng)時(shí)，平滑肌內(nèi)皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等可以通過囊泡運(yùn)輸?shù)男问綄麅?nèi)分泌的Cyp A輸送至胞外，導(dǎo)致血液循壞中的Cyp A水平上升［15］。按通常標(biāo)準(zhǔn)［16］，本研究以Cyp A中位數(shù)作為高低表達(dá)的閾值，結(jié)果顯示，與血清Cyp A低表達(dá)組比較，高表達(dá)組的巨大兒、子癇前期發(fā)生率較高，且不良妊娠組的Cyp A水平高于正常妊娠組，提示Cyp A的高表達(dá)與GDM患者的不良妊娠結(jié)局有關(guān)。目前，Cyp A可能主要通過以下兩種機(jī)制影響GDM患者的妊娠結(jié)局：（1）Cyp A在氧化應(yīng)激的刺激下分泌增加，且Cyp A可促進(jìn)炎性細(xì)胞遷移聚集及炎性因子的分泌，加重機(jī)體的炎癥反應(yīng)［17］；而氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)均可導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局的風(fēng)險(xiǎn)增加，如氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)可損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)子癇前期的發(fā)生、發(fā)展［13-14］。（2）Cyp A可影響胰島β細(xì)胞的功能。Li等［18］研究發(fā)現(xiàn)，在高糖環(huán)境下Cyp A表達(dá)升高，高表達(dá)的Cyp A可抑制胰島β細(xì)胞分泌胰島素，并導(dǎo)致胰島β細(xì)胞凋亡，而在抑制Cyp A表達(dá)后可通過調(diào)節(jié)絲裂原活化蛋白激酶/核因子-κB信號(hào)通路促進(jìn)胰島β細(xì)胞分泌胰島素，并減少細(xì)胞凋亡。因此，Cyp A可通過影響胰島β細(xì)胞的功能調(diào)節(jié)機(jī)體的控糖能力，進(jìn)而影響不良妊娠結(jié)局發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。此外，本研究通過相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，GDM患者的血清Cyp A表達(dá)水平 與FBG、HbA1c、MDA、8-iso-PGF2α、IL-6、hs-CRP、TNF-α均呈正相關(guān)，與SOD呈負(fù)相關(guān)，這進(jìn)一步證實(shí)了Cyp A與GDM患者的氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)以及糖代謝情況關(guān)系密切。

綜上所述，Cyp A在GDM患者血清中呈異常高表達(dá)，且其高表達(dá)與患者的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)程度有關(guān)，并增加了不良妊娠的風(fēng)險(xiǎn)，Cyp A有望成為評(píng)估GDM患者妊娠結(jié)局的新型標(biāo)志物。然而，本研究為單中心研究，納入的研究對(duì)象較少，應(yīng)在后續(xù)的研究中增加病例，同時(shí)增加其他地域的病例數(shù)據(jù)，以得到更加準(zhǔn)確的結(jié)果。