鄧慧雅，曾斤日，王椏男，楊 玲

（1.深圳市寶安區(qū)沙井預(yù)防保健所檢驗(yàn)科；2.深圳市寶安區(qū)沙井預(yù)防保健所門診部，廣東深圳 518104）

沙門氏菌是常見的人畜共患的致病菌，主要由污染的水源及食物經(jīng)糞口途徑引起感染[1]。沙門氏菌感染最常見的表現(xiàn)形式為胃腸炎型，多數(shù)患者的病情較為急驟，表現(xiàn)為發(fā)熱、腹痛、腹瀉（大便次數(shù)增多，可高達(dá)數(shù)十次，多為水樣便）[2]。沙門氏菌分型的種類較多，目前治療沙門氏菌的感染主要使用抗生素，但由于近年來抗生素的濫用，導(dǎo)致不同血清型的沙門氏菌對(duì)各類抗生素產(chǎn)生不同的耐藥性[3]。因此，沙門氏菌的血清分型分析及耐藥性研究對(duì)于臨床對(duì)癥治療具有重要意義。本研究對(duì)寶安區(qū)沙井地區(qū)115例沙氏門菌分型進(jìn)行了分離，再對(duì)各分型的沙氏門菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，為進(jìn)一步了解沙井地區(qū)沙門氏菌感染的情況，從而利于尋找防治沙氏門菌的有效措施，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 標(biāo)本采集時(shí)間在2018年1月至2019年12月，采樣的標(biāo)本均來源于沙井地區(qū)公共場(chǎng)所從業(yè)人員體檢中疑似腹瀉病人的肛拭子標(biāo)本，共收集了115例沙門氏菌株標(biāo)本。

1.2 試劑與儀器 一次性采樣器；SC（亞硒酸鹽胱氨酸）增菌液、SS（沙門氏菌－志賀氏菌）培養(yǎng)基、M-H（水解酪蛋白）培養(yǎng)基瓊脂、三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基均購(gòu)自廣東環(huán)凱生物科技有限公司，沙門氏菌顯色培養(yǎng)基購(gòu)自法國(guó)Chromagar公司；沙門氏菌診斷血清購(gòu)自寧波天潤(rùn)生物藥業(yè)有限公司；藥敏紙片購(gòu)自北京天壇藥物生物技術(shù)開發(fā)公司；全自動(dòng)微生物鑒定儀（Sensititre公司，型號(hào)：Aris2X）。實(shí)驗(yàn)使用的所有試劑均為合格產(chǎn)品，并在有效期內(nèi)使用。

1.3 研究方法

1.3.1 分離與鑒定 使用一次性采樣器保存采集的肛拭子標(biāo)本，然后送檢。滴入SC增菌液，在36～37 ℃的環(huán)境下培養(yǎng)18～24 h，接種到沙門氏菌顯色培養(yǎng)基或SS培養(yǎng)基上，繼續(xù)在36～37 ℃的環(huán)境下培養(yǎng)18～24 h。挑取可疑菌落接種至三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基，36～37 ℃下培養(yǎng)18～24 h，結(jié)果為K（堿性）/A（酸性）產(chǎn)氣+/-、H2S+/-的可疑菌株，采用全自動(dòng)微生物鑒定儀進(jìn)行檢測(cè)。根據(jù)考夫曼-勒密諾抗原表（Kauffmann-White-Le Minor Scheme）[4]行玻片凝集實(shí)驗(yàn)，對(duì)沙門氏菌進(jìn)行血清分型。

1.3.2 藥敏試驗(yàn) 采用世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦的K-B紙片擴(kuò)散法，用11種從北京天壇藥物生物技術(shù)開發(fā)公司購(gòu)置的藥敏紙片進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)。將含有定量抗生素的紙片貼在測(cè)試菌的瓊脂平板上，紙片中所含藥物吸收瓊脂中的水分溶解后，不斷向紙片周圍擴(kuò)散，形成遞減的濃度梯度。在紙片周圍一定范圍內(nèi)測(cè)試菌生長(zhǎng)被抑制，從而形成無菌生長(zhǎng)的透明圈即抑菌圈。抑菌圈的大小反映測(cè)試菌對(duì)測(cè)定藥物的敏感性[5]。實(shí)驗(yàn)共檢測(cè)11種抗生素：氨芐西林、阿莫西林、頭孢噻肟、頭孢曲松、頭孢他啶、頭孢噻吩、阿米卡星、慶大霉素、環(huán)丙沙星、氨曲南、米諾環(huán)素。

1.4 質(zhì)控 根據(jù)K-B紙片擴(kuò)散法抗生素敏感試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)推薦，采用大腸埃希氏菌ATCC 25922，作為藥敏實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量控制菌株。

2 結(jié)果

2.1 沙門氏菌的血清分型 115株沙門氏菌中有7種分型：鼠傷寒沙門氏菌、倫敦沙門氏菌、病牛沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌、斯坦利沙門氏菌。其中鼠傷寒沙門氏菌有29株，占比為25.22%；腸炎沙門氏菌8株，占比為6.96%；倫敦沙門氏菌34株，占比為29.57%；病牛沙門氏菌19株，占比為16.52%；甲型副傷寒沙門氏菌2株，占比為1.74%；乙型副傷寒沙門氏菌4株，占比為3.48%；斯坦利沙門氏菌19株，占比為16.52%，見表1。

表1 沙門氏菌的血清分型

2.2 不同血清分型沙門氏菌的耐藥情況 藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，沙門氏菌對(duì)阿米卡星耐藥率最高（98.26%），米諾環(huán)素耐藥率最低（4.35%）；抗生素耐藥率從高至低依次為：阿米卡星＞頭孢他啶＞氨曲南＞環(huán)丙沙星＞頭孢噻肟＞頭孢噻吩＞頭孢曲松＞慶大霉素＞阿莫西林＞氨芐西林＞米諾環(huán)素。其中四重耐藥性菌株有57株，五重耐藥性菌株有44株，多重耐藥性情況嚴(yán)重，見表2。

表2 不同血清分型沙門氏菌的耐藥情況（例）

3 討論

沙門氏菌屬于革蘭氏陰性菌，是常見的條件致病菌，其種類、血清分型較多，可分為2個(gè)種7個(gè)亞種，2610個(gè)血清型[6]。沙門氏菌分布廣泛，可污染食物、水源，深圳地區(qū)的食物中毒主要是沙門氏菌感染引起的，對(duì)人們的生命健康造成了極大的威脅[7]。沙門氏菌經(jīng)糞口途徑進(jìn)入宿主的腸道，與腸道中正常的菌群競(jìng)爭(zhēng)，且侵入腸粘膜上皮屏障及腸系膜淋巴結(jié)，從而進(jìn)入全身的血液循環(huán)，引發(fā)全身感染[8]。

根據(jù)本研究結(jié)果顯示，沙井地區(qū)2018年至2019年的沙井地區(qū)的沙門氏菌主要以倫敦沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌及病牛沙門氏菌為主，與深圳部分地區(qū)相關(guān)研究結(jié)果[9]有所不同。因此，有關(guān)部門要加強(qiáng)食品及水源的監(jiān)督工作，減少沙門氏菌感染的機(jī)率。同時(shí)有研究[10]表明不同國(guó)家、地區(qū)，沙門氏菌的流行趨勢(shì)也不同，撒哈拉以南的非洲、中東、伊拉克等地方呈現(xiàn)出流行上升的趨勢(shì)，北美、歐洲、中亞、東亞及太平洋等高收入的國(guó)家呈現(xiàn)出流行下降的趨勢(shì)。該現(xiàn)象可能與國(guó)家的經(jīng)濟(jì)、醫(yī)療水平及食物、水源的監(jiān)督體制有關(guān)系。我國(guó)不同地區(qū)沙門氏菌的主要血清分型也是存在差異的，如云南、廣東、安徽等地以鼠傷寒沙門氏菌為主，香港、上海、江蘇等地以腸炎沙門氏菌為主，不同血清分型的沙門氏菌致病能力也存在一定的差異，患者的臨床表現(xiàn)也可能不同[11]?？股厥侵委熒抽T氏菌感染的常見藥物，但現(xiàn)在病原菌出現(xiàn)耐藥性且耐藥率不斷升高。根據(jù)本研究的藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，115株沙門氏菌對(duì)阿米卡星、頭孢他啶、氨曲南、環(huán)丙沙星、頭孢噻肟、頭孢噻吩、頭孢曲松、慶大霉素的耐藥率高，均大于60%，表明這些抗生素不再適合用于沙門氏菌感染治療中，對(duì)碳青霉烯類藥物敏感性高。病菌的耐藥性可以通過不同的方式在病菌間進(jìn)行傳遞，其他病菌也開始出現(xiàn)耐藥性并不斷地增強(qiáng)，且隨著近年抗生素的不斷濫用，耐藥譜不斷地拓寬，出現(xiàn)了多重耐藥菌，這成為了全球范圍內(nèi)嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題。臨床上要加強(qiáng)抗生素的管理，制定抗生素的使用規(guī)范，明確病原菌，合理選用抗生素并控制用量。同時(shí)加強(qiáng)市民的宣教，食物及飲用水要經(jīng)過嚴(yán)格處理后方可食用，降低沙門氏菌感染的概率?，F(xiàn)在臨床上常采用脈沖場(chǎng)凝膠電泳（PFGE）對(duì)沙門氏菌進(jìn)行區(qū)分，相關(guān)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血清分型相同，電泳帶型可能不同；血清分型不相同，但基因型可能相同，電泳帶型與血清分型存在一定的關(guān)系[12]。在食物中毒及日常檢測(cè)中，通過對(duì)沙門氏菌PFGE分型結(jié)果進(jìn)行追溯，對(duì)疾病的爆發(fā)起到預(yù)警作用。

綜上所述，沙井地區(qū)的沙門氏菌主要以倫敦沙門氏菌為主，檢測(cè)到的沙門氏菌菌株對(duì)四環(huán)素類（米諾環(huán)素）和青霉素類（氨芐西林）抗生素耐藥率較低，應(yīng)合理使用抗生素，延緩病原菌的耐藥性。及時(shí)了解本地區(qū)沙門氏菌的血清分型及耐藥情況，為臨床用藥提供合理科學(xué)的依據(jù)，并倡導(dǎo)居民個(gè)人養(yǎng)成良好的飲食衛(wèi)生習(xí)慣，加強(qiáng)食物、水源的監(jiān)督機(jī)制，以有效預(yù)防沙門氏菌的感染。