孟慶順，孫 麗，卜媛媛

(淮安市食品藥品檢驗所，江蘇 淮安 223300)

隨著人們生活水平的提高，對食品中的有毒有害成分尤其是農(nóng)藥殘留也提出了更高的要求。百菌清，是廣泛使用的殺菌劑，丙溴磷、狄氏劑、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯菊酯、氟氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、溴氰菊酯農(nóng)藥是一類高效廣譜的殺蟲劑，主要用于防治植物病和蟲害的發(fā)生，我們主要對大米中上述9種農(nóng)殘檢測方法進行研究探討。根據(jù)GB 2763—2019《食品安全國家標準食品中農(nóng)藥最大殘留限量》標準規(guī)定，百菌清、丙溴磷、狄氏劑、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯菊酯、氟氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、溴氰菊酯9種農(nóng)藥殘留量涉及到約10個檢測標準，主要是氣相法和氣質(zhì)法如SN/T 2234—2008《進出口食品中丙溴磷殘留量檢測方法 氣相色譜法和氣相色譜-質(zhì)譜法》、GB 23200.113—2018《食品安全國家標準 植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》、GB/T 5009.146—2008《植物性食品中有機氯和擬除蟲菊酯殘留類農(nóng)藥多種殘留量的測定》等標準，而氟胺氰菊酯在大米中沒有相應的檢測標準。在實驗中利用氣相色譜儀(ECD)檢測9種農(nóng)藥殘留，檢測結果重現(xiàn)性好，樣品前期處理簡單，樣品用有機試劑提取，凈化(SPE氟羅里硅土固相萃取柱)，氮吹濃縮，用正己烷定容，最后用氣相專用小柱凈化，干擾物質(zhì)少，適合實驗室定量檢測大米中9種有機氯和擬除蟲菊酯殘留量。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

7890B氣相色譜儀(配有ECD檢測器,7693液體自動進樣器和150位進樣盤)，安捷倫科技有限公司；XW-80A旋渦混合器，上海弛唐電子有限公司；XIR高速低溫離心機，賽默飛世爾科技有限公司；ME204T/02分析天平，梅特勒儀器有限公司。

丙酮、正己烷，色譜純；氯化鈉，分析純；9種農(nóng)藥(標樣均為100 μg/ml)，北京壇墨質(zhì)檢科技有限公司；有機相相針式濾器(尼龍)，100只/罐，13 mm，0.22 μm；固相萃取柱SPE弗羅里硅柱，1 g/6 ml，30只/盒，上海安譜實驗科技有限公司。

1.2 色譜條件

色譜柱：HP-5毛細管柱(30 m×0.32 mm×0.25 μm)；ECD檢測器：300℃，進樣口：270℃，柱溫箱：70℃保持1 min，以15℃/min升溫至270℃，以1℃/min升溫至285℃，柱溫箱在300℃時對毛細管柱進行吹掃，避免影響下一針進樣；載氣：高純氮；柱流速：1.0 ml/min。進樣模式：分流比20∶1，進樣量：1 μl。

1.3 標準曲線

準確吸取0.01、 0.02、 0.04、0.08、0.10 ml的百菌清、丙溴磷、狄氏劑、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯菊酯、氟氰戊菊酯、溴氰菊酯，0.01、 0.02、 0.03、0.04、0.05 ml的氟胺氰菊酯標準溶液于10 ml的容量瓶中，以正己烷稀釋定容，配成質(zhì)量濃度為0.1、0.2、0.4、0.8、1.0 μg/ml的百菌清、丙溴磷、狄氏劑、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯菊酯、氟氰戊菊酯、溴氰菊酯標準溶液和質(zhì)量濃度為0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 μg/ml的氟胺氰菊酯標準溶液混標，以標準工作液的濃度為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，繪制線性回歸標準曲線，由于標準曲線過多，以百菌清和溴氰菊酯為代表，見圖1。

1.4 試樣制備及測定

準確稱取混合均勻大米樣品5.0 g(精確至0.001 g)于50 ml離心管中，加入5 ml氯化鈉和20 ml一級水，浸泡30 min，10 000 r/min離心5 min，再加入20 ml丙酮+正己烷(1∶1)混合溶劑，渦旋混勻2 min，10 000 r/min離心3 min，將上層有機相轉(zhuǎn)入蒸發(fā)皿中，殘渣中再加入20 ml丙酮+正己烷(1∶1)混合溶劑，重復提取一次，合并上層有機相，在50℃水浴鍋上濃縮近干，用正己烷定容至5.0 ml，待凈化。將弗羅里硅土固相萃取小柱依次用5.0 ml丙酮+正己烷(10∶90)、5.0 ml正己烷預淋洗，保持柱體濕潤，當溶劑表面到達柱吸附層表面時，將提取液以1滴/s速度過弗羅里硅土固相萃取小柱，用離心管接收洗脫液，再用5.0 ml丙酮+正己烷(10∶90)沖洗蒸發(fā)皿后過洗弗羅里硅柱，并重復一次，將離心管氮吹至近干，用正己烷定容至1.0 ml，最后用0.22 μm氣相濾頭過濾于進樣瓶中，待測。同時做空白試驗，樣品的提取需在通風櫥中進行，操作時注意：上樣和洗脫流速不大于5 ml/min(1滴/s)以及水浴時的溫度。在試驗條件下，標準品和樣品色譜圖見圖2、圖3。

圖2 標準品色譜圖

圖3 實際樣品的色譜圖

2 結果與分析

2.1 實驗條件的優(yōu)化

氣相色譜條件的選擇和優(yōu)化主要涉及到儀器的檢測器、進樣口和毛細管柱及其升溫程序、柱流速，目前實驗室常用的氣相檢測器有4種，分別是FPD、NPD、ECD、FID，經(jīng)過試驗和查找相關資料，F(xiàn)ID、FPD、NPD檢測器對其響應值很低，而ECD檢測器對9種標樣響應值很高。

考察了DB-FAAP(50 m×0.32 mm×0.50 μm)、HP-5(30 m×0.32 mm×0.25 μm)、HP-5(30 m×0.32 mm×1.00 μm)、HP-5(30 m×0.25 mm×0.25 μm)、HP-5(30 m×0.32 mm×0.50 μm)、DB-1701(30 m×0.32 mm×0.25 μm等毛細管柱的分離效果，結果表明選擇極性柱和中極柱時，9種組分基本不出峰或峰形很差，HP-5(30 m×0.32 mm×0.25 μm)毛細管柱峰形更尖銳，分離效果更好。樣品中檢測出農(nóng)藥殘留，還需用DB-17毛細管柱(30 m×0.32 mm×0.25 μm)進行確認。

利用正交試驗法對色譜柱、進樣口、檢測器溫度進行優(yōu)化設計，找出最佳溫度和程序升溫。選擇檢測器溫度260、300、330℃和進樣口溫度220、270、290℃進行多次試驗，發(fā)現(xiàn)檢測器溫度300℃和進樣口溫度270℃時9種物質(zhì)峰形最佳且分離效果最好。

2.2 標準曲線、相關性及檢出限、定量限

9種農(nóng)藥混標百菌清、丙溴磷、狄氏劑、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯菊酯、氟氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、溴氰菊酯的標準曲線線性回歸方程、相關系數(shù)及方法檢測限和定量限，見表1。

表1 線性測定結果

由表1中可見，該方法靈敏度高，線性良好，完全滿足標準規(guī)定的要求。

2.3 方法的回收率和精密度試驗

準確稱取大米(已測得此大米中含有丙溴磷，其余本底值為空白)5 g共5份于50 ml離心管中，迅速加入0.1、0.2、0.5 ml混合標樣(氟胺氰菊酯濃度為0.5 μg/ml,其它為1.0 μg/ml)。按1.4試驗方法進行分析，平行測定5次，被測樣品加標回收率和精密度見表2。

表2 回收率測定結果(n=5)

在做回收率試驗時發(fā)現(xiàn)，若將溶劑濃縮至干后再定容或水浴鍋溫度過高(高于60℃)，固相萃取小柱上樣和洗脫流速過大，都可能導致結果有偏差、回收率偏低，所以操作時要注意。對于同一陽性樣品，按國家標準SN/T 2234—2008《進出口食品中丙溴磷殘留量檢測方法 氣相色譜法和氣相色譜-質(zhì)譜法》檢測，檢測結果在0.021 4～0.022 3 mg/kg,平均0.021 8 mg/kg,氣相法檢測結果在0.022 8～0.023 6 mg/kg，平均值0.023 2 mg/kg,2種方法測定結果相對標準偏差約為6%，未超過10%。

3 結論

采用該方法對大米中9種農(nóng)藥殘留量進行測定，30 min內(nèi)可以完成一次進樣分析，方法檢出限為0.6～4.0 μg/kg，滿足GB 2763—2019《食品安全國家標準 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》標準規(guī)定的要求。