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        勃氏甜龍竹竹葉膳食纖維的理化特性

        2021-12-06 12:24:32馬思雨歐陽吾樂劉曉賀韓明升楊亞晉郭愛偉
        食品研究與開發(fā) 2021年22期

        馬思雨,歐陽吾樂,劉曉賀,韓明升,楊亞晉,郭愛偉

        (西南林業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,云南 昆明 650224)

        膳食纖維(dietary fiber,DF)具有降血糖、降血脂、減肥、調(diào)節(jié)腸道微生物、預(yù)防糖尿病和腸道癌癥等諸多生理功能[1-3],被稱為人類的“第七大營養(yǎng)素”。DF在維持體重和健康調(diào)控方面的作用受到越來越多的關(guān)注,因此世界衛(wèi)生組織(World Health Organization,WHO)建議健康成年人每天推薦攝入的膳食纖維量應(yīng)大于25 g[4]。植物是人類和動(dòng)物獲得DF的重要的來源之一,近幾年人們開始尋求一些新的膳食纖維資源,來滿足對(duì)膳食纖維的需求。

        竹子具有生長快、生物量大等特點(diǎn),引起了研究者的廣泛關(guān)注。云南有豐富的竹類資源,蘊(yùn)含著豐富的膳食纖維,為開發(fā)新型的纖維源提供了豐富的原材料。

        勃氏甜龍竹(Dendrocalamus brandisii)是禾本科(Gramineae)牡竹屬(Dendrocalamus)竹類植物,廣泛分布于我國云南南部地區(qū),是筍、材兩用的大型叢生竹[5]。研究表明,竹筍膳食纖維可改善便秘、高血壓、預(yù)防心血管疾病和癌癥,此外堿法提取的竹筍膳食纖維可通過調(diào)控腸道菌群來預(yù)防小鼠的肥胖。在其他國家,筍及相關(guān)產(chǎn)品因含有豐富的高纖維和植物甾醇成分,被認(rèn)為是營養(yǎng)保健品[6]。除竹筍外,F(xiàn)elisberto等[7]對(duì)竹竿進(jìn)行了提取DF的研究,研究表明,幼嫩的竹竿可以作為人類和動(dòng)物未來優(yōu)質(zhì)DF的潛在來源。

        目前,對(duì)竹葉膳食纖維的研究和開發(fā)缺乏基礎(chǔ)數(shù)據(jù),本研究以云南分布較廣和生物量大的勃氏甜龍竹竹葉(Dendrocalamus brandisii leaves,DBL)為原料,用堿法提取勃氏甜龍竹竹葉膳食纖維(Dendrocalamus brandisii leaves fiber,DBLF),以微晶纖維素(microcrystalline cellulose,MCC)為對(duì)照,比較分析DBLF和微晶纖維素的化學(xué)組成、顏色、持水力、吸油力、膽固醇吸附量、葡萄糖吸附值及葡萄糖延遲指數(shù)(glucose lag index,GRI)等理化性質(zhì)指標(biāo),采用掃描電鏡觀察DBLF微觀結(jié)構(gòu),為竹類資源的科學(xué)利用和新型竹類膳食纖維開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 原料制備

        勃氏甜龍竹竹葉:采自云南省普洱市墨江,采集的竹葉經(jīng)過65℃干燥至恒重,將干燥的竹葉用高速粉碎機(jī)粉碎后過80目篩,裝入樣品袋中保存?zhèn)溆茫晃⒕Юw維素(98%):湖州市菱湖新望化學(xué)有限公司;電鏡固定液:武漢賽維爾生物科技有限公司;無水乙醇、乙酸異戊酯(均為分析純):國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

        1.2 試驗(yàn)儀器

        SU8100掃描電子顯微鏡:日本日立公司;CM-2300d色差計(jì):日本Konica Minolta公司;CS601高精度恒溫水浴鍋:上海博迅實(shí)業(yè)有限公司;Practum224-1CN電子天平:德國賽多利斯公司;101-1AB電熱鼓風(fēng)干燥箱:天津市泰斯特儀器有限公司;Kjeltec 8100凱氏定氮儀、FOSS FT 122 Fibertec纖維測定儀:丹麥福斯集團(tuán)公司;TU-1901紫外可見分光光度計(jì):北京普析通用儀器有限責(zé)任公司。

        1.3 竹葉膳食纖維提取

        稱取一定量的竹葉粉,參照文獻(xiàn)[8]的方法并加以改進(jìn),具體方法如下,稱取1 g竹葉樣品添加20 mL 10%NaOH溶液,在40℃條件下提取20 h,然后將提取的竹葉膳食纖維用水沖洗至中性,放入干燥箱中,在65℃干燥8 h,然后回潮使其與周圍環(huán)境的空氣濕度保持平衡后稱重,再將其放入65℃烘箱內(nèi)烘2 h,再回潮、稱重、備用。

        1.4 主要分析指標(biāo)

        1.4.1 營養(yǎng)成分和膳食纖維含量測定

        干物質(zhì)(dry matter,DM)、粗蛋白(crude protein,CP)、灰分、鈣(Ca)、總磷(total phosphorus,TP)、可溶性膳食纖維(soluble dietary fiber,SDF)和不溶性膳食纖維(insoluble dietary fiber,IDF)等參照美國分析化學(xué)家協(xié)會(huì)(Association of Official Analytical Chemists,AOAC)[9]中的方法。

        1.4.2 持水力和水溶性指數(shù)測定

        持水力參照高蔭榆等[10]的方法進(jìn)行測定,準(zhǔn)確稱取1.000gDBLF于50mL燒杯中,加入40mL蒸餾水,室溫下(25℃)磁力攪拌2 h,在4 000 r/min下離心20 min,將上清液倒出,用濾紙吸干殘留水分后稱重。持水力(g/g)按如下公式計(jì)算。

        水溶性指數(shù)參考Zhang等[11]的方法測定。準(zhǔn)確稱取樣品2.000 g(m0)加入 80 mL蒸餾水,在 80℃水浴 30 min,冷卻至室溫(25℃),在5 000 r/min下離心10 min。取上清液置于預(yù)先稱得質(zhì)量(m1)的干燥燒杯中,用酒精燈加熱除去部分水分,在105℃下干燥,稱量干燥好的樣品與燒杯質(zhì)量(m2),按如下公式計(jì)算水溶性指數(shù)。

        1.4.3 脂肪的吸附能力測定

        不飽和脂肪吸附能力測定參照Sangnark等[12]的方法。稱2.000 g DBLF于50 mL燒杯中,加入35 mL花生油,在室溫下(25℃)磁力攪拌1 h后離心(4 000 r/min,20 min),去掉上層油,用濾紙吸干殘油后稱重。

        飽和脂肪的吸附能力測定參照歐仕益等[13]的方法,準(zhǔn)確稱3.000 g DBLF于50 mL離心管中,加入35 mL豬油,在60℃下攪拌1 h后離心(4 000 r/min,20 min),去上層油,用濾紙吸干殘留豬油后稱重。吸油量(g/g)按如下公式計(jì)算。

        1.4.4 膽固醇吸附能力測定

        參照鐘希瓊等[14]的方法測定膽固醇吸附能力,將新鮮的蛋黃中加入9倍質(zhì)量的水后混勻,稱取2.000 g DBLF于200 mL的三角瓶中,加入蛋黃液50 mL,攪拌均勻后將pH值調(diào)節(jié)到2.0和7.0,于37℃搖床中振蕩2 h,在4 000 r/min離心20 min,吸取上清液,采用鄰苯二甲醛法在550 nm下比色測定膽固醇含量。按如下公式計(jì)算膽固醇吸附量(mg/g)。

        1.4.5 葡萄糖吸附能力測定

        葡萄糖吸附能力的測定參照Ou等[15]的方法。準(zhǔn)確稱取1.000 g DBLF于50 mL燒杯中,加40 mL葡萄糖溶液(200 mmol/L),在 37℃下恒溫 6 h,以 4 000 r/min離心20 min,用分光光度計(jì)測定上清液中的葡萄糖含量,按如下公式計(jì)算葡萄糖吸附能力(mmol/g)。

        式中:Ci為原始溶液的葡萄糖濃度,mmol/L;Cs為吸附達(dá)到平衡時(shí)的葡萄糖濃度,mmol/L;Ws為纖維質(zhì)量,g;Vi為葡萄糖溶液的體積,mL。

        1.4.6 葡萄糖延遲指數(shù)測定

        葡萄糖延遲指數(shù)(GRI)參照Chau等[16]的方法測定,將0.500 g DBLF與25 mL濃度為50 mmol/L的葡萄糖溶液混合,后裝入截留分子量為12 000 Da的透析袋中,每個(gè)透析袋用100 mL蒸餾水在37℃120 r/min的搖床中持續(xù)攪拌,透析30、60 min和120 min后,吸取1 mL從膳食纖維和對(duì)照樣品中擴(kuò)散出透析液,用分光光度計(jì)測量吸光值,并計(jì)算透析液中葡萄糖的量,以未添加膳食纖維為對(duì)照樣品,按如下公式計(jì)算GRI(%)。

        1.4.7 色度測定

        色度的測定參照Felisberto等[7]推薦的方法,用亮度(L*,L*=0 為黑,L*=100為白)、紅度(a*,a*>0表示紅色;a*<0 表示綠色)、黃度(b*,b*>0 表示黃色,b*<0 表示藍(lán)色)表示。

        1.4.8 掃描電鏡觀測

        取適量樣品,干燥至恒重,采用濺射鍍膜法對(duì)固定后的樣品進(jìn)行表面鍍金,置于SU8100掃描電子顯微鏡觀察,加速電壓為3 kV,在2 500倍和15 000倍下拍照。

        1.5 數(shù)據(jù)分析

        每個(gè)試驗(yàn)重復(fù)測定3次,結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 主要營養(yǎng)組成分析

        勃氏甜龍竹竹葉膳食纖維和微晶纖維素的主要營養(yǎng)組成見表1。

        表1 勃氏甜龍竹竹葉膳食纖維和微晶纖維素的營養(yǎng)組成Table 1 Nutritional composition of dietary fiber of Dendrocalamus brandisii leaves and microcrystalline cellulose %

        由表1可知,DBLF中干物質(zhì)含量(95.29±0.43)%、粗蛋白含量(3.01±0.00)%、灰分含量(8.45±0.14)%、鈣含量(0.35±0.01)%、總磷含量(0.04±0.00)%;而 MCC 中干物質(zhì)含量(95.16±0.06)%、灰分含量(0.21±0.02)%、鈣含量(0.01±0.00)%、總磷含量(0.02±0.00)%。Felisberto等[7]報(bào)道的竹竿膳食纖維中粗蛋白為1.31%~2.03%,與勃氏甜龍竹竹葉膳食纖維中的接近。

        2.2 膳食纖維類型對(duì)比

        勃氏甜龍竹竹葉纖維和微晶纖維素膳食纖維類型組成見表2。

        表2 勃氏甜龍竹竹葉膳食纖維和微晶纖維素類型組成Table 2 Composition of dietary fiber types of Dendrocalamus brandisii leaves and microcrystalline cellulose

        由表2可知,DBL中SDF含量為(8.93±0.17)%,IDF含量(18.10±0.09)%,TDF含量(27.02±0.09)%,IDF∶SDF為2.03。對(duì)DBLF中的膳食纖維類型進(jìn)行分析,結(jié)果表明,DBLF中 SDF為(10.07±0.01)%,IDF為(80.52±0.01)%,TDF(90.59±0.01)%,IDF∶SDF 為 8.00,表明提取了竹葉膳食纖維后,TDF比竹葉提高2.35倍。然而 MCC 中的 SDF為(2.25±0.19)%,IDF為(94.47±0.24)%,IDF∶SDF 為 41.99。MCC 主要以不溶性纖維為主,而DBLF中除了一定的不溶性膳食纖維外,還有適當(dāng)比例的可溶性膳食纖維。雷福紅等[8]研究了慈竹竹葉膳食纖維,結(jié)果表明,慈竹竹葉纖維中SDF為(12.86±0.26)%,IDF 為(76.11±0.44)%,IDF∶SDF 為 6,表明DBLF組成類型與慈竹竹葉膳食纖維接近。DF的生理功效和對(duì)人類腸道健康的影響與其IDF與SDF的含量與比例有關(guān)。DF中IDF對(duì)機(jī)體健康的影響表現(xiàn)在促進(jìn)腸道的發(fā)育、增加糞便體積、減少腸道運(yùn)輸時(shí)間以及預(yù)防便秘,而SDF除具有較好的溶脹性外,SDF可在后腸被微生物發(fā)酵產(chǎn)生對(duì)機(jī)體有益的短鏈脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)(包括乙酸、丙酸和丁酸),而SCFAs使促炎因子基因表達(dá)下調(diào),從而抑制腸道的炎癥反應(yīng)[17-18],改善機(jī)體腸道健康。對(duì)于DF中IDF和SDF的最佳比例還沒有最佳的標(biāo)準(zhǔn),但有研究表明,優(yōu)質(zhì)膳食纖維中應(yīng)該含有30%~50%的SDF和50%~70%的IDF[19]。與MCC相比,本研究提取的DBLF是一種具有開發(fā)價(jià)值的膳食纖維。

        2.3 色度值分析

        顏色是食品的主要表觀特征之一,食品顏色的影響不僅僅是視覺上,而且也是消費(fèi)者選擇食品時(shí)考慮的重要的一個(gè)因素[20],淺色膳食纖維廣泛應(yīng)用到淺色食品中,應(yīng)用前景更廣。勃氏甜龍竹竹葉膳食纖維和微晶纖維素的色度值見表3。

        表3 勃氏甜龍竹竹葉膳食纖維和微晶纖維素色度Table 3 Color parameters of dietary fiber from Dendrocalamus brandisii leaves and microcrystalline cellulose

        由表3可知,本研究提取的DBLF由于沒有脫色,其亮度適中,a*<0,黃度值也較高,表明纖維素呈現(xiàn)淺綠色。MCC 的 L*為(97.35±0.40),a*為(0.12±0.00),b*在(4.07±0.21)。Felisberto等[7]研究結(jié)果表明,竹竿纖維的L*在78.09~85.55范圍內(nèi),a*在 0.89~2.61范圍內(nèi),b*在16.42~22.95范圍內(nèi)。因此,如果要將DBLF廣泛應(yīng)用到淺色食品工藝中,還應(yīng)該對(duì)DBLF進(jìn)行脫色處理,但如果應(yīng)用到動(dòng)物食品工業(yè)(包括寵物食品)中適當(dāng)?shù)木G色可以增加食品顏色的豐富度,促進(jìn)動(dòng)物食欲和采食量。

        2.4 掃描電鏡結(jié)構(gòu)對(duì)比

        勃氏甜龍竹竹葉膳食纖維和微晶纖維素的掃描電鏡結(jié)構(gòu)見圖1。

        圖1 勃氏甜龍竹竹葉膳食纖維和微晶纖維素掃描電鏡Fig.1 Scanning electron microscopy of Dendrocalamus brandisii leaves and microcrystalline cellulose

        由圖1可知,MCC表面粗糙、顆粒大小不規(guī)則、大小不一的孔洞和空穴較少。DBLF顆粒表面粗糙、顆粒尺寸大小分布不一,并且顆粒表面分布有明顯的大小不一的孔洞和空穴。DBLF顆粒疏松多孔、蜂窩狀結(jié)構(gòu)極密集、分布無規(guī)律,呈現(xiàn)空間網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),且網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)是無規(guī)則的,這樣的微觀形態(tài)解釋了膳食纖維良好的持水性和膨脹性,與蔡沙等[21]研究的馬鈴薯膳食纖維和Felisberto等[7]研究的竹竿膳食纖維電鏡結(jié)構(gòu)相似。

        2.5 理化性質(zhì)比較

        2.5.1 持水力和水溶性指數(shù)

        持水力是DF非常重要的一個(gè)物理指標(biāo),對(duì)人體健康有重要的生理效應(yīng)。進(jìn)食持水能力高的DF后,排泄的糞便體積大且質(zhì)地柔軟,有助于預(yù)防便秘和結(jié)腸癌[22]。不同DF持水力存在差異是由于DF的表面多孔性及密度的不同所造成[23]。勃氏甜龍竹竹葉膳食纖維和微晶纖維素水溶性指數(shù)和持水力見表4。

        表4 勃氏甜龍竹竹葉膳食纖維和微晶纖維素水溶性指數(shù)和持水力Table 4 Water solubility index and water holding capacity of Dendrocalamus brandisii leaves and microcrystalline cellulose

        由表 4可知,MCC 的持水力為(1.98±0.05)g/g,而DBLF的持水力為(6.06±0.09)g/g,DBLF的持水力明顯優(yōu)于MCC,與常見的優(yōu)質(zhì)纖維源小麥麩(6.4 g/g~6.6 g/g)、燕麥麩(5.5 g/g)的持水力接近,DBLF滿足對(duì)膳食纖維持水力的基本要求(2.0 g/g)[24-25]。DBLF的水溶性指數(shù)為(0.63±0.10)%,而 MCC 為(0.32±0.09)%,兩種纖維主要以不溶性膳食纖維為主。研究表明,與MCC相比,DBLF具有良好的持水性,這可能與DBLF的疏松多孔特征有關(guān)。因此,DBLF在緩解人體和動(dòng)物機(jī)體便秘、改善腸道健康及預(yù)防肥胖和腸道癌癥等方面具有重要的生理功能。

        2.5.2 脂肪、膽固醇和葡萄糖的吸附作用

        勃氏甜龍竹竹葉纖維和微晶纖維素對(duì)脂肪、膽固醇和葡萄糖的吸附作用見表5。

        表5 勃氏甜龍竹竹葉纖維和微晶纖維素對(duì)脂肪、膽固醇和葡萄糖的吸附作用Table 5 Adsorption capacity of Dendrocalamus brandisii leaves fiber and microcrystalline cellulose on fat,cholesterol and glucose

        由表5可知,DBLF對(duì)飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸具有一定的吸附作用,且對(duì)飽和脂肪酸的吸附能力明顯高于不飽和脂肪酸的吸附能力,其吸油量分別為(2.91±0.04)g/g 和(1.26±0.23)g/g,而 MCC 對(duì)飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸的吸油量分別為(1.46±0.12)g/g和(1.28±0.05)g/g。DBLF對(duì)飽和脂肪酸的吸附能力優(yōu)于MCC。有研究表明,馬鈴薯膳食纖維對(duì)油的吸附值1.76 g/g,DF在消化道中與部分脂肪酸結(jié)合,使脂肪酸通過消化道時(shí),不能被吸收,從而起到預(yù)防肥胖等功效[21]。

        在pH值為7時(shí),DBLF對(duì)膽固醇的吸附量為(8.45±0.46)mg/g,MCC 為(14.14±0.19)mg/g。當(dāng) pH 值為 2時(shí),DBLF對(duì)膽固醇的吸附量為(5.19±0.22)mg/g,MCC 為(6.37±0.06)mg/g,這表明在中性條件下 DF對(duì)膽固醇的吸附能力高于酸性條件,在吸附膽固醇方面MCC優(yōu)于DBLF。DF可吸附體內(nèi)膽固醇,降低血漿膽固醇水平,從而減少機(jī)體對(duì)膽固醇的吸收。研究表明,在中性條件下黑小麥麩皮SDF對(duì)膽固醇的吸附能力大于酸性條件下的吸附能力[26-27],這與本研究的結(jié)果一致。

        DBLF 對(duì)葡萄糖的吸附量(15.69±0.38)mmol/g,而MCC對(duì)葡萄糖的吸附量(3.55±0.01)mmol/g,DBLF對(duì)葡萄糖的吸附能力優(yōu)于MCC。研究表明,膳食纖維能夠有效結(jié)合葡萄糖,從而減少或降低葡萄糖在體內(nèi)的吸收速率。番茄皮渣DF可以有效緩解糖尿病人對(duì)葡萄糖的吸收速率,并控制血糖的上升[23]。Peerajit等[10]研究發(fā)現(xiàn),檸檬渣DF的葡萄糖吸附量可達(dá)18.069mmol/g,而番茄皮渣膳食纖維的葡萄糖吸附量為(19.21±0.01)mmol/g,與本研究的DBLF葡萄糖吸附能力接近。這可能與這幾種膳食纖維在結(jié)構(gòu)上的多孔性及顆粒大小有關(guān)[23]。DF還具有抑制葡萄糖擴(kuò)散的功效,可降低血液中葡萄糖的含量,有效控制血糖指數(shù)[27]。李楊等[28]研究表明,DF的對(duì)葡萄糖吸收能力與其SDF的含量及物理結(jié)構(gòu)有關(guān)。由于SDF與水接觸后產(chǎn)生的凝膠狀物體將葡萄糖分子包裹其中,并且膳食纖維疏松的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)也會(huì)減緩葡萄糖分子在食品體系中的擴(kuò)散速率。杜斌等[29]研究表明,發(fā)酵法制取的藍(lán)莓果渣可溶性膳食纖維對(duì)不飽和脂肪的吸附量為(2.35±0.06)g/g,對(duì)飽和脂肪吸附量為(1.67±0.05)g/g,對(duì)葡萄糖的吸附量為(1.40±0.62)mmol/g。本研究的DBLF在脂肪、膽固醇和葡萄糖的吸附能力方面與優(yōu)良膳食纖維(如馬鈴薯膳食纖維、番茄皮渣膳食纖維)接近,優(yōu)于藍(lán)莓果渣可溶性膳食纖維和MCC,是一種值得開發(fā)的膳食纖維。

        2.5.3 葡萄糖延遲指數(shù)

        勃氏甜龍竹竹葉纖維和微晶纖維素對(duì)葡萄糖延遲指數(shù)的影響見圖2。

        圖2 勃氏甜龍竹竹葉纖維和微晶纖維素對(duì)葡萄糖延遲指數(shù)(GRI)的影響Fig.2 Effect of Dendrocalamus brandisii leaves fiber and microcrystalline cellulose on glucose retardation index

        由圖2可知,DBLF對(duì)葡萄糖延遲指數(shù)(GRI)最大值出現(xiàn)在透析30 min(41.8%),繼續(xù)延長透析時(shí)間,GRI會(huì)減小。而MCC最大的GRI出現(xiàn)在透析后60 min,透析120 min后2種膳食纖維的GRI都有下降的趨勢。GRI是反映腸道中延遲葡萄糖吸收效果的重要指標(biāo)。DF具有阻滯葡萄糖擴(kuò)散的作用,這與王慶玲等[23]研究的番茄皮渣DF對(duì)葡萄糖延遲指數(shù)的結(jié)果相一致。DF對(duì)葡萄糖擴(kuò)散的阻滯作用可能是由不溶性部分和可溶性部分協(xié)同對(duì)葡萄糖吸附而引起,并且使溶液黏度增加,減緩了葡萄糖的擴(kuò)散速率[16]。與已有的研究GRI對(duì)比表明,DBLF對(duì)葡萄糖延遲指數(shù)的影響優(yōu)于MCC、酸橙渣DF(9.92%~24.71%)[30]、柑橘皮DF(0.84%~26.6%)[16]和橙果肉 DF(16.04%~25.92%)[31]等,這可能與DBLF有較高的葡萄糖吸附量有關(guān)。

        3 結(jié)論

        本文通過對(duì)勃氏甜龍竹竹葉膳食纖維和微晶纖維素主要分析指標(biāo)、理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)等指標(biāo)進(jìn)行測定和對(duì)比分析,結(jié)果表明,勃氏甜龍竹竹葉膳食纖維具有較平衡的膳食纖維組成,較高的脂肪、葡萄糖吸附能力、較好的葡萄糖延遲指數(shù),電鏡下結(jié)構(gòu)疏松多孔,是一種品質(zhì)較好膳食纖維,在食品工業(yè)中具有廣泛的應(yīng)用前景。

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