魏硯君, 全 睿, 王 慧, 郭海波, 滕 柳, 石 鵬
(貴州中醫(yī)藥大學基礎醫(yī)學院,貴州貴陽 550025)
睡眠對人類的健康及認知極為重要,其是由腦內(nèi)多個區(qū)域、多種神經(jīng)元、多種神經(jīng)遞質(zhì)參與的生理過程,但睡眠的調(diào)節(jié)機制尚不完全清楚[1]?,F(xiàn)代研究中,對睡眠-覺醒周期的判定與分析一般是通過記錄受試對象的腦電圖(electroencephalogram,EEG)/肌電圖(electromyogram,EMG)信號,該方法得到科學界的普遍認可[2]。
中縫核分布于腦干中線附近,沿腦干的整個尾側延伸,5-羥色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)能神經(jīng)元是其主要神經(jīng)元成分[3]。5-HT 是腦內(nèi)的重要神經(jīng)遞質(zhì),其在睡眠-覺醒周期的轉換與維持中起著重要作用[4]。最新研究表明,腦內(nèi)5-HT 含量的降低能夠引起大鼠中腦中縫背核星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞活性的增加,提示5-HT 對睡眠的作用可能與調(diào)節(jié)腦內(nèi)膠質(zhì)細胞活性有關[5-6]。對氯苯丙氨酸(parachlorophenylalanine,PCPA)是5-HT 合成酶抑制劑,能抑制大腦中5-HT 的合成[7],因此PCPA 常用于腦內(nèi)5-HT 對中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system,CNS)影響的研究。
NG2 膠質(zhì)細胞又稱為少突膠質(zhì)前體細胞(oligodendrocyte progenitor cells,OPCs),其因表達神經(jīng)元-膠質(zhì)細胞抗原2(neuron-glial antigen 2,NG2)蛋白聚糖而得名,被認為是存在于CNS 的第4 個膠質(zhì)細胞群[8]。研究發(fā)現(xiàn)NG2 細胞對中樞神經(jīng)損傷有著高度反應性,可能成為CNS 疾病治療的靶點[9-11]。NG2 細胞具有高度分化潛能,以及成熟細胞表達受體的特征,其可表達離子型谷氨酸受體、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)受體和5-HT 受體等[12],并與神經(jīng)元之間存在經(jīng)典或非經(jīng)典的突觸連接[13]。NG2細胞的代謝受到睡眠-覺醒機制的調(diào)控,與睡眠有著密切聯(lián)系[14-15]。
NG2 細胞與5-HT 系統(tǒng)有著密切的功能聯(lián)系[16],NG2細胞不僅可表達5-HT受體[12],作用于5-HT系統(tǒng)的藥物還可影響NG2 細胞向OPCs 分化和導致髓鞘畸形[17]。但5-HT 和NG2 細胞的相互聯(lián)系在睡眠-覺醒調(diào)節(jié)中的作用目前尚未見報道。
NG2 單克隆抗體(anti-NG2 monoclonal antibody,NG2-Ab)可與NG2 細胞表面的NG2 蛋白聚糖結合,從而抑制NG2細胞的功能特性[18]。本研究通過向大鼠中縫核內(nèi)分別微量注射5-HT、PCPA、NG2-Ab、NG2-Ab+5-HT 及NG2-Ab+PCPA,并記錄給藥前后大鼠的EEG/EMG 信號,分析給藥前后的睡眠-覺醒時相及EEG 波形特征,探討中縫核NG2 細胞及NG2 細胞與5-HT的共同作用對大鼠睡眠-覺醒功能的影響。
1.1 動物 健康SPF 級成年Sprague-Dawley(SD)大鼠70 只,雄性,體重(200±20)g,購自重慶騰鑫生物科技有限公司,許可證號為SCXK(渝)2012-0012。實驗前,動物飼養(yǎng)于室溫24 ℃、相對濕度40%~60%、清潔干燥、12 h/12 h 明暗交替的環(huán)境中,適應實驗環(huán)境7 d,期間自由飲食、水。本研究經(jīng)貴州中醫(yī)藥大學動物實驗倫理委員會批準。
1.2 儀器、試劑和藥物 BL-420S 生物機能實驗系統(tǒng)(成都泰盟軟件有限公司)。PCPA 和NG2-Ab(Sigma);5-HT(Solarbio)。
2.1 藥品制備 將預稱重的PCPA 粉末加入無菌研缽中,加入少量生理鹽水研磨攪拌,同時以每1 g PCPA 加入10 μL 吐溫-80 的用量進行表面活化,使PCPA 充分溶解后,繼續(xù)研磨并加入生理鹽水,直至達到所需濃度。將配制好的PCPA 溶液收集至試劑瓶,于4 ℃保存?zhèn)溆?。用生理鹽水將5-HT 配制成濃度為2.5 g/L的溶液。
2.2 EEG 和EMG 記錄電極及微量注射套管的埋置 將70 只SD 大鼠隨機分成正常(normal)組、空白(control)組、PCPA 組、NG2-Ab 組、5-HT 組、NG2-Ab+PCPA 組及NG2-Ab+5-HT 組,每組10 只。正常組大鼠不做任何處理;對其他6 組大鼠進行EEG 和EMG記錄電極及微量注射套管的埋置:大鼠經(jīng)腹腔注射25%的烏拉坦溶液(1.0 g/kg)麻醉后,取俯臥位固定于腦立體定位儀上。對大鼠顱頂皮膚進行備皮處理后,用組織剪剪去顱頂皮膚和筋膜,充分暴露顱骨。用牙科鉆于顱骨上額葉(AP:2.2 mm,ML:2.0 mm)及頂葉(AP:1.2 mm,ML:4.5 mm)相應位置處分別開1 個孔,將不銹鋼電極植入顱骨內(nèi)使其與硬腦膜充分接觸。將2 個肌電電極植入大鼠頸部肌肉內(nèi)。根據(jù)Paxinos&Watson大鼠腦立體定位圖譜(第3版)確定中縫核位置(AP:-7.4 mm,L/R:0.0 mm,H:6.4 mm),于顱骨相應位置植入微量注射套管。最后,用牙科水泥固定EEG 和EMG 記錄電極及微量注射套管。動物術后獨籠飼養(yǎng),腹腔注射青霉素3 d以預防感染,共恢復7 d,期間自由飲水、進食。實驗結束時對套管/注射部位進行組織學驗證。套管/注射位置通過對大鼠腦組織進行HE染色進行鑒定,結果見圖1。本研究中的所有數(shù)據(jù)均來自注射部位在中縫核范圍內(nèi)的動物。
Figure 1. Location of microinjection casing/injection. A:the stereotactic map of Paxinos-Watson rat brain atlas[the red square:the position of raphe nuclei;Aq:aqueduct;DRD and DRV:dorsal and ventral DRN(dorsal raphe nuclei)];B:HE staining of the trocar/injection position,the corresponding position of DRN in rat brain.圖1 微量注射套管/注射位置的HE染色情況
2.3 EEG/EMG 信號記錄及微量注射給藥 動物恢復后,將信號記錄線與電極相連,獨籠飼養(yǎng)于實驗環(huán)境內(nèi)訓練并適應實驗環(huán)境48 h。于早上9:00開始記錄EEG/EMG 信號,連續(xù)記錄24 h。于次日開始向除正常組外的各組大鼠中縫核內(nèi)分別微量注射藥物:(1)空白組大鼠微量注射1 μL生理鹽水;(2)PCPA組大鼠微量注射1 μL PCPA 溶液(10 g/L)[19];(3)5-HT組大鼠微量注射1 μL 5-HT 溶液(2.5 g/L)[20];(4)NG2-Ab 組大鼠微量注射1 μL NG2-Ab 溶液(5 g/L)[16];(5)NG2-Ab+PCPA 組大鼠微量注射1 μL PCPA溶液(10 g/L)和1 μL NG2-Ab 溶液(5 g/L);(6)NG2-Ab+5-HT 組大鼠微量注射1 μL 5-HT 溶液(2.5 g/L)和1 μL NG2-Ab溶液(5 g/L)。于每日早9:00對每組大鼠微量注射藥物,連續(xù)2 d。末次給藥2 h 后再次記錄各組大鼠的EEG/EMG 信號,連續(xù)記錄72 h。記錄完成后,利用BL-420S 生物機能實驗系統(tǒng)對大鼠EEG/EMG 信號進行分析,根據(jù)波形特征將其分為醒覺(wake,W)期、非快眼動睡眠(non-rapid eye movement sleep,NREMS)期、快眼動睡眠(rapid eye movement sleep,REMS)期及總睡眠(total sleep,TS):W期EEG以不規(guī)則的α波(8~12 Hz)及β波(14~35 Hz)信號為主,EMG 高度活動;NREMS 期EEG 以高幅低頻δ 波(0.5~4 Hz)信號為主,EMG 表現(xiàn)為靜止或有輕度活動;REMS 期EEG 以低幅高頻θ 波(4~8 Hz)信號為主,EMG表現(xiàn)為完全靜止[21](圖2);TS=NREMS+REMS。同時,對EEG/EMG 信號圖譜波形成分進行分析,將其分為δ 波、α 波、β 波及θ 波。將各睡眠-覺醒時相及波形按照所占總記錄時間百分比進行統(tǒng)計。
Figure 2. Waveform characteristics of EEG/EMG signals of the rats in wake(W),non-rapid eye movement sleep(NREMS)and rapid eye movement sleep(REMS)phases.圖2 睡眠-覺醒周期各時相EEG/EMG信號的波形特征
實驗數(shù)據(jù)采用SSPS 22.0軟件進行處理,多組間比較采用單因素方差分析,進一步組間比較采用SNK-q檢驗,統(tǒng)計結果以均數(shù)±標準差(mean±SD)形式表示,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
1.1 中縫核內(nèi)注射NG2-Ab 對大鼠睡眠-覺醒時間的影響 與自身給藥前1 d 相比,NG2-Ab 組大鼠的W 時間在中縫核內(nèi)注射NG2-Ab后第1天及第2天均顯著延長(P<0.05),NREMS 時間在注射藥物后的第1 天及第2 天均顯著縮短(P<0.05),REMS 時間在注射藥物后的第1天及第2天均顯著縮短(P<0.05),TS時間在注射藥物后的第1天及第2天均顯著縮短(P<0.05),見表1。這一結果提示中縫核NG2 細胞參與了大鼠睡眠-覺醒時間的調(diào)節(jié)。
表1 中縫核內(nèi)微量注射NG2-Ab對大鼠睡眠-覺醒時間的影響Table 1. Effects of NG2-Ab solution microinjected into the raphe nuclei on sleep-wake duration of the rats(%. Mean±SD.n=10)
1.2 中縫核內(nèi)注射PCPA 對大鼠睡眠-覺醒時間的影響 與自身給藥前1 d 相比,PCPA 組大鼠的W 時間在中縫核內(nèi)注射PCPA后第1天及第2天均顯著延長(P<0.05),NREMS 時間在注射藥物后的第1 天及第2天均顯著縮短(P<0.05),REMS時間在注射藥物后的第1 天及第2 天均顯著縮短(P<0.05),TS 時間在注射藥物后的第1 天及第2 天均顯著縮短(P<0.05),見表2。這一結果提示中縫核5-HT 含量的下降對大鼠覺醒具有促進作用,對睡眠具有抑制作用。
表2 中縫核內(nèi)微量注射PCPA對大鼠睡眠-覺醒時間的影響Table 2. Effects of PCPA solution microinjected into the raphe nuclei on the sleep-wake duration of the rats(%. Mean±SD.n=10)
1.3 中縫核內(nèi)注射5-HT對大鼠睡眠-覺醒時間的影響 與自身給藥前1 d 相比,5-HT 組大鼠的W 時間在中縫核內(nèi)注射5-HT后第1天、第2天及第3天均顯著縮短(P<0.05),NREMS 時間在注射藥物后的第1天、第2 天及第3 天均顯著延長(P<0.05),REMS 時間在注射藥物后的第1 天顯著延長(P<0.05),TS 時間在注射藥物后的第1 天、第2 天及第3 天均顯著延長(P<0.05),見表3。這一結果提示中縫核5-HT 含量的升高對大鼠覺醒具有抑制作用,對睡眠具有促進作用。
表3 中縫核內(nèi)微量注射5-HT對大鼠睡眠-覺醒時間的影響Table 3. Effects of 5-HT solution microinjected into the raphe nuclei on the sleep-wake duration of the rats(%. Mean±SD.n=10)
為了探究中縫核NG2 細胞是否參與了5-HT 含量變化引起睡眠-覺醒時間的改變,我們向大鼠中縫核內(nèi)分別注射了NG2-Ab+5-HT及NG2-Ab+PCPA。
2.1 中縫核內(nèi)注射NG2-Ab+PCPA 對大鼠睡眠-覺醒時間的影響 與PCPA 組相比,NG2-Ab+PCPA 組大鼠的W 時間在中縫核內(nèi)注射NG2-Ab+PCPA 后第1 天顯著縮短(P<0.05),見表4;NREMS 時間在注射藥物后的第1天顯著延長(P<0.05),見表5;REMS時間在注射藥物后的第1 天顯著延長(P<0.05),見表6;TS 時間在注射藥物后的第1 天顯著延長(P<0.05),見表7。這一結果提示中縫核NG2 細胞參與了5-HT含量下降引起的大鼠睡眠-覺醒時間的改變。
2.2 中縫核內(nèi)注射NG2-Ab+5-HT 對大鼠睡眠-覺醒時間的影響 與5-HT 組相比,NG2-Ab+5-HT 組大鼠的W 時間在中縫核內(nèi)注射NG2-Ab+5-HT 后第1 天、第2 天及第3 天均顯著延長(P<0.05),見表4;NREMS 時間在注射藥物后的第1 天及第2 天均顯著縮短(P<0.05),見表5;REMS 時間在注射藥物后的第1 天、第2 天及第3 天均顯著縮短(P<0.05),見表6);TS 時間在注射藥物后的第1 天、第2 天及第3 天均顯著縮短(P<0.05),見表7。這一結果提示中縫核NG2 細胞參與了5-HT 含量升高引起的大鼠睡眠-覺醒時間的改變。
表4 中縫核內(nèi)微量注射不同藥物對大鼠覺醒時間的影響Table 4. Effects of different drugs microinjected into the raphe nuclei on the wake duration of the rats(%. Mean±SD.n=10)
表5 中縫核內(nèi)微量注射不同藥物對大鼠非快眼動睡眠時間的影響Table 5. Effects of different drugs microinjected into the raphe nuclei on the non-rapid eye movement sleep duration of the rats(%.Mean±SD.n=10)
表6 中縫核內(nèi)微量注射不同藥物對大鼠快眼動睡眠時間的影響Table 6. Effects of different drugs microinjected into the raphe nuclei on the rapid eye movement sleep duration of the rats(%. Mean±SD.n=10)
表7 中縫核內(nèi)微量注射不同藥物對大鼠總睡眠時間的影響Table 7. Effects of different drugs microinjected into the raphe nuclei on the total sleep duration of the rats(%. Mean±SD.n=10)
3.1 中縫核內(nèi)注射NG2-Ab對大鼠EEG波形特征的影響 與空白對照組相比,NG2-Ab組大鼠的EEG 波形特征在中縫核內(nèi)注射NG2-Ab后無顯著變化,見表8~11。
表8 中縫核內(nèi)微量注射不同藥物對大鼠β波百分比的影響Table 8. Effects of different drugs microinjected into the raphe nuclei on the percentage of β wave in the rats(%. Mean±SD.n=10)
表9 中縫核內(nèi)微量注射不同藥物對大鼠δ波百分比的影響Table 9. Effects of different drugs microinjected into the raphe nuclei on the percentage of δ wave in the rats(%. Mean±SD.n=10)
表10 中縫核內(nèi)微量注射不同藥物對大鼠α波百分比的影響Table 10. Effects of different drugs microinjected into the raphe nuclei on the percentage of α wave in the rats(%. Mean±SD.n=10)
表11 中縫核內(nèi)微量注射不同藥物對大鼠θ波百分比的影響Table 11. Effects of different drugs microinjected into the raphe nuclei on the percentage of θ wave in the rats(%. Mean±SD.n=10)
3.2 中縫核內(nèi)注射PCPA 對大鼠EEG 波形特征的影響 與空白對照組相比,PCPA 組大鼠的β 波百分比在中縫核內(nèi)注射PCPA后第1天及第2天均顯著減少(P<0.05),見表8;δ波百分比在注射藥物后第1天及第2 天均顯著增加(P<0.05),見表9;α 波百分比在注射藥物后第2天顯著減少(P<0.05),見表10。
3.3 中縫核內(nèi)注射5-HT 對大鼠EEG 波形特征的影響 與空白對照組相比,5-HT 組大鼠的EEG 波形特征在中縫核內(nèi)注射5-HT后無顯著變化,見表8~11。
3.4 中縫核內(nèi)注射NG2-Ab+PCPA 對大鼠EEG 波形特征的影響 與PCPA 組大鼠相比,NG2-Ab+PCPA組大鼠δ 波百分比在中縫核內(nèi)注射NG2-Ab+PCPA后第2天顯著降低(P<0.05),見表9。這一結果提示中縫核NG2 細胞參與了5-HT 含量下降引起的大鼠EEG波形變化。
3.5 中縫核內(nèi)注射NG2-Ab+5-HT 對大鼠EEG 波形特征的影響 與5-HT 組大鼠相比,NG2-Ab+5-HT 組大鼠β波百分比在中縫核內(nèi)注射NG2-Ab+5-HT后第3 天顯著增加(P<0.05),見表8。這一結果提示中縫核NG2 細胞參與了5-HT 含量上升引起的大鼠EEG波形變化。
本實驗通過向大鼠的中縫核內(nèi)分別微量注射NG2-Ab、PCPA、5-HT、NG2-Ab+PCPA 和NG2-Ab+5-HT,并記錄給藥后大鼠的EEG/EMG 信號,研究了中縫核內(nèi)NG2 細胞、5-HT 以及NG2 細胞和5-HT 的共同作用對大鼠睡眠-覺醒時間及EEG波形的影響。
NG2 細胞是存在于發(fā)育和成熟哺乳動物中CNS的灰質(zhì)和白質(zhì)中的一種常駐祖細胞群,與星形膠質(zhì)細胞、成熟少突膠質(zhì)細胞、小膠質(zhì)細胞和神經(jīng)干細胞有所區(qū)別[22]。NG2 細胞被認為是CNS 第4 種主要膠質(zhì)細胞類型,占成年CNS 所有細胞的2%~8%[23-24]。由于NG2 細胞能夠生成髓鞘或非髓鞘的少突細胞,因此NG2 被認為等同于OPCs[25]。研究表明,對富含OPCs 的小鼠前腦樣本進行基因表達分析顯示,許多OPCs 特定基因在睡眠和覺醒期間改變自身表達[14]。進一步對OPCs 基因進行功能聚類分析發(fā)現(xiàn),促進OPCs 增殖的基因主要在睡眠期間表達上調(diào),而主要參與OPCs 分化和凋亡的基因在清醒過程中得到較好的轉錄[15]。以上研究報道表明,NG2 細胞可能參與了睡眠-覺醒周期的調(diào)節(jié)過程。為了探究中縫核內(nèi)NG2 細胞對睡眠-覺醒時間的作用,我們向大鼠的中縫核內(nèi)微量注射NG2-Ab,觀察在中縫核NG2 細胞活性受到抑制后,大鼠的睡眠-覺醒時間變化。實驗結果表明,給藥后大鼠的W 時間延長,同時TS 時間縮短,提示中縫核NG2 細胞具有調(diào)節(jié)睡眠-覺醒時間的作用,并且其作用可能是促進睡眠。對給藥后大鼠的睡眠結構進行分析可以發(fā)現(xiàn),大鼠的NREMS 時間及REMS 時間均顯著縮短,說明中縫核NG2 細胞對睡眠中的NREMS 及REMS 均有調(diào)節(jié)作用。該結果與相關研究報道相符[15,26]。
5-HT 是參與睡眠-覺醒周期調(diào)節(jié)的重要神經(jīng)遞質(zhì),其在睡眠及覺醒的啟動和維持中均起到重要作用。5-HT 能神經(jīng)元主要分布在腦干的中縫核,其上行纖維與藍斑去甲腎上腺素能神經(jīng)元組成網(wǎng)狀結構上行激活系統(tǒng)的一部分,在W 期放電增加,并通過GABA 抑制睡眠中樞——下丘腦腹外側視前區(qū)的活動,維持和改變大腦皮層的興奮狀態(tài)以促進覺醒[26]。在清醒狀態(tài)下,5-HT 能神經(jīng)元軸突末梢釋放的5-HT能夠影響腦內(nèi)特定區(qū)域中促睡眠物質(zhì)的合成,而在睡眠狀態(tài)下當5-HT 在催眠物質(zhì)的觸發(fā)下被樹突釋放后,其通過自身抑制過程參與了5-HT 核周體的抑制以維持睡眠[4]。在本實驗中,我們通過向大鼠中縫核內(nèi)微量注射5-HT 及其合成酶抑制劑PCPA,探究中縫核內(nèi)的5-HT 對大鼠睡眠-覺醒時間的影響。研究結果表明,向大鼠中縫核內(nèi)注射5-HT 后,大鼠的W 時間縮短,同時TS 時間延長;相反地,PCPA 能夠使大鼠的W 時間延長,TS 時間縮短。提示中縫核內(nèi)的5-HT 具有促進睡眠的作用。對給藥前及給藥后的大鼠睡眠結構分析發(fā)現(xiàn),5-HT 能夠延長大鼠NREMS 和REMS 時間,PCPA 則具有抑制作用,說明中縫核內(nèi)的5-HT 對NREMS 和REMS 均具有調(diào)節(jié)作用。該實驗結果與國外以往研究結果相符[27-28]。
NG2 細胞與5-HT 在睡眠-覺醒周期的調(diào)節(jié)中都起到了重要作用,為了探究中縫核NG2 細胞與5-HT在睡眠-覺醒調(diào)節(jié)中是否存在相互作用,本實驗向大鼠的中縫核內(nèi)分別注射了NG2-Ab+5-HT 和NG2-Ab+PCPA,在抑制中縫核NG2 細胞活性的同時增加或減少5-HT 的含量。實驗結果表明,與僅增加或減少中縫核5-HT 含量相比,抑制NG2 細胞活性同時增加或減少中縫核5-HT 含量對大鼠睡眠的促進或抑制作用減弱。前期研究發(fā)現(xiàn),PCPA 可引起大鼠腦干內(nèi)NG2 細胞的mRNA 表達升高[29];微透析法對給藥后大鼠中縫核內(nèi)促睡眠因子進行含量分析發(fā)現(xiàn),NG2 細胞調(diào)節(jié)谷氨酸含量的作用與5-HT 的合成有關(該研究論文已被接收,待發(fā)表),表明5-HT 濃度變化和NG2 功能活動具有相關性。結合以上結果,提示中縫核NG2 細胞與5-HT 對大鼠睡眠-覺醒功能具有共同調(diào)節(jié)作用,中縫核NG2 細胞參與了5-HT 含量的變化導致的大鼠EEG/EMG 信號及睡眠-覺醒時間的改變,提示NG2 細胞可能是5-HT 調(diào)節(jié)睡眠-覺醒功能的機制之一。
EEG 波形按照波形特征可分為δ波、θ波、α波及β 波[30-31]。正常成年人在清醒時一般不會出現(xiàn)δ 波,當缺氧、大腦發(fā)生病變、昏迷或深度睡眠時會出現(xiàn)δ波[32]。當在疲倦、心情壓抑或中樞神經(jīng)收到抑制時,腦電圖中會出現(xiàn)θ 波。α 波是正常人腦電圖中的最基本波形,在沒有外界刺激的條件下,α 波呈現(xiàn)十分穩(wěn)定的頻率。α 波在人處于閉目養(yǎng)神的狀態(tài)下最為明顯,當人被外來條件刺激或者睜眼時,α 波立即消失。β 波主要是人清醒狀態(tài)時腦電活動的表現(xiàn)。本研究對各組大鼠的EEG波形特征進行分析比較后發(fā)現(xiàn),中縫核NG2細胞活性受到抑制后,大鼠EEG波形特征無明顯變化;與僅降低5-HT 含量相比,5-HT 含量降低及NG2 細胞活性被抑制后,大鼠的δ 波百分比減少;與僅升高5-HT 含量相比,5-HT 含量升高及NG2 細胞活性被抑制后,大鼠的β 波百分比增加。提示中縫核NG2 細胞與5-HT 共同作用可以影響大鼠EEG波形特征。
失眠癥嚴重影響人類的健康和生活質(zhì)量,已經(jīng)成為一項亟需解決的公共衛(wèi)生問題。本研究結果表明中縫核NG2 細胞及NG2 細胞與5-HT 的共同作用能夠調(diào)節(jié)大鼠的睡眠-覺醒時間及腦電活動,該研究為失眠機制的研究及失眠治療藥物的研發(fā)提供了實驗依據(jù)。