朱 莉，田 靜，武慧慧，楊 澤，晉紅梅

（山東第一醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院輸血科，山東泰安 271001）

新生兒溶血病指的是母親和嬰兒的血型無法吻合，導致新生兒出現(xiàn)免疫性溶血疾病。ABO新生兒溶血病患兒的主要臨床表現(xiàn)為黃疸、貧血等，通常在出生后24～48 h內出現(xiàn)疾病癥狀，且病情發(fā)展迅速，嚴重者可能對新生兒的智力與身心發(fā)育產(chǎn)生不良影響[1]。目前臨床主要對ABO新生兒溶血病患兒實施輸血治療，但是常規(guī)同型輸血治療極易加重溶血反應，甚至可能對患兒的生命安全構成威脅[2]。微柱凝膠技術為目前臨床中交叉配血檢驗的常用技術之一，亦為實驗室常用的紅細胞血型血清學檢驗技術，具有易判讀、結果準確清晰等優(yōu)勢，其可以排除傳統(tǒng)檢驗方法當中人為因素所致的干擾[3]。因此本研究重點探討了微柱凝膠技術在ABO新生兒溶血病患兒輸血前檢驗中的應用價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取山東第一醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院2019年9月至2020年12月收治的124例ABO新生兒溶血病患兒，開展前瞻性研究。其中男患兒65例，女患兒 59例；日齡 1～25 d，平均（15.06±0.49）d；體質量 2.1～4.5 kg，平均（3.49±0.12）kg。診斷標準：參照《臨床診療指南：小兒內科分冊》[4]中的關于ABO新生兒溶血病的診斷標準。納入標準：符合上述診斷標準者；母親血型為O型者；母親與患兒RhD血型均呈陽性；抗人球蛋白實驗、游離血清實驗及抗體放散實驗資料完整者。排除標準：合并先天性疾病或缺陷者；有家族遺傳病史者?；純悍ǘūO(jiān)護人簽署知情同意書，且本研究經(jīng)山東第一醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審核批準。

1.2 方法

1.2.1 標本準備 取新生兒全血標本進行離心處理，離心條件（3 500 r/min，10 min），離心結束分離血清，以備用，使用生理鹽水對新生兒全血標本進行洗滌，以3次為宜，同時選取少許紅細胞，采用生理鹽水制作3%的細胞懸液，將其作為樣本進行檢測。

1.2.2 檢驗方法 微柱凝膠技術檢驗：①取抗人球蛋白卡1張，于孔內滴入濃度為0.8%的紅細胞懸液（50 μL），隨后將其置入離心機中進行離心處理，分析離心結果。②標記抗人球蛋白卡，分別于A孔、B孔及O孔中加入濃度為0.8%的紅細胞懸液（50 μL），隨后取25 μL新生兒血清加入，于孵育器中放置抗人球蛋白卡，孵育15 min后以3 000 r/min的轉速離心10 min操作，對離心結果展開觀察。試管法檢驗：①取1滴濃度為2%～5%的紅細胞懸液滴入至標記好的試管當中，隨后滴入1滴特異性抗人球蛋白血清，充分混勻以后，進行離心處理并觀察離心結果。②取3支試管分別標記為A管、B管和O管，分別向各試管當中滴入2滴新生兒血清及1滴濃度為3%～5%的紅細胞懸液，隨后將試管放置于溫度為37 ℃的水浴箱中1 h；若試劑凝集，則代表液體當中有抗體存在，若肉眼觀察未發(fā)現(xiàn)凝集反應，則以生理鹽水洗滌，并且取1滴廣普抗免疫球蛋白G（IgG）抗人球蛋白血清滴入試管，離心處理以后觀察離心結果，凝集即為抗體陽性。釋放實驗方法：取大試管備用，將1 mL新生兒壓積紅細胞和等量生理鹽水加入試管中，將試管放置于溫度為56 ℃的水浴箱中，不斷振搖試管（7 min），隨后將試管取出，離心處理5 min，取上清液備用。

1.2.3 血型鑒定方法 試管法血型鑒定方法：取血液標本開展離心操作，對反定結果進行觀察，以陰性對照管將冷凝集排除。微柱凝膠技術血型鑒定方法：取血液標本實施離心處理，取凝膠微管分別標記為A管、B管、C管、E管、F管，取0.5%紅細胞懸液滴入至A管、B管、C管及D管當中，取已知A型、B型紅細胞懸液（0.5%）和血清分別滴入至E管和F管中，隨后實施離心處理并分析離心結果。

1.2.4 交叉配血 凝聚胺法交叉配血：對血液樣本進行離心操作，取凝膠微管2支并標記好主、次側，配置好紅細胞懸液，于主側加入輸血標本2滴和供血標本紅細胞懸液1滴，次側加入供血標本2滴和輸血標本紅細胞懸液1滴，隨后分別加入低離子介質溶液（0.6 mL），充分混勻，靜置1 min后取2滴凝聚胺溶液分別加入，靜置15 s以后實施離心處理，于管底取0.1 mL凝集液體，取2滴重懸液滴入，判斷配血結果。微柱凝膠技術交叉配血法：對血液樣本實施離心操作，取標記好主側和次側的凝膠微管兩支備用，制作紅細胞懸液，于主側加入供血者標本50 μL和輸血者標本紅細胞懸液50 μL，次側加入供血者標本紅細胞懸液50 μL和輸血者標本紅細胞懸液50 μL，將微管放入溫度為37 ℃的環(huán)境中孵育，15 min后實施離心處理。

1.3 觀察指標 ①比較兩種檢驗技術的校驗指標檢驗陽性率（直接抗人球蛋白陽性率、血清游離抗體陽性率和抗體放散陽性率）。②比較兩種檢驗技術的血型鑒定結果（正反定型符合率和正反定型不符率）。③記錄并分析凝聚胺法和微柱凝膠技術的交叉配血（交叉配血成功率和交叉配血不合率）情況。

1.4 統(tǒng)計學分析 應用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件分析處理文中數(shù)據(jù)，計數(shù)資料用[例(%)]表示，行χ2檢驗。以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 校驗指標檢驗陽性率 微柱凝膠技術檢驗的直接抗人球蛋白、血清游離抗體及抗體放散陽性率均顯著高于試管法檢驗，差異均有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05），見表1。

表1 兩種不同檢驗技術校驗指標檢驗陽性率比較[例(%)]

2.2 血型鑒定結果 微柱凝膠技術檢驗的正反定型符合率、不符合率與試管法檢驗比較，差異均無統(tǒng)計學意義（均P＞0.05），見表 2。

表2 兩種不同檢驗技術血型鑒定結果比較[例(%)]

2.3 交叉配血情況 微柱凝膠技術的交叉配血成功率顯著高于凝聚胺法，交叉配血不合率顯著低于凝聚胺法，差異均有統(tǒng)計學意義（均P＜0.05），見表3。

表3 兩種不同檢驗技術交叉配血情況比較[例(%)]

3 討論

新生兒溶血病指的是母親和新生兒的血型不合，母體中產(chǎn)生同胎兒血型抗原不匹配的血型抗體，且經(jīng)過胎盤進入至胎兒的機體當中，導致同族免疫性溶血現(xiàn)象發(fā)生。ABO新生兒溶血病是臨床中較為常見的一種類型，若未獲得有效控制，隨著病情進一步發(fā)展，可誘發(fā)膽紅素腦病，對患兒健康甚至生命安全均存在嚴重威脅。為此盡早診治是改善患兒病情與預后的關鍵。目前臨床上主要采用輸血治療ABO新生兒溶血病患兒，為保證輸血安全性，在輸血之前必須加強臨床檢驗工作[5]。但是目前臨床檢驗方法多，且常有檢驗不合理的情況存在，降低校驗準確率的同時，也增加了誤診的風險，不利于疾病的早期診斷與治療。

微柱凝膠技術是血型血清學技術，具有特異性和靈敏度高的優(yōu)勢，該項檢驗技術是輸血前血清學篩查中的常用技術，通過實施微管柱灌注法，將紅細胞經(jīng)過微柱當中的凝膠顆粒分子過濾，使每個紅細胞過濾時將發(fā)生凝集的紅細胞保留，以供醫(yī)務人員分析及確定凝集反應結果。微柱凝膠技術的結果更為直觀，且無需開展顯微鏡觀察[6-7]。本次研究結果顯示，微柱凝膠技術的直接抗人球蛋白陽性率、血清游離抗體陽性率及抗體放散陽性率均顯著高于試管法檢驗，其正反定型不符率較低，但同試管法檢驗比較，差異無統(tǒng)計學意義，表明微柱凝膠技術應用于ABO新生兒溶血病患兒輸血前檢驗中可以幫助醫(yī)務人員明確患兒的病情，且可準確鑒定供血者和輸血者的血型，為疾病治療提供有力依據(jù)?；純鹤陨頎顩r存在的差異使患兒體內紅細胞血型抗原表達強度有一定的差異，同時患兒體內被動輸入的溶血性抗體數(shù)量與性質也存在差異，因此，對患兒進行交叉配血檢測時，檢測結果的準確度會受到配血檢測方法靈敏度的影響[8]。本研究結果顯示，微柱凝膠技術的交叉配血成功率顯著高于凝聚胺法，其原因在于微柱凝膠技術的結果更為直觀，減小了人為影響因素產(chǎn)生的干擾，具有較高的特異性和準確度。

綜上，在ABO新生兒溶血病患兒輸血前檢驗中應用微柱凝膠技術的準確率較高，可有效降低漏檢率與誤檢率，值得進一步推廣應用。