□ 趙 迪 柏超凡 趙小青 河南科技職業(yè)大學(xué) 許聚超 中國人民解放軍66188部隊(duì)

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

氣相色譜儀，帶氫火焰離子化檢測器；超聲波振蕩器；離心機(jī)；氯化鈉；10%硫酸溶液；50 g/L亞硝酸鈉溶液；1 mol/L氫氧化鈉溶液；正己烷，優(yōu)級純；甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

在硫酸介質(zhì)中環(huán)己基氨基磺酸鈉與亞硝酸鈉反應(yīng)，生成環(huán)己醇亞硝酸酯，正己烷提取，氣相色譜分離，保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量[1]。

1.3 實(shí)驗(yàn)步驟

1.3.1 配制標(biāo)準(zhǔn)溶液

分別吸取0.16 mL、0.40 mL、0.80 mL、1.60 mL、4.0 mL和8.0 mL標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液（10.00 mg/mL），于50 mL比色管中，加水至20 mL[2]，使各管中甜蜜素的含量依次為0.08 mg、0.20 mg、0.40 mg、0.80 mg、2.00 mg和4.00 mg。

1.3.2 樣品前處理

取樣品可食用部位碾碎，準(zhǔn)確稱取5.0 g樣品，于50 mL比色管中，用蒸餾水定容，超聲振蕩30 min，冷卻，混勻，靜置（1.5 h左右，也可離心），取25 mL上清液于50 mL比色管。有個(gè)別樣品在經(jīng)過定容、超聲振蕩、冷卻、混勻和靜置過程后，上清液不足25 mL，可將樣品倒入離心管中，4 000 r/min離心5 min，若還不足25 mL，可加入適量蒸餾水繼續(xù)離心5 min。

1.3.3 色譜分析

把上述裝有標(biāo)準(zhǔn)系列溶液和試樣溶液的比色管放在試管架上，一起放入冰柜中，冷凍30 min，取出后，向各比色管中加入亞硝酸鈉溶液（50 g/L）和10%硫酸溶液各5 mL，加蓋，上下顛倒1 min混勻，再放入冰柜中30 min，取出后，準(zhǔn)確加入正己烷10.00 mL，5 g氯化鈉，加蓋，上下顛倒1 min混勻，正己烷層供氣相色譜分析。

1.4 儀器參考條件

色譜柱：30 m×0.25 mm×0.25 μm毛細(xì)管柱；柱溫：80 ℃，進(jìn)樣口溫度：150 ℃，檢測器（FID）溫度：200 ℃；氮?dú)猓?6.6 kPa，氫氣：40 mL/min，空氣：400 mL/min；分流比：10∶1，流速：1 mL/min；進(jìn)樣體積：1.0 μL。

1.5 測定

依據(jù)儀器參考條件，將氣相色譜儀調(diào)節(jié)至最佳測定狀態(tài)，測定標(biāo)準(zhǔn)系列及樣品，以保留時(shí)間定性，以測得的峰面積對甜蜜素質(zhì)量（mg）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[3]，10%平行樣檢測。

此外，樣品的正己烷提取液必須馬上測定，并在盡短時(shí)間內(nèi)測定完畢，隨時(shí)間延長，環(huán)己醇峰逐漸提高。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

將上述標(biāo)準(zhǔn)系列溶液按儀器條件進(jìn)行分析，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度作為橫坐標(biāo)，甜蜜素定量峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖1所示，得到線 性 方 程y=593 853x—11 081，在 濃度為0.08 mg/mL～4.00 mg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.998 8，方法檢出限為0.002 g/kg。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2 樣品檢測結(jié)果

我國規(guī)定，餅干、面包等食品中甜蜜素的最大使用量為0.65 g/kg。此次實(shí)驗(yàn)共檢測27份樣品，其中25份檢出值范圍低于0.002，2份檢出值范圍0.002～0.379 g/kg，檢出率7.41%，超標(biāo)數(shù)0，合格率100%。結(jié)果表明，此次收集的27份樣品中甜蜜素的含量均未超標(biāo)，具體見表1。為使實(shí)驗(yàn)更加精確，取1份不含甜蜜素的空白樣品平行測定6次，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.41%。

表1 樣品檢測結(jié)果

2.3 加標(biāo)回收試驗(yàn)

分別在3份不同的樣品中加入甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，每一份樣品中各加入1種不同濃度的甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液，其回收率在85.2%～99.7%，具體見表2[4]。

表2 加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)論

本文采用氣相色譜法檢測周口市售餅干、面包等食品中甜蜜素含量，共檢測27份樣品，其中檢出數(shù)為2，檢出率7.41%，檢出值范圍0.002～0.379 g/kg，超 標(biāo) 數(shù)0，合格率100%，且樣品回收率在85.2%～99.7%。結(jié)果表明，氣相色譜法操作簡便、快捷，準(zhǔn)確率高，適合餅干、面包等食品中甜蜜素的檢測。