姜麗麗 羅 慧 胡雅平 李朝彬 李 濤 李 想 馮永琦*

1.陜西省寶雞市婦幼保健院(721000)；2.陜西省榆林市星元醫(yī)院

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)也叫做習(xí)慣性流產(chǎn)，受年齡、環(huán)境、身體素質(zhì)、疾病等多重因素影響，占所有流產(chǎn)因素的20%[1]。病因未完全闡明，目前研究側(cè)重于母體方面，并認為50%以上與胚胎染色體異常有關(guān)，但仍有較多復(fù)發(fā)性流產(chǎn)無法找到病因[2]。胚胎由男性提供一半遺傳物質(zhì)，因此精子狀態(tài)也可能是復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的重要影響因素[3]。文獻[4-5]提示精子畸形率和DNA損傷極有可能造成男性不育，且隨著年齡的增大，精子畸形和DNA完整性下降的可能性也越高。本研究對復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與精子畸形率和DNA完整性的相關(guān)性進行分析，為臨床復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的治療和預(yù)防提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年6月-2019年6月本院治療復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者的配偶男性為流產(chǎn)組。納入標準：與同一配偶發(fā)生≥2次流產(chǎn)。排除標準：①染色體異常、有免疫系統(tǒng)疾病；②配偶妊娠期綜合征及其他疾?。虎凵诚到y(tǒng)疾?。虎苄难芗膊』蚱渌卮蠹膊?。同時選取有正常生育史男性為對照組，其女方在一年內(nèi)均有正常生育。本研究獲得醫(yī)學(xué)倫理委員會的批準，受試者均知情同意。

1.2 實驗方法

精液收集后保存于液氮中待檢，每個樣品共取5000～10000條精子。常規(guī)分析男子精液，檢測儀器為北京偉力科技發(fā)展公司生產(chǎn)的偉力WLJY-9000彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)，通過Kruger標準評定精子畸形率。樣本吖啶橙染色精子DNA染色體檢測選用Calibur公司生產(chǎn)的流式細胞儀，488nm波長測定DNA完整性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩組精液常規(guī)參數(shù)比較

流產(chǎn)組150例，年齡(28.9±3.1)歲，女方年齡(22～28)歲；對照組150例，年齡(28.8±3.2)歲，女方年齡(22～28)歲。兩組無差異(P>0.05)。對照組精子活率、A級百分比、精子濃度、前向運動精子均高于流產(chǎn)組(P<0.05)。見表1。

2.2 兩組精子畸形率比較

流產(chǎn)組頭部畸形率、尾部畸形率均高于對照組(P<0.05)，精子頸部和中斷兩組無差異(P>0.05)。見表2。

表1 兩組精液常規(guī)參數(shù)比較

表2 兩組精子畸形率比較

2.3 兩組精子DNA完整性比較

流產(chǎn)組精子碎片率(DFI)值(28.5±2.35%)高于對照組(13.4±1.27%)(t=69.23，P=0.000)。

2.4 復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與精子畸形率和DNA完整性的相關(guān)性分析

Spearman相關(guān)數(shù)據(jù)分析顯示，精子畸形率(r=-0.347,P=0.026)、精子活動率(r=-0.534,P=0.008)和DFI(r=0.512,P=0.000)與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)相關(guān)。

3 討論

臨床對復(fù)發(fā)性流產(chǎn)病因確定者僅占50%，主要包括染色體異常、母體生殖道異常、母體內(nèi)分泌異常、免疫功能異常、生殖道感染、宮頸機能不全及血栓形成傾向等[6-7]。目前關(guān)于復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的病因男方因素研究相對較少，精子異?？赡苡绊懪咛ダ^續(xù)發(fā)育進而導(dǎo)致胚胎停育或流產(chǎn)[8-9]。

精液常規(guī)分析是臨床評估男性生育力的基本檢測手段，對男性“少精弱精癥”誘發(fā)的不育具有一定診斷價值[10-11]。 但在女性流產(chǎn)中，精液常規(guī)參數(shù)與胚胎丟失的相關(guān)性尚存在分歧[12]。本研究發(fā)現(xiàn)對照組精子活動、A級百分比、精子濃度和前向運動率均高于流產(chǎn)組。精子載有男性的遺傳信息，無損傷、高質(zhì)量的精子是父系遺傳信息完整傳遞給子代的前提[13-14]。本研究流產(chǎn)組頭部畸形率、尾部畸形率均高于對照組，精子頸部和中斷無差異，精子畸形率略高于對照組，DFI值高于對照組，表明流產(chǎn)組DNA碎片化程度較大。精子DNA損傷即精子DNA發(fā)生單鏈或雙鏈斷裂，主要由精索靜脈曲張、化療、放療、吸煙、氧化應(yīng)激反應(yīng)、電離輻射、魚精蛋白缺乏等原因造成[15]。DNA受損的精子仍可受精，而精卵結(jié)合后卵母細胞具有修復(fù)精子DNA的功能，如完全修復(fù)，則受精卵繼續(xù)發(fā)育，可正常妊娠分娩[16]。但如果精子DNA損傷嚴重，或卵母細胞修復(fù)能力減弱，結(jié)果可能導(dǎo)致流產(chǎn)、胚胎停育或畸形[17-18]。說明健康男性的精子質(zhì)量普遍高于具有復(fù)發(fā)性流產(chǎn)史男性，這也提示精子質(zhì)量對改善復(fù)發(fā)性流產(chǎn)有潛在作用。

本研究發(fā)現(xiàn)精子畸形率、精子活動率和DFI與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)相關(guān)，提示提高男性精子質(zhì)量可以有效避免復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生。為預(yù)防復(fù)發(fā)性流產(chǎn)，建議孕前檢查精子畸形率和DNA完整性。自然受精和體外受精需要精子識別并穿透包繞卵子的顆粒細胞和透明帶的黏液基質(zhì)，透明質(zhì)酸是卵子和透明帶黏液基質(zhì)的主要成分，精子與卵子透明質(zhì)酸結(jié)合，繼而實現(xiàn)穿透與受精。但是精子僅在成熟后才能獲得與透明質(zhì)酸結(jié)合的能力，不成熟的精子不具備與透明質(zhì)酸結(jié)合的能力，導(dǎo)致受精失敗，而精子畸形率或DNA完整性較差多會造成患者精子成熟可能性較低，這也可能是導(dǎo)致復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的原因之一[19-20]。

綜上所述，復(fù)發(fā)性流產(chǎn)與精子畸形率和DNA完整性密切相關(guān)，提高男性精子質(zhì)量可以有效避免復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生。