李小莉 徐健 王君麗

近年來研究發(fā)現(xiàn)，高血壓病、冠心病、2型糖尿病、腦卒中等患者通常合并阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征（OSAHS），且OSAHS與這些疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)［1］。其機(jī)制與患者夜間反復(fù)出現(xiàn)上氣道部分或完全阻塞，缺氧/再氧合引起全身炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激有關(guān)，然而OSAS發(fā)生氧化應(yīng)激的機(jī)制尚不清楚，現(xiàn)今多是以白三烯B4（LTB4）、脂氧素A4（LXA4）和8-異前列腺素（8-isoprostane）來反映氧化應(yīng)激狀態(tài)。呼出氣冷凝物（EBC）具有簡單、重復(fù)、無創(chuàng)、患者易接受等特點(diǎn)，能反應(yīng)氣道氧化應(yīng)激程度。本研究通過檢測(cè)OSAHS患者EBC和血清中8-isoprostane、LTB4、LXA4，以了解其氣道氧化應(yīng)激的程度和給予持續(xù)氣道正壓通氣（CPAP）治療后的變化，探討與最低SpO2、BMI和呼吸暫停低通氣指數(shù)（AHI）的相關(guān)性，為研究OSAHS的發(fā)病機(jī)制提供理論參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2017年10月至2019年10月因睡眠打鼾至本院呼吸科就診并行多導(dǎo)睡眠監(jiān)測(cè)確診為重度OSAHS的患者30例，診斷標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)2011年中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)會(huì)睡眠呼吸障礙專業(yè)委員會(huì)制定的指南［2］。其中，男28例，女2例；平均年齡（44.65±8.92）歲，平均BMI指數(shù)（27.45±3.35）。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)PSG檢測(cè)達(dá)到OSAHS診斷標(biāo)準(zhǔn)。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：慢性氣道炎癥性疾??；已知引起睡眠紊亂如發(fā)作性睡病等；全身重要臟器的器質(zhì)性病變。另同期選取健康人20例作為對(duì)照，均經(jīng)本院體檢血常規(guī)、尿常規(guī)、肝腎功能、血糖、腫瘤指標(biāo)、風(fēng)濕免疫、胸片、心電圖、呼氣一氧化氮等檢查正常，排除重要臟器病變。其中，男17例，女3例；平均年齡（44.70±9.99）歲，平均BMI指數(shù)（23.67±2.67）。

1.2 方法 （1）PSG檢測(cè)：監(jiān)測(cè)前記錄一般資料（年齡、性別、身高、體重，BMI、胸圍、腰圍及頸圍）。應(yīng)用美國多導(dǎo)睡眠監(jiān)測(cè)系統(tǒng)行多導(dǎo)睡眠圖監(jiān)測(cè)：腦電圖、眼電圖、心電圖，AHI、最低SpO2、睡眠分期比例等。（2）收集血清及EBC標(biāo)本：PSG監(jiān)測(cè)結(jié)束后及經(jīng)CPAP治療1個(gè)月后，采集外周血4 ml，離心后分離血清分裝于EP管；呼出氣冷凝液采用Rtube收集裝置（USA）收集后分裝于EP管，兩者均置于-70 ℃冰箱保存待測(cè)。8-isoprostane、LTB4、LXA4采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），各指標(biāo)的可行性已經(jīng)之前的研究所證實(shí)［4］。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料呈近似正態(tài)分布，以（±s）表示，兩樣本均數(shù)比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，治療前后比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Spearman檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CPAP治療前后各細(xì)胞因子水平和AHI、最低SpO2比較 見表1、2。

表1 CPAP治療前后各細(xì)胞因子水平比較［pg/ml，（±s）］

表1 CPAP治療前后各細(xì)胞因子水平比較［pg/ml，（±s）］

注：與健康對(duì)照組比較，*P＜0.05；與觀察組治療前比較，#P＜0.05

n 8-isoprostane LTB4 LXA4觀察組治療前EBC 30 13.08±2.78* 25.71±7.65* 46.93±5.51*觀察組治療后EBC 30 11.17±4.05*# 22.01±6.49*# 42.72±6.60*#觀察組治療前血清 30 35.01±5.87* 55.11±10.07* 149.23±21.52*觀察組治療后血清 30 28.26±7.76*# 49.48±6.61*# 131.56±21.56*#健康對(duì)照組EBC 20 7.19±1.18 25.53±4.88 25.46±6.42健康對(duì)照組血清 20 18.18±3.33 32.56±6.65 70.40±12.27

表2 CPAP治療前后AHI、最低SpO2比較（±s）

表2 CPAP治療前后AHI、最低SpO2比較（±s）

注：與治療前比較，*P＜0.05

AHI（次 /h） 最低 SpO2（%）治療前 60.22±13.62 70.70±9.19治療后1個(gè)月 2.93±1.99* 88.01±15.52*

2.2 相關(guān)性分析 AHI與治療前EBC中8-isoprostane呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r=0.793（P＜0.01），但與LTB4、LXA4并不存在相關(guān)性；EBC和血清中8-isoprostane、LTB4、LXA4與最低SpO2均不相關(guān)。

3 討論

BADRAN等［4］研究發(fā)現(xiàn)慢性間歇性低氧能引起糖尿病小鼠血管一氧化氮合酶脫偶聯(lián)，一氧化氮生物利用度降低，內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙，8-isoprostane水平升高。8-isoprostane作為反映肺部氧化應(yīng)激的生物標(biāo)記物，研究其作用機(jī)制有助于明確OSAHS相關(guān)的氧化應(yīng)激損傷機(jī)制。LTB4是促炎因子，能加速細(xì)胞氧自由基的釋放，同時(shí)增加活性氧族的產(chǎn)物。因此8-isoprostane、LTB4可作為評(píng)估CPAP治療前后氣道氧化應(yīng)激變化的客觀指標(biāo)。

本研究發(fā)現(xiàn)OSAHS患者EBC及血清8-isoprostane、LTB4水平高于對(duì)照組，考慮與睡眠時(shí)反復(fù)出現(xiàn)呼吸暫停、低通氣有關(guān)，這種病理生理改變引起氧自由基生成增多，氧化應(yīng)激和全身炎癥反應(yīng)增強(qiáng)。經(jīng)CPAP治療后AHI明顯下降，治療后1個(gè)月EBC及血清8-isoprostane、LTB4水平較治療前明顯下降。而LLOBERES等［5］研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)持續(xù)氣道正壓通氣治療后1個(gè)月，呼出氣冷凝液及血清中8-isoprostane、LTB4較前明顯下降，與本研究相符，證實(shí)OSAS患者氣道存在局部氧化應(yīng)激；但血清中8-isoprostane、LTB4水平無明顯下降，與本研究不同，原因可能與本研究納入對(duì)象均為重度OSAHS患者有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，8-isoprostane與AHI的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，提示隨著OSAHS患者氣道阻塞程度加重，缺氧導(dǎo)致巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等細(xì)胞活躍增高，釋放活性氧增加，氧化應(yīng)激程度越劇烈，最終8-isoprostane產(chǎn)物生成增多。給予夜間應(yīng)用持續(xù)正壓通氣能改善夜間呼吸暫停、低通氣，減少缺氧／再氧合所致的體內(nèi)氧自由基過量生成，減弱了氧化應(yīng)激對(duì)組織、細(xì)胞的損傷。進(jìn)一步證明氧化應(yīng)激在OSAHS及其合并癥的發(fā)病機(jī)制中起著非常重要作用。因此8-isoprostane可作為氧化應(yīng)激的標(biāo)志物，與睡眠監(jiān)測(cè)相關(guān)指標(biāo)相結(jié)合，有助于客觀的判斷CPAP治療效果，并對(duì)并發(fā)癥的發(fā)生有一定的預(yù)見意義。

脂氧素是花生四烯酸代謝產(chǎn)生的不飽和脂肪酸產(chǎn)物，具有抑制炎癥、抗氧化應(yīng)激等作用。LXA4為脂氧素的主要成員之一，LXA4表達(dá)異常是炎癥失控的重要因素［6］。LXA通過抑制細(xì)胞鈣通道的激活與開放，抑制活性氧和自由基的產(chǎn)生［7］，降低氧化應(yīng)激反應(yīng)。相比未運(yùn)動(dòng)的哮喘兒童，運(yùn)動(dòng)后的哮喘兒童呼出氣冷凝液中的LXA4水平升高，提示運(yùn)動(dòng)過程中產(chǎn)生的LXA4可能會(huì)抑制運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)的促炎介質(zhì)的活性，減輕炎癥反應(yīng)和抑制支氣管收縮，意味著脂氧素在炎癥反應(yīng)中起著重要作用。本研究OSAHS患者EBC及血清LXA4水平較對(duì)照組增高，CPAP治療后EBC及血清中LXA4水平較治療前下降。提示OSAHS患者存在氧化應(yīng)激，CPAP治療糾正夜間組織和細(xì)胞缺氧，說明LXA4可能參與降低活性氧的生成及降低促炎因子的釋放，降低OSAHS局部氣道和系統(tǒng)的氧化應(yīng)激反應(yīng)。

綜上所述，8-isoprostane、LTB4、LXA4參與了氣道氧化應(yīng)激過程，治療前后OSAHS患者EBC及血清中各因子的水平變化可作為了解氣道氧化應(yīng)激變化的參考指標(biāo)，EBC中8-isoprostane與AHI呈正相關(guān)，8-isoprostane水平可間接反應(yīng)疾病的嚴(yán)重程度。EBC可作為CPAP治療效果的無創(chuàng)、有效監(jiān)測(cè)指標(biāo)。