徐 煒

(江蘇省邗江中學(xué) 225100)

一、教材分析

酵母細胞固定化實驗，是人教版高中生物選修1“生物技術(shù)實踐”重要實驗之一，本實驗重難點均為嘗試固定化酵母細胞的制備及發(fā)酵.突破重難點的做法有：1.提前做多種預(yù)實驗，預(yù)測實驗中可能發(fā)生的情況，以便更好地指導(dǎo)學(xué)生.2.對實驗進行一定的改進，提高實驗成功率，增強學(xué)生信心.3.利用多媒體視頻+實物投影+板書等多種教學(xué)手段，并且提前培養(yǎng)“學(xué)生專家”，協(xié)助教師完成實驗.

二、教學(xué)目標(biāo)

1.科學(xué)探究

動手對酵母細胞進行固定化，通過對凝膠珠的形態(tài)和顏色來理解操作要領(lǐng).

2.科學(xué)思維

嘗試進行細胞固定化，并利用固定化酵母細胞進行酒精發(fā)酵；

改進實驗評價，提高批判性思維、創(chuàng)新思維和科學(xué)探究能力；通過設(shè)計并探究實驗過程，進一步提高搜集、處理科學(xué)信息的能力以及分析和解決問題的能力.

3.生命觀念與社會責(zé)任

通過改進和評價實驗，養(yǎng)成嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度，體會固定化酶的優(yōu)越性.

三、教學(xué)過程設(shè)計

教學(xué)過程主要從“情景引入、激發(fā)興趣，設(shè)置問題、引發(fā)探究，分組操作、合作學(xué)習(xí)，聚焦討論、規(guī)范操作，歸納總結(jié)、拓展延伸”這五個方面展開，核心環(huán)節(jié)是學(xué)生的分組操作以及合作學(xué)習(xí).為了讓實驗在45min內(nèi)完成并培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)造性思維能力，筆者對該實驗做了以下幾點改進.

四、實驗方法改進

1.實驗分組的改進

本次實驗原先是教材中的一項驗證性實驗，深入思考會發(fā)現(xiàn)有許多地方值得探究.例如，使用不同濃度的海藻酸鈉固定酵母細胞最終形成的凝膠珠在顏色形狀上會有什么不同？包埋酵母的材料有很多，用其他材料替代海藻酸鈉是否可以？CaCl2溶液濃度的不同會對實驗造成影響嗎？未活化的酵母細胞和活化了的酵母細胞在這個實驗中的實驗效果有多大的差異呢？帶著這些問題本人將這個實驗分成了每個班進行四個大組的探究.如圖1所示.

圖1

2.配制海藻酸鈉溶液的改進

筆者查閱資料發(fā)現(xiàn)不同廠家生產(chǎn)的海藻酸鈉試劑加水的量不一樣，因此建議在實驗前先做預(yù)實驗，找出加水的適宜量.A組學(xué)生配制濃度為0.05、0.07、0.09、0.11、0.13、0.15g/mL海藻酸鈉溶液進行實驗，觀察到海藻酸鈉濃度偏低形成的凝膠珠顏色較淺，0.07～0.09g/mL濃度適宜，海藻酸鈉濃度越高其黏稠性越大，當(dāng)大到一定程度時，與酵母細胞的混合液不但不易從注射器口滴下，出現(xiàn)拖尾的蝌蚪狀等現(xiàn)象，而且所制備的凝膠珠顏色也由白色逐漸加深至土黃色.

3.包埋材料的改進

B組學(xué)生用一定濃度的瓊脂包埋酵母菌，發(fā)現(xiàn)無需在CaCl2溶液中聚沉30min，10min即可，當(dāng)堂課可見結(jié)果，且發(fā)酵效果好.需要注意的是，瓊脂易凝固，在冷卻至50℃左右即可與酵母混合.另外，由于瓊脂包埋的酵母菌無法在CaCl2溶液中浸泡形成凝膠珠，所以可以嘗試將瓊脂與酵母細胞混合后倒入培養(yǎng)皿，待其冷卻后將其用解剖刀劃成一個個小正方形便于后期發(fā)酵(圖2所示).48h后做酒精檢測，圖3為分別用瓊脂、海藻酸鈉包埋酵母菌發(fā)酵結(jié)果的鑒定，不難發(fā)現(xiàn)瓊脂包埋酵母細胞取得了更好的發(fā)酵效果.

圖2

圖3

4.CaCl2溶液濃度的改進

如果改變CaCl2溶液的濃度會對凝膠珠的成形有何影響？為了解決這一疑問，C組學(xué)生配制濃度為0、0.03、0.06、0.11、2.0、3.0mol/L的CaCl2溶液進行實驗，發(fā)現(xiàn)CaCl2溶液濃度為0時，固定化酵母細胞由圓形變成蝌蚪形沉入燒杯底部，并很快溶解在一起；當(dāng)CaCl2溶液濃度為0.03 mol/L時，固定化的酵母細胞呈扁圓餅形，一碰即碎；當(dāng)CaCl2溶液濃度≥0.06 mol/L時，固定化酵母細胞能呈圓球形沉淀，并且隨著CaCl2溶液濃度增大，凝膠珠的彈性增強.進一步查閱資料發(fā)現(xiàn)，張菡、杜雙奎等人通過對固定化酵母細胞的強度、后期發(fā)酵過程中的殘?zhí)橇亢途凭冗M行檢測，認(rèn)為Ca2+濃度為2.0mol/L時，固定效果最為理想.

5.酵母細胞活化的改進

實驗前實驗員要做大量的準(zhǔn)備工作，活化酵母細胞至少需要1h，筆者查閱資料發(fā)現(xiàn)如果想要達到教材上圖形顯示的即氣泡充滿整個燒杯的現(xiàn)象，在活化酵母時，應(yīng)將溫度調(diào)至30℃，同時加入一定濃度的葡萄糖溶液，那么用未活化的酵母細胞與活化了的酵母細胞在這個實驗中會產(chǎn)生的很大的差別嗎？D組學(xué)生就想要探究這個問題.結(jié)果表明：未活化的酵母細胞固定后也能形成圓形凝膠珠，后期發(fā)酵也能產(chǎn)生酒精，與活化了的酵母細胞產(chǎn)生的實驗結(jié)果差別不是很大.

6.實驗器材的改進

“將混合均勻的海藻酸鈉溶液與酵母細胞轉(zhuǎn)移至注射器中”是教材中提供的方案，但是手頭有很多實驗器材都可以代替注射器.例如，一次性塑料滴管、玻璃棒以及較細的果汁滴管等，滴出的凝膠一樣可以成形，優(yōu)點是沒有拖尾現(xiàn)象且能有效減少氣泡產(chǎn)生，缺點是耗時長.

改進器材的時候還發(fā)現(xiàn)如果用教材中提到的鑷子來捏取凝膠珠除非是訓(xùn)練過的實驗員否則很容易把它壓碎，于是有人想到?jīng)_洗凝膠珠時，可改用消過毒的紗布或撈金魚的網(wǎng)兜，既能沖洗干凈，又不至于被水沖走，比教材中用鑷子更方便、快捷.

第三個器材的改進就是在發(fā)酵過程中，課本實驗要求用的是錐形瓶，但是錐形瓶放在實驗室里觀察不易帶回，故而有學(xué)生提出發(fā)酵所用的容器可以是自帶飲料瓶，既達到實驗?zāi)康?，又方便學(xué)生觀察，減少危險，更增強了環(huán)保意識.

7.實驗操作的改進

在實驗過程中為縮短實驗時間、取得更好的實驗結(jié)果筆者在預(yù)實驗中獲得了一些實驗操作經(jīng)驗值，例如①溶解海藻酸鈉時，若用90℃水浴加熱，不會發(fā)生焦糊現(xiàn)象，加10mL蒸餾水后不需要再加水定容(蒸發(fā)量很少)；若用小火間斷加熱的方法，在溶解開始前直接加入12mL蒸餾水不需要再水定容，每次加熱至剛有大氣泡時就從石棉網(wǎng)上拿開，重復(fù)7～9次，就能完全溶解.②膠體冷卻至室溫時加入已活化的酵母細胞的這一操作，每個人皮膚對溫度的敏感程度不同，僅以“不燙手”為標(biāo)準(zhǔn)，會有部分學(xué)生至膠體結(jié)塊才加入酵母菌，不容易混合均勻.可改為用溫度計測量，或用恒溫水浴(35～40℃)直至膠體與酵母混合均勻.③固定化酵母細胞時，滴凝膠的距離為液面上15～20cm左右.

五、教學(xué)反思

實驗課的教學(xué)中，講清基本理論和原理仍是課堂教學(xué)中最基本方式.通過改進包埋材料發(fā)現(xiàn)瓊脂包埋酵母細胞效果很好，當(dāng)堂課可完成，增強了學(xué)生的探究興趣和成就感，建議推廣.此外引導(dǎo)探究要講究科學(xué)，課前喚醒學(xué)生探究欲望，要重視實驗記錄及反思，會達到事半功倍的效果.最后實驗前的預(yù)實驗非常重要，比如本次實驗中許多利于實驗成功的改進很多都是在預(yù)實驗中發(fā)現(xiàn).