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        高效液相色譜法測定血寶膠囊中大黃酚含量

        2021-01-20 05:31:24孫長仁
        關(guān)鍵詞:三氯甲烷供試甲醇

        孫長仁

        (吉林省白山市食品藥品檢驗(yàn)所,吉林 白山 134300)

        血寶膠囊由熟地黃、當(dāng)歸、漏蘆的、丹參、黨參、雞血藤、附子、桂枝、枸杞子、仙鶴草、川芎、虎杖、牛西西、連翹、赤芍、補(bǔ)骨脂、制何首烏、黃芪(蜜炙、刺五加、鹿茸、紫河車、女貞子、等多味藥材組方,具有補(bǔ)陰培陽,益腎健脾。用于再生障礙性貧血,白細(xì) 胞缺乏癥,原發(fā)性血小板減小癥,紫癜。牛西西同樣為血寶膠囊主要成分。

        牛西西具有、促進(jìn)血小板再生,收斂止血,潤腸通便,清熱解毒等功效,而其功效的發(fā)揮,活性成份主要依賴于“大黃酚”。因此選擇血寶膠囊中牛西西的活性成分大黃酚作為質(zhì)量控制指標(biāo)。

        1 儀器與試藥

        THERMO FIsher U3000效液相色譜儀。(大黃酚,110796-201922,含量以96.0%計(jì) 中國食品藥品檢定研究院)血寶膠囊(白山正茂藥業(yè)股份有限公司 國藥準(zhǔn)字Z22024266),批號為ZLB1922、ZLB1905,ZLB1815、ZLB2001,ZLB2005、Methanol(CH3OH)Water(0.45 um),磷酸(分析純)

        2 方法與結(jié)果

        2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

        方法色譜柱為(Agilent Tc-5 C18柱(250 mm×4.6 mm,,5 μm)流動(dòng)相:甲醇-0.1%磷酸(80:20),流速:0.8 mL/min;檢測波長254 nm

        2.2 對照品溶液制備

        精密稱取大黃酚對照品適量,加甲醇制成每1 mL含30 μg的對照品溶液。

        2.2.1 供試品溶液制備

        取本品粉末約0.25 g,精密加入三氯甲烷25 mL和1 mol/L硫酸溶液20 mL,稱定重量,置80℃水浴中加熱回流2小時(shí),冷卻至室溫,再稱定 重量,用三氯甲烷補(bǔ)足減失的重量,搖勻。分取三氯甲烷液,精密量取10 mL,蒸干,殘?jiān)蛹状际谷芙?,轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中, 加甲醇稀釋至刻度,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得。

        2.2.2 測定法

        分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5 μL,注入液相色譜儀,測定,即得。

        2.3 方法學(xué)考察

        線性關(guān)系考察:吸取對照品溶液(194.496 μg/mL)0.05、0.25、1.5、2.5、5、7.5 mL分別置10 mL容量瓶中用甲醇稀釋并定容至刻度,搖勻,即得。依法測定,以峰面積為橫坐標(biāo),進(jìn)樣質(zhì)量為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程y=2E-07x-0.0077(n=6) r=0.9993大黃酚進(jìn)樣量的線性范圍為(0.00486 μg~0.7294 μg)

        穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一供試品溶液(序號4),分別在0、2、6、12、24、48小時(shí),照正文方法測定,按峰面積計(jì)算,穩(wěn)定性良好。結(jié)果見表1。

        表1 穩(wěn)定性試驗(yàn)

        重復(fù)性試驗(yàn):取同一供試品,按正文擬定的色譜條件,連續(xù)測定6次。結(jié)果見表2。

        表2 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

        實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明重復(fù)性良好。

        加樣回收試驗(yàn):精密稱取已知含量的樣品6份,分別精密加入對照品溶液適量,依法測定含量并計(jì)算回收率。結(jié)果如表3。

        表3 大黃酚加樣回收試驗(yàn)果(n=6)

        2.4 樣品含量測定

        正文擬定的色譜條件測定5批樣品結(jié)果為ZLB1922、ZLB1905,ZLB1815、ZLB2001,ZLB2005批號 血寶膠囊中大黃酚含量分別為0.34 mg/粒,0.33 mg/粒,0.33 mg/粒,0.34 mg/粒,0.35 mg/粒

        3 討 論

        血寶膠囊對治療缺鐵性貧血,其療效比較明顯,還能有效避免西藥帶來的毒性反應(yīng)。血寶膠囊為血液疾病保守治療過程中的常用藥物[1]。目前2015版藥典尚未收入血寶膠囊的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn),因此檢驗(yàn)牛西西的活性成分大黃酚作為質(zhì)量控制指標(biāo)十分必要,通過方法學(xué)考證符合2015年版藥典通則要求[2]。

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