孫長仁

（吉林省白山市食品藥品檢驗(yàn)所，吉林 白山 134300）

血寶膠囊由熟地黃、當(dāng)歸、漏蘆的、丹參、黨參、雞血藤、附子、桂枝、枸杞子、仙鶴草、川芎、虎杖、牛西西、連翹、赤芍、補(bǔ)骨脂、制何首烏、黃芪（蜜炙、刺五加、鹿茸、紫河車、女貞子、等多味藥材組方，具有補(bǔ)陰培陽，益腎健脾。用于再生障礙性貧血，白細(xì) 胞缺乏癥，原發(fā)性血小板減小癥，紫癜。牛西西同樣為血寶膠囊主要成分。

牛西西具有、促進(jìn)血小板再生，收斂止血，潤腸通便，清熱解毒等功效，而其功效的發(fā)揮，活性成份主要依賴于“大黃酚”。因此選擇血寶膠囊中牛西西的活性成分大黃酚作為質(zhì)量控制指標(biāo)。

1 儀器與試藥

THERMO FIsher U3000效液相色譜儀。（大黃酚，110796-201922，含量以96.0%計(jì) 中國食品藥品檢定研究院）血寶膠囊（白山正茂藥業(yè)股份有限公司 國藥準(zhǔn)字Z22024266），批號為ZLB1922、ZLB1905,ZLB1815、ZLB2001，ZLB2005、Methanol（CH3OH）Water（0.45 um），磷酸（分析純）

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

方法色譜柱為（Agilent Tc-5 C18柱（250 mm×4.6 mm,，5 μm）流動(dòng)相：甲醇-0.1%磷酸（80：20），流速：0.8 mL/min；檢測波長254 nm

2.2 對照品溶液制備

精密稱取大黃酚對照品適量，加甲醇制成每1 mL含30 μg的對照品溶液。

2.2.1 供試品溶液制備

取本品粉末約0.25 g,精密加入三氯甲烷25 mL和1 mol/L硫酸溶液20 mL，稱定重量，置80℃水浴中加熱回流2小時(shí)，冷卻至室溫，再稱定 重量，用三氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，搖勻。分取三氯甲烷液，精密量取10 mL，蒸干，殘?jiān)蛹状际谷芙?，轉(zhuǎn)移至10 mL量瓶中， 加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.2 測定法

分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5 μL，注入液相色譜儀，測定，即得。

2.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察：吸取對照品溶液（194.496 μg/mL）0.05、0.25、1.5、2.5、5、7.5 mL分別置10 mL容量瓶中用甲醇稀釋并定容至刻度，搖勻，即得。依法測定，以峰面積為橫坐標(biāo)，進(jìn)樣質(zhì)量為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程y=2E-07x-0.0077（n=6） r=0.9993大黃酚進(jìn)樣量的線性范圍為（0.00486 μg～0.7294 μg）

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液（序號4），分別在0、2、6、12、24、48小時(shí)，照正文方法測定，按峰面積計(jì)算，穩(wěn)定性良好。結(jié)果見表1。

表1 穩(wěn)定性試驗(yàn)

重復(fù)性試驗(yàn)：取同一供試品,按正文擬定的色譜條件，連續(xù)測定6次。結(jié)果見表2。

表2 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明重復(fù)性良好。

加樣回收試驗(yàn)：精密稱取已知含量的樣品6份,分別精密加入對照品溶液適量,依法測定含量并計(jì)算回收率。結(jié)果如表3。

表3 大黃酚加樣回收試驗(yàn)果（n=6）

2.4 樣品含量測定

正文擬定的色譜條件測定5批樣品結(jié)果為ZLB1922、ZLB1905,ZLB1815、ZLB2001，ZLB2005批號 血寶膠囊中大黃酚含量分別為0.34 mg/粒，0.33 mg/粒，0.33 mg/粒，0.34 mg/粒，0.35 mg/粒

3 討 論

血寶膠囊對治療缺鐵性貧血，其療效比較明顯，還能有效避免西藥帶來的毒性反應(yīng)。血寶膠囊為血液疾病保守治療過程中的常用藥物[1]。目前2015版藥典尚未收入血寶膠囊的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，因此檢驗(yàn)牛西西的活性成分大黃酚作為質(zhì)量控制指標(biāo)十分必要，通過方法學(xué)考證符合2015年版藥典通則要求[2]。