□ 許 倩 黔南州檢驗(yàn)檢測(cè)院

茶多糖富含灰分、果膠、蛋白質(zhì)以及礦物質(zhì)元素等，茶多糖作為一種天然活性物質(zhì)，其營(yíng)養(yǎng)豐富，應(yīng)用價(jià)值廣泛。研究發(fā)現(xiàn)，茶多糖在調(diào)節(jié)免疫力、抗血栓、降血脂血糖等方面均有巨大的用途，對(duì)于治療糖尿病有特殊功效。目前，相關(guān)領(lǐng)域?qū)＜抑铝τ诓瓒嗵堑奶崛〖皽y(cè)定方法研究，挖掘茶多糖更大的應(yīng)用價(jià)值。

1 茶多糖提取及測(cè)定方法研究意義

我國(guó)茶葉生產(chǎn)量較高，一些高端茶葉的銷路比較好，但那些中低端茶葉因?yàn)闆]有銷路，而造成資源的大量浪費(fèi)。同時(shí)在茶葉生產(chǎn)加工過程中產(chǎn)生大量粗枝葉和茶葉灰末等副產(chǎn)品，這些副產(chǎn)品大多沒有被合理利用，因此，從中低檔茶葉中提取茶葉多糖，有利于解決中低端滯銷茶葉及其副產(chǎn)品的再利用問題，發(fā)揮其在保健、食品、醫(yī)藥等諸多領(lǐng)域的應(yīng)用價(jià)值。茶多糖是茶葉中的主要生理活性物質(zhì)之一，目前我國(guó)針對(duì)茶多糖還沒有具體的標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，主要是利用其他植物多糖的檢測(cè)方法來測(cè)定茶葉中茶多糖含量[1]。從茶葉當(dāng)中提取茶多糖，有利于提高茶葉利用效率，減少資源浪費(fèi)。茶多糖的應(yīng)用價(jià)值十分廣泛，其具有良好的藥理效果，茶多糖的藥用作用主要體現(xiàn)在以下方面：首先，攝入適量的茶多糖，有利于保護(hù)人體心血管系統(tǒng)，茶多糖具有良好的降血脂、降血糖的功效，它能夠增加冠狀動(dòng)脈流量；其次，茶多糖具有良好的抗凝血及抗血栓作用；最后，茶多糖還具有增加機(jī)體免疫功能的功效。雖然茶多糖具有如此多的藥理效果，但是由于茶多糖提取技術(shù)還比較落后，人們只能依靠飲茶來攝入茶多糖，但這樣攝入的茶多糖量是非常小的，難以達(dá)到良好的藥理效果。目前的茶多糖提取工藝流程多，難度大，花費(fèi)成本比較高。研究茶多糖提取及測(cè)定方法，有利于提高茶葉的綜合利用價(jià)值，優(yōu)化提取方法，提高提取率，節(jié)省提取成本，更好的發(fā)揮茶多糖的藥理功效。

2 茶葉中茶多糖的提取方法

本文所提出的茶多糖提取方法工藝如下：采集茶葉，對(duì)其進(jìn)行粉碎、脫脂等預(yù)處理—水浴提取—Sevage 法脫蛋白—去除小分子雜質(zhì)—沉淀稱量。

2.1 茶葉預(yù)處理

首先將采集來的茶葉洗凈、晾曬后粉碎。粉碎茶葉的目的是使其與溶媒的接觸面積變大，從而提高提取率。粉碎可采用粉碎機(jī)，如無粉碎機(jī)也可以使用剪刀剪碎干茶葉。本試驗(yàn)所使用的干茶葉量為10 g。在茶葉細(xì)胞外有一層脂質(zhì)包圍，需要對(duì)其進(jìn)行脫脂處理，脫脂溶劑可采用95%的乙醇。

2.2 水浴提取

將經(jīng)過脫脂處理的茶葉再次晾干，使用雙層濾布過濾，隨后在濾渣當(dāng)中加入300 mL 的水，兩次恒溫水浴各1.5 h。水浴的溫度差異也會(huì)影響茶葉中茶多糖的提取率，通過實(shí)驗(yàn)對(duì)比，水浴的溫度在60 ～70 ℃時(shí)，茶多糖的提取率是最高的。經(jīng)過水浴提取步驟后，將過濾所得的液體采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮至75 mL。

2.3 Sevage 法脫蛋白

Sevage 法是去除游離蛋白的一種很好的方法，此處采用Sevage 法脫蛋白，使蛋白質(zhì)變性呈膠狀后離心除去。向上一步驟得到的提取液中添加一定比例的Sevage 脫蛋白試劑，但此處應(yīng)注意，脫蛋白試劑用量的多少會(huì)影響茶多糖提取率。經(jīng)實(shí)踐證明，當(dāng)脫蛋白試劑用量與提取液比例為1 ∶3 時(shí)，茶多糖的提取率是最高的。完成脫蛋白步驟以后，對(duì)液體進(jìn)行攪拌，然后靜置至無白色沉淀生成，對(duì)靜置后的溶液進(jìn)行離心處理，取其上部清液。

2.4 去除溶液中的小分子雜質(zhì)及沉淀稱量

溶液當(dāng)中的小分子雜質(zhì)，例如茶多酚、低聚糖、氨基酸以及醇溶性蛋白質(zhì)等會(huì)對(duì)茶多糖的測(cè)定造成一定的干擾，因此，必須要對(duì)其進(jìn)行離心處理，得粗多糖。不同類型的多糖在不同濃度的低級(jí)醇中的溶解度是不一樣的，按比例加入甲醇或乙醇分步沉淀，然后稱量。

3 茶葉中茶多糖的測(cè)定

茶多糖純度不能以普通化合物的純度標(biāo)準(zhǔn)來衡量，測(cè)定茶葉中茶多糖的純度可采用以下方法[2]：①茶多糖通過凝膠層析進(jìn)行色譜檢測(cè)，可通過所得色譜圖確定茶多糖種類及其含量。當(dāng)前多采用高效液相色譜或凝膠色譜來檢測(cè)茶多糖的分離純化度。②高壓電泳。不同的多糖與硼砂形成不同的復(fù)合物，這些復(fù)合物所帶電荷是不一樣的，因此，在電場(chǎng)作用下，其遷移率是不一樣的。利用高壓電泳來檢測(cè)茶多糖，如果呈現(xiàn)的是單一色斑，則證明茶多糖為均一組分，但是高壓電泳法靈敏度不高，因此常常不被采用。

4 結(jié)語

對(duì)茶葉中茶多糖的提取及測(cè)定方法進(jìn)行研究，有利于提高茶葉的綜合利用效率。茶多糖是茶葉中富含的一種極具開發(fā)利用價(jià)值的生物活性物質(zhì)，在食品醫(yī)療以及保健等各個(gè)領(lǐng)域，都具有較大的應(yīng)用意義，采用高效率的提取及測(cè)定方法，有利于最大化實(shí)現(xiàn)其利用價(jià)值。