張修楠

【摘 要】目的：探討乙二胺四乙酸依賴性假性血小板減少原因以及糾正方法。方法：回顧性分析2018年3月-2019年4月收治的16例乙二胺四乙酸所致的血小板減少患者的臨床資料，采集靜脈血后給予抗凝劑乙二胺四乙酸二鉀（觀察組）與枸櫞酸鈉（對照組）處理，并實施血小板計數(shù)。結(jié)果：觀察組血小板計數(shù)明顯低于對照組（P<0.05），且對照組結(jié)果與手工計數(shù)結(jié)果差異不顯著（P>0.05）。結(jié)論：枸櫞酸鈉抗凝劑不會造成血小板聚集，當(dāng)出現(xiàn)乙二胺四乙酸依賴性假性血小板減少時，可選擇其作為抗凝劑給予血小板計數(shù)。

【關(guān)鍵詞】乙二胺四乙酸;枸櫞酸鈉;假性血小板減少;原因;糾正

【中圖分類號】R558.2【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1005-0019（2020）13--01

血常規(guī)檢查是臨床上最為常見的檢查項目之一，采用乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）作為抗凝劑，其可導(dǎo)致假性血小板減少，此現(xiàn)象稱為乙二胺四乙酸（EDTA）依賴性假性血小板減少癥（EDTA-PTCP），是由于抗凝劑EDTA誘導(dǎo)血小板中的特殊蛋白使血小板發(fā)生凝集，且在全自動血液分析儀上檢測時，血小板計數(shù)出現(xiàn)假性減少的現(xiàn)象，引起國內(nèi)外的高度關(guān)注。目前國內(nèi)外有與其相關(guān)的文獻(xiàn)報道和病例報道，EDTA抗凝劑可以誘導(dǎo)0.09-0.21%[1]的患者發(fā)生EDTA-PTCP的情況。由于這種假性血小板計數(shù)減低會導(dǎo)致臨床增加不必要的輔助檢查，甚至誤診、誤治，及醫(yī)療資源的浪費。如何發(fā)現(xiàn)并糾正其影響，對于保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性以及患者的身體健康具有重要的作用。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2018年3月-2019年4月收治的16例乙二胺四乙酸所致的血小板減少患者的臨床資料，其中男6例，女10例，年齡16-74歲，平均年齡（46.42±6.32）歲。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑 邁瑞 BC-6800 五分類血細(xì)胞分析儀，所用溶血劑、稀釋液及清洗液均為邁瑞公司生產(chǎn)，全血質(zhì)量控制品由邁瑞公司提供，Olympus CX21 雙目顯微鏡，江蘇康健邁瑞公司乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）真空抗凝管，血小板草酸銨稀釋液。

1.2.2 檢測方法 ①儀器分析：嚴(yán)格遵守相關(guān)操作規(guī)范，利用全自動血液流水線分析儀分別對加入枸櫞酸鈉與EDTA-K2的血液標(biāo)本進(jìn)行血小板數(shù)量測定。②血小板手工計數(shù)：至少由兩名資深檢驗人員實施血小板顯微鏡計數(shù)，每例計數(shù)兩次，取平均值。另外將含有EDTA-K2與枸櫞酸鈉的抗凝血給予推片操作，將血涂片通過瑞氏染液染色后給予顯微鏡鏡檢。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析 將所有數(shù)據(jù)錄入SPSS 20.0軟件并分析，檢測值以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，組間差異性比較采用配對t檢驗處理，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

觀察組血小板計數(shù)（54.4±14.6）109/L，明顯低于對照組（149.6±45.4）109/L，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;且對照組結(jié)果與手工計數(shù)結(jié)果（151.5±47.3）109/L，比較差異不顯著（P>0.05）。在顯微鏡下，觀察組血涂片存在大小各異以及數(shù)目不等的血小板聚集;對照組血小板則分布均勻。

3 討論

隨著科技的發(fā)展，全自動血細(xì)胞分析儀已廣泛應(yīng)用于臨床實驗室大批量標(biāo)本的全血細(xì)胞分析，國際血液標(biāo)準(zhǔn)化委員會（ICSH）認(rèn)可首選EDTA作為全血細(xì)胞分析的抗凝劑[2]。然而，EDTA偶爾可引起血液中的血小板聚集，使血小板發(fā)生假性減少。EDTA-PTCP是由于EDTA在抗凝血中可誘導(dǎo)血小板中的特殊蛋白，使血小板發(fā)生聚集，因而在全自動血細(xì)胞計數(shù)儀上檢測時，血小板計數(shù)發(fā)生了假性減少的現(xiàn)象。

偶爾發(fā)生的EDTA-PTCP可能主要與以下方面有關(guān)：EDTA-K2會引起血小板活化，從而使其正常形態(tài)出現(xiàn)較大的變化，進(jìn)而導(dǎo)致血小板膜表面的抗原的表位構(gòu)象出現(xiàn)明顯變化，并與血液中部分自身抗體產(chǎn)生免疫反應(yīng)而形成多種活性因子，最終引起血小板的聚集。若該類計數(shù)減少的情況未被及時發(fā)現(xiàn)，則會造成誤診誤治，不僅提高了患者心理以及經(jīng)濟(jì)壓力，另外還可能引發(fā)醫(yī)療事故，所以積極有效的措施進(jìn)行糾正具有重要的意義。EDTA-PTCP多見腫瘤患者、自身免疫性疾病、干燥綜合征、肝病、一些不明原因過敏的患者等[3]，因為發(fā)生率很低，容易漏診誤診。

在臨床工作中，若出現(xiàn)血小板計數(shù)顯著降低時，可按照以下處理措施：①仔細(xì)檢查標(biāo)本是否存在凝塊情況，排除抽血或其它因素引起的微小凝塊現(xiàn)象，并檢查儀器圖形、警示信息等方面，一般來說，當(dāng)出現(xiàn)PTCP時，雖然血小板直方圖的峰高部位無異常，但峰高顯著減小或無顯著峰高，且曲線表現(xiàn)為鋸齒樣，甚至出現(xiàn)多個峰呈波浪形漂移狀等情況。②遵守血小板減少的復(fù)片規(guī)則實施血涂片染色鏡檢，檢查血小板體積、形態(tài)以及分布等信息，觀察是否存在大血小板或聚集情況。③積極與臨床醫(yī)師交流，詢問患者是否伴有皮膚黏膜出血點以及紫癜等癥狀。④必要條件下，將草酸銨抗凝按1∶19的比例進(jìn)行稀釋，采集20μL末梢血，利用手工法計數(shù)血小板。⑤若條件允許，可使用不加抗凝劑的血液標(biāo)本進(jìn)行血小板計數(shù)檢測。⑥再次進(jìn)行抽血復(fù)檢，選擇放有枸櫞酸鈉的血液標(biāo)本進(jìn)行檢驗。此外，對確診為EDTA-PTCP的病例，醫(yī)師應(yīng)明確告知其后續(xù)進(jìn)行血常規(guī)檢測時，切忌選擇EDTA進(jìn)行抗凝處理。目前，細(xì)胞形態(tài)學(xué)鏡檢是檢驗細(xì)胞形態(tài)的重要指標(biāo)。

總之，在檢驗的日常工作中，遇到血小板減少時，尤其是與臨床癥狀和診斷不符時，應(yīng)該想到可能是血小板假性減少，可通過重新采血、血涂片染色鏡檢、末梢指血顯微鏡下手工血小板計數(shù)，改用枸櫞酸鈉或氟化鈉抗凝劑，37℃水浴，標(biāo)本放置時間延長等進(jìn)行復(fù)檢，來避免以上干擾因素所造成的假性血小板減少。血細(xì)胞分析儀計數(shù)血小板時，當(dāng)直方圖、散點圖有異常或有報警提示時，一定要分析原因，同時做血涂片鏡檢，必要時手工血小板計數(shù)進(jìn)行確認(rèn)，以保證檢驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，準(zhǔn)確的報告單不僅為臨床提供可靠的診斷依據(jù)，還可減少患者不必要的精神負(fù)擔(dān)和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。

參考文獻(xiàn)

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胡冰紅. 假性血小板減少的原因分析及對策探討[J]. 實用檢驗醫(yī)師雜志，2018，10（1）：50-52.

王 洋，王 歡，徐 蘭. 腫瘤患者EDTA依賴性血小板假性減少檢測方法的分析[J]. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2019，27（19）：3508-3510.