陳虹 高單 劉軍

【摘要】目的 探究慢性化膿性中耳炎病原菌分布情況及耐藥性。方法 480例慢性化膿性中耳炎患者， 采集患者膿性分泌物， 給予細(xì)菌培養(yǎng)， 對病原菌進(jìn)行分離。統(tǒng)計(jì)分析病原菌分布、革蘭陰性桿菌耐藥、革蘭陽性球菌耐藥情況。結(jié)果 480例患者共分離出455株病原菌， 包括革蘭陰性桿菌、革蘭陽性球菌、酵母菌、曲霉菌。其中以銅綠假單胞菌為主， 占比為27.47%（125/455）;肺炎克雷伯菌96株， 占比為21.10%（96/455）;金黃色葡萄球菌68株， 占比為14.95%;肺炎鏈球菌50株， 占比為10.99%。革蘭陰性桿菌中銅綠假單胞菌對替卡西林/克拉維酸耐藥率最高， 達(dá)到40.8%， 其次為氨曲南， 耐藥率為39.2%;肺炎克雷伯菌對復(fù)方新諾明耐藥率為27.1%。革蘭陽性球菌中肺炎鏈球菌對紅霉素耐藥率最高， 為82.0%， 其次為克林霉素， 為52.0%;金黃色葡萄球菌對紅霉素耐藥率為91.2%， 對青霉素G耐藥率為72.1%。結(jié)論 慢性化膿性中耳炎病原菌以銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌以及金黃色葡萄球菌等為主， 在臨床用藥時(shí)應(yīng)結(jié)合藥物敏感試驗(yàn)， 合理應(yīng)用抗生素， 減少耐藥菌株的發(fā)生， 提升臨床治療效果。

【關(guān)鍵詞】 慢性化膿性中耳炎;病原菌;耐藥性;銅綠假單胞菌;肺炎鏈球菌;金黃色葡萄球菌

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.24.090

作為臨床上常見的耳鼻喉科疾病， 慢性化膿性中耳炎主要指的是發(fā)生于中耳黏膜、骨膜或骨質(zhì)深處的化膿性炎癥， 在嬰幼兒中有著較高的發(fā)病率， 成人發(fā)病率僅為2%～5%[1]， 患者表現(xiàn)為， 該疾病會破壞患者中耳生理學(xué)功能及解剖結(jié)構(gòu)， 對患者聽力功能、交流功能產(chǎn)生一定的影響， 病程長、易反復(fù)感染， 存在顱內(nèi)外并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)[2]， 為臨床治療增加的一定的難度。隨著現(xiàn)代醫(yī)療衛(wèi)生技術(shù)的不斷發(fā)展， 抗菌藥物在慢性化膿性中耳炎治療中得以應(yīng)用， 慢性化膿性中耳炎發(fā)病率有所下降， 然而基于致病菌的復(fù)雜性與多變性， 再加上臨床抗菌藥物的濫用， 耐藥菌株不斷增多[3]， 這也在一定程度上降低了臨床治療效果， 因此加強(qiáng)細(xì)菌培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)尤為重要。此次研究收集慢性化膿性中耳炎病例480例， 均為2018年12月～2019年12月本院收治患者， 對分泌物病原菌分布情況進(jìn)行分析， 并進(jìn)行耐藥性試驗(yàn)， 旨在為臨床抗菌藥物的合理應(yīng)用提供參考， 現(xiàn)對研究結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2018年12月～2019年12月本院收治的480例慢性化膿性中耳炎患者進(jìn)行分析， 其中男266例， 女214例;年齡19～67歲， 平均年齡（36.38±10.21）歲;病程1～14年， 平均病程（7.48±2.18）年。

1. 2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者經(jīng)診斷及檢查均確診為慢性化膿性中耳炎[4];②患者臨床資料及病史、檢查記錄等資料完善， 檢查前均告知患者， 患者已了解且同意加入研究， 簽訂知情同意書， 符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)要求。排除標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)診斷合并心肝腎疾病或嚴(yán)重器質(zhì)性病變患者;②神志不清或精神障礙患者;③合并其他類型耳科疾病患者;④近期接受過影響觀察指標(biāo)的相關(guān)治療;⑤合并結(jié)核性中耳炎、急性化膿性中耳炎以及耳道膽脂瘤患者;⑥存在其他免疫性疾病患者;⑦合并其他急性、慢性感染性疾病患者;⑧妊娠期及哺乳期婦女[5-7]。

1. 3 方法

1. 3. 1 試劑與儀器 檢測耳道分泌物病原菌類型：耳道分泌物接種血平板、麥康凱平板、沙氏平板、巧克力平板， 24 h恒溫培養(yǎng)。檢測儀器：梅里埃VITEK-2[梅里埃診斷產(chǎn)品（上海）有限公司]。所用板卡類型：革蘭陰性桿菌鑒定板卡GN、腸桿菌科藥敏板卡GN334、非發(fā)酵菌板卡GN335、陽性球菌鑒定板卡GP、陽性球菌中葡萄球菌藥敏板卡GP639、酵母菌檢測板卡YST， 藥敏紙片購自法國生物梅里埃股份有限公司：如美羅培南紙片、環(huán)丙沙星紙片、紅霉素紙片等。

1. 3. 2 標(biāo)本采集 患者確診后24 h， 將消毒棉拭子浸潤無菌生理鹽水， 在患者鼓室內(nèi)或患側(cè)外耳道深部采集膿性分泌物， 放置于無菌試管中， 盡快送檢。

1. 3. 3 菌株鑒定與藥敏試驗(yàn) 首先對患者外耳道皮膚予以75%酒精消毒處理， 然后嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》采用無菌試管內(nèi)卷棉子對分泌物進(jìn)行采集， 將采集標(biāo)本接種于血平板、麥康凱平板、沙氏平板、巧克力平板。血平板、麥康凱平板培養(yǎng)溫度為35℃， 培養(yǎng)時(shí)間為18～24 h。沙氏平板培養(yǎng)溫度為28℃， 培養(yǎng)時(shí)間為24～48 h。巧克力平板培養(yǎng)溫度為35℃， 培養(yǎng)時(shí)間為18～24 h， 培養(yǎng)環(huán)境需要5%～10% CO2。根據(jù)培養(yǎng)情況對菌種進(jìn)行分離鑒定及藥敏試驗(yàn)。采用全自動細(xì)菌及藥敏鑒定儀VITEK-2對菌種進(jìn)行鑒定及藥敏試驗(yàn)， 部分抗生素敏感試驗(yàn)采用的是K-B紙片法。連續(xù)3 d采集入選患者耳道膿性分泌物標(biāo)本， 2 h內(nèi)實(shí)施細(xì)菌培養(yǎng)， 并對培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行篩選。結(jié)果判定依據(jù)的是美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會制定的判定標(biāo)準(zhǔn)。

1. 4 觀察指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)分析病原菌分布、革蘭陰性桿菌耐藥、革蘭陽性球菌耐藥情況[8-10]。

2 結(jié)果

2. 1 患者病原菌分布情況分析 480例患者共分離出455株病原菌， 包括革蘭陰性桿菌、革蘭陽性球菌、酵母菌、曲霉菌。其中以銅綠假單胞菌為主， 占比為27.47%（125/455）;肺炎克雷伯菌96株， 占比為21.10%（96/455）;金黃色葡萄球菌68株， 占比為14.95%;肺炎鏈球菌50株， 占比為10.99%。見表1。

2. 2 革蘭陰性桿菌耐藥情況分析 革蘭陰性桿菌中銅綠假單胞菌對替卡西林/克拉維酸耐藥率最高， 達(dá)到40.8%， 其次為氨曲南， 耐藥率為39.2%;肺炎克雷伯菌對復(fù)方新諾明耐藥率為27.1%。見表2。

2. 3 革蘭陽性球菌耐藥情況分析? 肺炎鏈球菌對紅霉素耐藥率最高， 為82.0%， 其次為克林霉素， 為52.0%;金黃色葡萄球菌對紅霉素耐藥率為91.2%， 對青霉素G耐藥率為72.1%。見表3。

3 討論

慢性化膿性中耳炎是耳科常見的感染性疾病， 病程長、易反復(fù)感染， 隨著近年來抗生素的廣泛應(yīng)用， 慢性化膿性中耳炎發(fā)病率有所下降， 但耐藥菌株卻呈現(xiàn)增加趨勢， 患者易出現(xiàn)菌群失調(diào)， 因此對分泌物給予細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)尤為重要[11]。

以往學(xué)者在研究中對慢性化膿性中耳炎患者致病菌進(jìn)行分析， 結(jié)果顯示銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌是最為常見的兩種致病菌[12]。此次研究480例患者共分離出病原菌455株， 其中主要以銅綠假單胞菌為主， 占比為27.47%（125/455）;肺炎克雷伯菌為96株， 占比為21.10%（96/455）;金黃色葡萄球菌為68株， 占比為14.95%;肺炎鏈球菌為50株， 占比為10.99%。與以往學(xué)者研究結(jié)果一致。文獻(xiàn)報(bào)道， 近年來慢性化膿性中耳炎致病菌呈現(xiàn)出2種不同發(fā)展趨勢：①耳真菌檢出率增加;②強(qiáng)致病菌檢出率下降[13]。有學(xué)者認(rèn)為慢性化膿性中耳炎患者鼓室腔及外耳道深部溫度適宜， 為真菌生長創(chuàng)造了條件[14]。受時(shí)期、地區(qū)等因素的影響， 不同耐藥菌其對抗菌藥物耐藥性也有所不同， 但整體上呈現(xiàn)出增長趨勢， 這也在一定程度上對臨床抗菌藥物應(yīng)用提出了更嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。世界衛(wèi)生組織發(fā)布報(bào)告指出， 抗菌藥物的耐藥性已對人類健康造成嚴(yán)重威脅。目前， 防止抗菌藥濫用， 減少細(xì)菌耐藥的產(chǎn)生， 幫助公眾樹立科學(xué)用藥、合理用藥觀念非常必要[15]。我國針對抗菌藥物的臨床應(yīng)用有著明確的規(guī)定， 針對普通藥物能夠治療的疾病不得擅自使用抗菌藥物。若隨意使用抗生素不僅會導(dǎo)致耐藥性的發(fā)生， 而且會產(chǎn)生嚴(yán)重不良反應(yīng)、中毒等。隨著抗生素藥物在臨床的廣泛應(yīng)用， 抗生素不合理應(yīng)用現(xiàn)象泛濫， 不僅會引起病原菌譜變化， 而且會增加臨床耐藥性。金黃色葡萄球菌耐藥性考慮與基因mecA編碼的青霉素蛋白結(jié)合產(chǎn)生有關(guān)， 另外質(zhì)粒介導(dǎo)的β-內(nèi)酰胺酶與靶位青霉素結(jié)合產(chǎn)生蛋白變化也是金黃色葡萄球菌耐藥的主要機(jī)制。研究結(jié)果中金黃色葡萄球菌對紅霉素耐藥率為91.2%， 對青霉素G耐藥率為72.1%， 提示應(yīng)結(jié)合患者病原菌類型給予相應(yīng)抗菌藥物治療。

綜上所述， 慢性化膿性中耳炎病原菌類型主要包括銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌以及金黃色葡萄球菌等， 應(yīng)加強(qiáng)對病原菌檢測及耐藥性試驗(yàn)， 以為臨床抗菌藥物選擇提供可靠的參考依據(jù)， 發(fā)揮藥物作用， 減少耐藥的發(fā)生。

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[收稿日期：2020-03-30]