李俊良，張 彬，張彩霞，彭 珍，白 楊，巴特爾

(內(nèi)蒙古伊利實(shí)業(yè)集團(tuán)股份有限公司，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010000)

硒是維持機(jī)體健康的重要微量元素，具有增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力、提高機(jī)體免疫力等生物學(xué)功能[1]。傳統(tǒng)有機(jī)硒以蛋氨酸硒(SeMet)為主，2007年日本科學(xué)家從日本辣蘿卜中首次發(fā)現(xiàn)一種新型有機(jī)硒——高羊毛氨酸硒(SeHLan)[2]。SeMet除參與硒蛋白質(zhì)合成外，還有一部分被當(dāng)作蛋氨酸參與正常的蛋白質(zhì)代謝；而SeHLan主要被用于硒蛋白質(zhì)的合成，因此SeHLan作為硒源的生物利用率要優(yōu)于SeMet[3]。為驗(yàn)證該新型有機(jī)硒產(chǎn)品在奶牛生產(chǎn)上的大群應(yīng)用效果，課題組擬在2座規(guī)模化牧場(chǎng)開展試驗(yàn)，研究高羊毛氨酸硒在改善牛奶體細(xì)胞、提高繁殖性能方面的應(yīng)用效果。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)?zāi)翀?chǎng)與原料

試驗(yàn)選擇在2座規(guī)?；翀?chǎng)開展，選擇全群泌乳牛作為試驗(yàn)對(duì)象，共計(jì)742頭。A牧場(chǎng)泌乳牛存欄525頭，B牧場(chǎng)泌乳牛存欄217頭。高羊毛氨酸硒購(gòu)自英聯(lián)貿(mào)易有限公司，由澳大利亞BPA私人有限公司生產(chǎn)。該產(chǎn)品中總硒含量大于4 000 mg/kg，其中有機(jī)硒含量大于等于98%。

1.2 試驗(yàn)時(shí)間與飼養(yǎng)管理

2019-03-30—07-01，共計(jì)3個(gè)月。試驗(yàn)牛只均為荷斯坦奶牛，散欄臥床式飼養(yǎng)，并列擠奶，每天3次。每天TMR飼喂3次，自由飲水。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

每頭牛每天飼喂高羊毛氨酸硒2 g，日糧硒含量0.4 mg/kg。每座牧場(chǎng)，在添加高羊毛氨酸硒前1個(gè)月，添加高羊毛氨酸硒后第1、2、3個(gè)月采集大缸奶樣，測(cè)定乳硒含量；添加高羊毛氨酸硒前1個(gè)月，添加高羊毛氨酸硒后第3個(gè)月采集血樣，檢測(cè)血硒及抗氧化指標(biāo)；添加高羊毛氨酸硒前1個(gè)月，添加高羊毛氨酸硒后3個(gè)月，每天跟蹤牧場(chǎng)大缸牛奶體細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果；添加高羊毛氨酸硒前3個(gè)月，添加高羊毛氨酸硒后3個(gè)月及上一年同期3個(gè)月，跟蹤牧場(chǎng)牛群繁殖指標(biāo)。試驗(yàn)期每頭牛添加高羊毛氨酸硒2 g/頭d，通過(guò)比較試驗(yàn)前后大群血硒、體細(xì)胞及繁殖指標(biāo)變化情況，分析大群應(yīng)用效果。

1.4 樣品采集與檢測(cè)

1.4.1體細(xì)胞

A牧場(chǎng)試驗(yàn)前1個(gè)月內(nèi)共采集大缸綜合奶樣7次，試驗(yàn)期3個(gè)月內(nèi)共采集大缸綜合奶樣10次；B牧場(chǎng)試驗(yàn)前一個(gè)月內(nèi)共采集大缸綜合奶樣27次，試驗(yàn)期3個(gè)月內(nèi)共采集大缸綜合奶樣90次。采用細(xì)胞分析儀Fossmatic 5000，丹麥FOSS公司,測(cè)定乳中體細(xì)胞數(shù)(SCC)。

1.4.2血清樣品

每座牧場(chǎng)選擇15頭奶牛，在試驗(yàn)前1個(gè)月及試驗(yàn)期第3個(gè)月采集血樣。晨飼前，尾靜脈采集5 ml血樣于涂有肝素鈉的真空管中，然后使用離心機(jī)3 000 g離心10 min得到血漿，-20℃保存。使用試劑盒測(cè)定血清中丙二醛(MDA)及總抗氧化能力(T-AOC)含量，利用原子熒光法測(cè)定血硒含量。

1.4.3牛奶樣品

A、B兩座牧場(chǎng)，在試驗(yàn)前2019-03-19采集1次大缸綜合奶樣；試驗(yàn)期2019-04-14、2019-05-18、2019-06-11分別采集1次大缸綜合奶樣。

1.4.4繁殖性能

在A牧場(chǎng)，統(tǒng)計(jì)2019-04—06，2018-04—06及2019-01—03月份繁殖指標(biāo)數(shù)據(jù)(包括發(fā)情揭發(fā)率、情期受胎率、21 d妊娠率)，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行同比與環(huán)比分析，判斷高羊毛氨酸硒對(duì)改善繁殖的效果。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2003軟件進(jìn)行整理，使用SPSS 20.0的GLM程序?qū)w細(xì)胞、血硒、丙二醛、總抗氧化能力進(jìn)行單因素方差分析，得出試驗(yàn)前后均值、標(biāo)準(zhǔn)誤差與P值，其中P<0.05為顯著差異，0.05≤P<0.10為存在差異趨勢(shì)。

2 結(jié)果與分析

2.1 牛奶體細(xì)胞

由表1可知，飼喂高羊毛氨酸硒后，A牧場(chǎng)大群牛奶體細(xì)胞含量由試驗(yàn)前22.94萬(wàn)個(gè)/ml下降至19.42萬(wàn)個(gè)/ml，降幅15.3%(P<0.05)；B牧場(chǎng)大群牛奶體細(xì)胞含量由試驗(yàn)前22.95萬(wàn)個(gè)/ml下降至20.24萬(wàn)個(gè)/ml，降幅11.82%(P<0.05)。Weiss等在9個(gè)規(guī)?；翀?chǎng)連續(xù)1年的跟蹤研究表明，隨著日糧血硒濃度增加，大缸體細(xì)胞含量顯著下降[4]。賈大慶等根據(jù)血硒濃度，將牛群分為低硒組(0～0.05 mg/L)、對(duì)照組1(0.05～0.06 mg/L)、對(duì)照組2(0.06～0.07 mg/L)，對(duì)照組3(0.07～0.08 mg/L)，結(jié)果表明，奶牛血清中硒水平與牛奶體細(xì)胞含量呈低度負(fù)相關(guān)[5]。呂遠(yuǎn)蓉等，在奶牛基礎(chǔ)日糧中添加0.5 g/kg酵母硒，結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組牛奶體細(xì)胞下降12.02% (25.38萬(wàn)個(gè)/ml 與 28.85萬(wàn)個(gè)/ml)[6]。本試驗(yàn)結(jié)果與上述研究結(jié)論相近。

表1 飼喂高羊毛氨酸硒前后大缸牛奶體細(xì)胞變化情況 萬(wàn)個(gè)/ml

2.2 血硒及抗氧化指標(biāo)

由表2可知，飼喂高羊毛氨酸硒后，A牧場(chǎng)血硒(Se)含量由試驗(yàn)前的68.99 μg/ml上升至試驗(yàn)后的73.76 μg/L(P<0.05)，升高6.91%；總抗氧化能力(T-AOC)由試驗(yàn)前1.49 U/ml上升至試驗(yàn)后1.97 U/ml(P<0.05)，升高32.21%；丙二醛(MDA)由試驗(yàn)前2.98 nmol/ml下降至試驗(yàn)后的2.05 nmol/ml(P<0.05)，降幅31.21%；B牧場(chǎng)血硒(Se)含量由試驗(yàn)前的67.59 μg/L上升至試驗(yàn)后的87.19 μg/L(P<0.05)，升高28.99%；總抗氧化能力(T-AOC)試驗(yàn)前后差異不顯著(P>0.05)；丙二醛(MDA)含量由試驗(yàn)前2.06 nmol/ml下降至試驗(yàn)后的1.33 nmol/ml(P<0.05)，降幅35.44%。孫玲玲等研究結(jié)果顯示，與空白對(duì)照組相比，飼喂酵母硒0.5 mg/kg后，試驗(yàn)組血清硒含量提高26.32%(112.15 μg/L與 88.78 μg/L)，總抗氧化能力提高29.05%(1.91 U/ml 與 1.48 U/ml)，丙二醛含量下降8.06%(4.79 nmol/ml與 5.21 nmol/ml)[7]。王建等在日糧添加酵母硒0.3 mg/kg飼喂泌乳中期奶牛，結(jié)果表明，試驗(yàn)組總抗氧化能力提高26.97%(2.26 U/ml與 1.78 U/ml)，丙二醛含量下降19.26%(5.49 nmol/ml 與 6.80 nmol/ml)[8]。本試驗(yàn)結(jié)果與上述研究結(jié)論相近，但由于試驗(yàn)牛群及飼養(yǎng)管理不同等原因，降幅大小存在差異。

表2 飼喂高羊毛氨酸硒前后血清硒及抗氧化指標(biāo)變化情況

2.3 繁殖性能指標(biāo)

由表3可知，A牧場(chǎng)飼喂高羊毛氨酸硒后，發(fā)情揭發(fā)率環(huán)比下降0.06個(gè)百分點(diǎn)，同比上升4.56個(gè)百分點(diǎn)；情期受胎率環(huán)比上升2.24個(gè)百分點(diǎn)，同比上升1.16個(gè)百分點(diǎn)；21 d妊娠率環(huán)比上升1.43個(gè)百分點(diǎn)，同比上升2.44個(gè)百分點(diǎn)。謝志東等報(bào)道，飼喂亞硒酸鈉和VE的試驗(yàn)牛與對(duì)照組相比，其情期受胎率和總受胎率分別提高18%和8%[10]。王傳蓉報(bào)道，飼喂硒和VE后，發(fā)情當(dāng)天，試驗(yàn)組奶牛血清中雌二醇和促卵泡素的含量顯著高于對(duì)照組，試驗(yàn)組奶牛和對(duì)照組奶牛的第一情期受胎率分別為85%和65%，比對(duì)照組升高了30.77%[11]。

表3 飼喂高羊毛氨酸硒前后繁殖性能指標(biāo)變化情況

3 小結(jié)

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，連續(xù)3個(gè)月每頭荷斯坦秘乳奶牛每天飼喂高羊毛氨酸硒2 g后，牛奶體細(xì)胞下降10%～15%；血硒上升7%～29%、丙二醛含量下降31%～35%；情期受胎率、21 d妊娠率均提高1～2個(gè)百分點(diǎn)。結(jié)果表明，高羊毛氨酸硒對(duì)降低牛奶體細(xì)胞、提高機(jī)體抗氧化能力、改善繁殖性能具有積極作用。