丁 輝，朱仁愿，邱國玉，李 巖，姬良亮，劉興國

（蘭州市食品藥品檢驗(yàn)所，甘肅 蘭州 730050）

二益丸是國家中藥保護(hù)品種，其處方砂仁等22味中藥加工制成；具調(diào)經(jīng)止帶，溫暖子宮之效；臨床用于經(jīng)脈不調(diào)，行經(jīng)腹痛，淤血癆癥，下元虛寒，腰膝酸痛，赤白帶下。二益丸收載于衛(wèi)生部標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第一冊，質(zhì)量控制內(nèi)容僅包括制劑通則、性狀檢查、顯微鑒別和丁香酚的薄層鑒別，無法充分保證制劑的安全有效。本研究根據(jù)《中國藥典》《中藥新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究的技術(shù)要求》等文件要求，對(duì)二益丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行提高研究，旨在為二益丸建立簡便可控的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，確保藥品的安全有效，為企業(yè)制定制劑質(zhì)量的內(nèi)部控制標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)為上升國家標(biāo)準(zhǔn)提供參考。

砂仁屬名貴中藥材，《中國藥典》2015年版[1]中通過測定乙酸龍腦酯的含量對(duì)其質(zhì)量進(jìn)行控制。二益丸處方中亦有砂仁，本研究采用氣相色譜法，通過大量實(shí)驗(yàn)摸索，確定了乙酸龍腦酯鑒別方法，保證了二益丸的質(zhì)量。

1 儀器及試藥

日本島津GC-2010plus型氣相色譜儀；德國賽多利斯BSA224S-CW型萬分之一電子分析天平，瑞士梅特勒MS105DU型十萬分之一電子分析天平；寧波新芝生物科技SBL-10DT型超聲清洗儀（功率300W，頻率 50kHz）。

乙酸龍腦酯對(duì)照品（110759-201105，純度：99.6%），購自中國食品藥品檢定研究院；無水乙醇為分析純。二益丸：規(guī)格為4g/丸；生產(chǎn)廠家為蘭州佛慈制藥股份有限公司；批號(hào)分別為17H5、17H6、17H7、17H8、18A1、18A2、18A3、18A4、18A5、18F9。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：安捷倫DB-1毛細(xì)管柱（柱長為30m，內(nèi)徑為0.25mm，膜厚度為0.25μm）；載氣和尾吹氣均為氮?dú)猓簧V柱流量：3.00mL·min-1；柱溫為程序升溫（見表 1）；進(jìn)樣口溫度 230℃，檢測器（FID）溫度250℃，氫氣和尾吹氣流量：40mL·min-1，空氣流量：400mL·min-1；不分流模式；進(jìn)樣量：1μL；理論塔板數(shù)按乙酸龍腦酯峰計(jì)不低于10000，分離度大于1.5。

表1 程序升溫模式

2.2 溶液的制備

2.2.1 對(duì)照品溶液

稱取乙酸龍腦酯對(duì)照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每lmL含0.3mg的溶液。

2.2.2 供試品溶液

取二益丸供試品，剪碎，混勻，取約2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入無水乙醇20mL，密塞，超聲處理30min，放冷，搖勻，濾過，取續(xù)濾液既得。

2.2.3 陰性對(duì)照溶液

按處方量配制缺砂仁藥材的陰性對(duì)照樣品，按2.2.2項(xiàng)下方法制備陰性對(duì)照溶液。

2.2.4 全藥材對(duì)照溶液

按處方量稱取22味藥材粉末配制全藥材對(duì)照樣品，按2.2.2項(xiàng)下方法制備全藥材對(duì)照溶液。

2.2.5 砂仁（鹽炙）對(duì)照藥材溶液

稱取砂仁（鹽炙）藥材0.1g，按2.2.2項(xiàng)下方法制備砂仁（鹽炙）對(duì)照藥材溶液。

2.2.6 空白溶液

取無水乙醇按2.2.2項(xiàng)下方法制備空白溶液。

2.3 溶液測定

取“2.2”項(xiàng)下制備的對(duì)照品溶液、全藥材對(duì)照溶液、砂仁（鹽炙）對(duì)照藥材溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照溶液和空白溶液按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測定，測定結(jié)果如圖1所示。

圖1 各溶液GC色譜圖

2.4 樣品測定

取10批次二益丸供試品按照“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，并按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測定，測定結(jié)果如圖2所示。

圖2 供試品溶液GC色譜圖

3 討論

二益丸處方包含22味中藥材，其中砂仁屬于較為名貴的中藥材，但是現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)較為簡單，沒有針對(duì)砂仁的相關(guān)控制項(xiàng)目，無法有效保障藥品質(zhì)量。本研究采用氣相色譜法對(duì)處方中砂仁的指標(biāo)性成分乙酸龍腦酯進(jìn)行定性鑒別，處理方法操作簡單，結(jié)果可靠，適于二益丸的質(zhì)量控制。

二益丸因處方中藥味較多，化學(xué)組分復(fù)雜，采用GC方法對(duì)砂仁中乙酸龍腦酯進(jìn)行定性鑒別時(shí)，考慮到分離度因素，故柱溫采用程序升溫模式。通過大量實(shí)驗(yàn)，不斷優(yōu)化，最終確定為：初始溫度50℃，保留5min，然后以2℃每min的速率升溫至130℃，保留5min；在該色譜條件下，基線平穩(wěn)，各組分分離度較好。

測定結(jié)果顯示，對(duì)照品溶液、全藥材對(duì)照溶液、砂仁（鹽炙）對(duì)照藥材溶液和供試品溶液中，在28.330min位置處均有相應(yīng)的色譜峰，即乙酸龍腦酯色譜峰；而陰性對(duì)照溶液和空白溶液在該位置無色譜峰，表明該方法結(jié)果準(zhǔn)確。