劉慧娟
摘 要 氟喹諾酮藥物作為廣譜殺菌藥物,價錢便宜,被廣泛應用于牲畜治療疾病上,存在殘留于豬肉中的可能性?;诖?,采用高效液相色譜法對河北省滄州市孟村回族自治縣30處豬肉樣品中4種氟喹諾酮類藥物的含量進行檢測。結(jié)果表明,當?shù)刎i肉中的環(huán)丙沙星、達氟沙星、恩諾沙星、沙拉沙星都沒有超出國家標準。但是長期以往,人們長期食用此類豬肉,其后果讓人擔憂。
關鍵詞 高效液相色譜;豬肉;氟喹諾酮
中圖分類號:S859 文獻標志碼:B DOI:10.19415/j.cnki.1673-890x.2020.02.075
氟喹諾酮是一類化學合成抗菌藥物,1962年合成第一代喹諾酮類藥物,只對大腸桿菌、痢疾桿菌、克雷白桿菌等少數(shù)菌有效,吸收效果差,副作用多,僅用于治療尿路感染。1974年合成第二代喹諾酮類藥物,對革蘭氏陰性桿菌致病菌的作用明顯,抗菌活性也大大提高,口服少量吸收,不良反應也明顯減少,用于治療尿路和腸道感染等疾病。1979年合成第三代喹諾酮類藥,其母體都含有喹諾酮結(jié)構(gòu),母核6位C上被氟取代,氟喹諾酮因此而得名[1]。第三代藥物結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變,增加了脂溶性,增強了對組織細胞的穿透力,因而吸收好,大大增加了該類藥物的抗菌譜和殺菌效果。隨著構(gòu)效關系的研究進一步展開,新的氟喹諾酮類藥物如雨后春筍,成為一個十分活躍的研究領域[2]。自1979年合成第三代喹諾酮(即諾氟沙星)以來,經(jīng)過40年的發(fā)展,氟喹諾酮已成為在臨床上應用廣泛的廣譜、高效、低毒抗菌藥,常用于細菌性感染疾病,如呼吸道感染、消化道感染、泌尿系統(tǒng)感染等疾病的治療[3]。
喹諾酮類抗生素也廣泛用于治療牲畜疾病。喹諾酮類藥物具有抗菌譜廣、抗菌活性強、與其他抗菌藥物無交叉耐藥性以及毒副作用小等特點,被廣泛應用于水產(chǎn)、畜牧等養(yǎng)殖業(yè)中,包括在牛、雞、鴨、豬等的養(yǎng)殖中用于疾病防治[4]。恩諾沙星是喹諾酮類抗生素的一種,對于預防和治療畜禽的細菌性感染及支原體病有良好的效果,在豬病防治中,對包括大腸桿菌、克雷伯氏菌、腸桿菌屬、彎曲桿菌屬、綠膿桿菌、沙門氏菌屬、氣單胞菌屬、嗜血桿菌屬、耶爾森菌屬、沙雷氏菌屬、弧菌屬、變形桿菌屬等在內(nèi)的革蘭氏陰性桿菌和球菌,對布魯氏菌屬、巴斯德氏菌屬、丹毒絲菌、博德特氏菌、葡萄球菌、支原體屬和衣原體也有效[5-7]。近年來,氟喹諾酮類藥物被養(yǎng)殖戶廣泛使用,作為飼料添加劑來預防動物疾病的發(fā)生,隨之新的問題出現(xiàn)了,過度使用該類藥物,致使動物體內(nèi)該藥物的殘留量積累的越來越多。當前,世界各國對動物體內(nèi)的氟喹諾酮殘留的研究都很重視,如果我國不加以關注,會導致人們的健康存在巨大隱患,使得細菌的耐藥性逐漸增加[8]。我國規(guī)定,動物性食品中環(huán)丙沙星、達氟沙星、恩諾沙星和沙拉沙星的檢出限為20 μg·kg-1。為探究豬肉中4種氟喹諾酮類藥物含量,本次采用高效液相色譜法對河北省滄州市孟村回族自治縣30處豬肉樣品中4種氟喹諾酮類藥物的含量進行檢測。
1 材料與方法
1.1 儀器設備與試劑
1.1.1 儀器設備
島津系列高效液相色譜儀LC-20A;高速離心機(50 mL離心管);固體萃取柱C18(100 mg·mL-1);
0.45 μm微孔濾膜。
1.1.2 標準品和試劑
環(huán)丙沙星、達氟沙星、恩諾沙星、沙拉沙星等標準品購于農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護科研檢測所測試中心;三乙胺、磷酸、磷酸二氫鉀為優(yōu)級純;甲醇、乙腈均為色譜純(Fisher公司)試劑;水為娃哈哈水。
1.2 色譜條件
色譜柱:phenomenexluna C18(4.6 mm×250 mm,
5 μm)。流動相:0.05 mol·L-1磷酸/三乙胺(pH=2.4)-乙腈(體積比82∶18)。流速:1.0 mL·min-1。檢測波長:Ex=280 nm,Em=450 nm。進樣量:20 μL;采用外標法峰面積定量。
1.3 標準溶液的配置
分別把環(huán)丙沙星、達氟沙星、恩諾沙星和沙拉沙星標準品1 000 μg·mL-1,用流動相稀釋,達氟沙星稀釋成20 μg·mL-1,其他三項稀釋成100 μg·mL-1。分別取環(huán)丙沙星、達氟沙星、恩諾沙星和沙拉沙星單品稀釋液
10 μL,流動相960 μL,制成含有環(huán)丙沙星、達氟沙星、恩諾沙星和沙拉沙星的混合標準工作液。
1.4 樣品前處理
1.4.1 提取
稱取2.00 g試料于離心管中,加磷酸鹽提取液
10.0 mL,渦旋1 min(渦旋時間可以長一些),振蕩
10 min,每分鐘10 000 r離心10 min,上清液轉(zhuǎn)入另一離心管中。用磷酸鹽提取液10.0 mL洗殘渣,渦旋1 min,振蕩10 min,每分鐘10 000 r離心10 min,合并上清液于同一離心管中,備用。
1.4.2 凈化
備用液過固相萃取柱后,柱子依次用甲醇2.0 mL、磷酸鹽緩沖液2.0 mL預洗,取上清液5.0 mL過柱,水
2.0 mL淋洗,擠干,進行吸附,后用1.0 mL流動相洗脫,擠干,收集洗脫液,過膜上機測定。
2 結(jié)果與分析
對孟村縣30處豬肉樣品中4種氟喹諾酮類藥物的含量進行檢測,結(jié)果見表1。
可以看出,孟村縣6個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的豬肉樣品中都含有這4類氟喹諾酮藥物,環(huán)丙沙星的平均值為8.654 μg·kg-1,達氟沙星的平均值為2.001 μg·kg-1,恩諾沙星的平均值為5.785 μg·kg-1,沙拉沙星的平均值為6.814 μg·kg-1。
3 結(jié)論與討論
河北省滄州市孟村回族自治縣30處采集點的豬肉,經(jīng)檢測均合格,其環(huán)丙沙星、達氟沙星、恩諾沙星、沙拉沙星含量數(shù)值都低于國標20 μg·kg-1。
但是,居民長期使用這種含有氟喹諾酮藥物的食品,會不會對身體有害,會不會增加身體的耐藥性,當身體出現(xiàn)疾病的時候,再使用此類藥物會不會影響到實際藥物的治療效果等都有待研究,希望有關人士關注,加強對相關藥物的研究,找到合適的解決方法。
參考文獻:
[1] 劉榮立,韓寧娟,李亮.氟喹諾酮藥物殘留的檢測方法研究進展[J].現(xiàn)代交際,2017(9):188-189.
[2] 戴自英.實用抗菌藥物學(第一版)[M].上海:科學技術出版社,1992.
[3] 黃迪海,張華,傅蓄,等.獸用氟喹諾酮藥物長效制劑的研究與應用進展[J].山東農(nóng)業(yè)科學,2012,44(2):104-107,111.
[4] 張家禾,孟婷,周作紅,等.動物性食品中氟喹諾酮類藥物殘留檢測方法的研究進展[J]中國畜牧獸醫(yī),2014,41(5):262-266.
[5] 李家泰.臨床藥理學(第一版)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1991.
[6] 范勇,楊國勤.南京地區(qū)1996年度喹諾酮類藥物用藥分析[J].中國藥房,1997(6):268-269.
[7] 陳華庭,張玉,陳偉,等.武漢地區(qū)1995年度喹諾酮類藥物評估[J].中國藥房,1997(3):116-117.
[8] 王蕊,廖小萍,劉雅紅.氟喹諾酮類獸藥殘留檢測方法研究進展[J].廣東農(nóng)業(yè)科學,2010,37(10):41-43.
(責任編輯:劉昀)