武艷霞

(鄭州市第六人民醫(yī)院，河南 鄭州 450061)

肺癌是最常見的肺部原發(fā)惡性腫瘤，發(fā)病率和死亡率均居我國惡性腫瘤的首位[1-3]，肺結(jié)核是由結(jié)核分枝桿菌引起的慢性傳染病，我國是肺結(jié)核高負(fù)擔(dān)國家，發(fā)病率居全球第2位[4-5]，2種疾病均嚴(yán)重危害著我國居民健康。肺癌和肺結(jié)核均在肺部發(fā)病，臨床癥狀和影像學(xué)表現(xiàn)均相似，臨床中容易出現(xiàn)誤診情況。肺結(jié)核診斷的黃金標(biāo)準(zhǔn)是病原學(xué)陽性，但由于技術(shù)手段和標(biāo)本質(zhì)量的問題，導(dǎo)致病原學(xué)陽性檢出率過低，不利于早期診斷。近幾年，一種新的結(jié)核病感染檢測方法γ-干擾素釋放試驗(yàn)逐漸應(yīng)用于臨床，成為結(jié)核病診斷的重要輔助手段。γ-干擾素釋放試驗(yàn)根據(jù)原理不同分為結(jié)核感染T淋巴細(xì)胞酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)和全血γ-干擾素釋放試驗(yàn)，前者是通過計(jì)數(shù)產(chǎn)生免疫應(yīng)答的T淋巴細(xì)胞來進(jìn)行定量分析，后者是通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測全血中γ-干擾素的釋放水平。全血γ-干擾素釋放試驗(yàn)在結(jié)核分枝桿菌潛伏感染方面敏感性和特異性較高，在國內(nèi)外已被廣泛報(bào)道[6-8]。本研究利用全血γ-干擾素釋放試驗(yàn)對(duì)肺癌、肺結(jié)核和健康體檢者進(jìn)行分析，探討該方法在肺癌和肺結(jié)核鑒別診斷中的應(yīng)用價(jià)值，為臨床診斷提供一些參考，以期減少誤診的發(fā)生。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2017年6月至2019年6月期間在鄭州市第六人民醫(yī)院治療的肺結(jié)核患者67例(肺結(jié)核組)、肺癌患者59例(肺癌組)，另選取同期在鄭州市第六人民醫(yī)院體檢中心健康體檢的61例健康體檢者作為對(duì)照組，所有患者均進(jìn)行全血γ-干擾素釋放試驗(yàn)。肺癌組59例均經(jīng)病理檢查確診，并排除活動(dòng)性肺結(jié)核，診斷依據(jù)為中華醫(yī)學(xué)會(huì)肺癌臨床診療指南(2018版)[9]，其中男34例、女25例，年齡(61±13)歲。肺結(jié)核組67例，病原學(xué)陽性確診，診斷依據(jù)為中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)肺結(jié)核診斷(WS288-2017)[10]，其中男39例、女28例，年齡(49±15)歲。對(duì)照組健康體檢者61例，其中男37例、女24例，年齡(46±14)歲。

1.2 全血γ干擾素釋放試驗(yàn)全血γ干擾素釋放試驗(yàn)試劑盒QuantiFERON-TB Gold(以下簡稱QFT試劑盒)，購自德國凱杰公司。具體方法：第一步采集全血，使用2種方法中的1種，將1 mL全血分別直接收集到3個(gè)QFT血液收集管中，并在室溫下保存16 h，然后孵化?；蛘邔? mL全血收集到單個(gè)肝素鋰管中，在室溫下或冷藏條件下靜置53 h，然后轉(zhuǎn)移到QFT管和孵育器中。3個(gè)血液收集管分別為TB檢測管、Nil管和Mitogen管，TB檢測管含有肺結(jié)核特異性檢測抗原[ESAT-6、CFP-10、TB7.7(P4)]，Nil管為陰性對(duì)照管，Mitogen 管為陽性對(duì)照管。第二步37 ℃孵育16～24 h，用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測血漿中釋放的γ-干擾素。第三步使用QFT分析軟件分析結(jié)果。QFT結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)見表1。

表1 QFT 結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn) IU/mL

注：1)以Nil管的反應(yīng)做校正

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 18.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料用百分?jǐn)?shù)表示，比較用χ2檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

肺結(jié)核組、肺癌組、對(duì)照組全血γ-干擾素釋放試驗(yàn)結(jié)果陽性率分別為94.93%(63/67)、55.93%(26/59)、16.39%(10/61)，總體比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=79.973，P<0.001)。肺結(jié)核組陽性率明顯高于肺癌組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=33.456，P<0.001)；肺結(jié)核組陽性率明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=77.921，P<0.001)；肺癌組陽性率明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=10.938，P=0.001)。全血γ-干擾素釋放試驗(yàn)在診斷肺結(jié)核感染中的敏感性為94.03%，特異性為70.00%。

3 討論

2019年10月17日，WHO發(fā)布的2019年版全球結(jié)核病報(bào)告顯示，2018年全球新發(fā)結(jié)核病患者1 000萬例左右，中國新發(fā)肺結(jié)核患者86.6萬例(占全球的9%)，居30個(gè)結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家的第2位。2018年全球結(jié)核病死亡數(shù)124萬左右，死亡率達(dá)到16/10萬，連續(xù)十幾年位居單一傳染病死因第1位[4]。有研究[11]對(duì)我國2015年癌癥統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，肺癌位居我國惡性腫瘤發(fā)病和死亡率的第1位，當(dāng)年新發(fā)肺癌78.7萬，發(fā)病率57.26/10萬，當(dāng)年死亡人數(shù)63.1萬，死亡率45.87/10萬。肺結(jié)核和肺癌已經(jīng)成為嚴(yán)重影響人們健康的全球重大公共衛(wèi)生問題，但兩者在臨床早期診斷上都存在一定的困難，尤其是肺結(jié)核的早期診斷。肺結(jié)核診斷臨床常用方法包括病原學(xué)檢測方法(痰涂片、痰培養(yǎng)、分子生物學(xué)檢測等)、影像學(xué)方法、結(jié)核抗體檢測、結(jié)核菌素試驗(yàn)等，其中影像學(xué)方法只是肺結(jié)核診斷的一種輔助方法，結(jié)核菌素試驗(yàn)由于受到卡介苗接種的影響假陽性率過高，結(jié)核抗體由于抗原的差異導(dǎo)致假陰性率和假陽性率偏高，已失去臨床診斷意義。另外，目前常用的病原學(xué)檢測方法陽性率太低，達(dá)不到早期診斷目的。黃芳等[12]報(bào)道痰涂片顯微鏡檢查陽性率僅為24.6%，液體培養(yǎng)陽性率為49.7%。近幾年國內(nèi)外已廣泛報(bào)道全血γ-干擾素釋放試驗(yàn)在結(jié)核分枝桿菌潛伏感染方面敏感性和特異性較高，其原理是機(jī)體初次感染結(jié)核分枝桿菌會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)生致敏T淋巴細(xì)胞，若再次遇到同樣的結(jié)核分枝桿菌抗原時(shí)，該細(xì)胞立即活化為效應(yīng)性T淋巴細(xì)胞，效應(yīng)性T淋巴細(xì)胞會(huì)釋放出細(xì)胞因子，比如γ-干擾素等。因此，我們可以通過檢測γ-干擾素水平來判斷結(jié)核分支桿菌的感染情況，進(jìn)而確診或排除肺結(jié)核。高磊等[6]在我國東部、中部、西部開展了大規(guī)模的結(jié)核分枝桿菌感染流行病學(xué)調(diào)查,其結(jié)果顯示我國人群結(jié)核分枝桿菌潛伏感染率在15%～18%之間。本研究發(fā)現(xiàn)健康體檢者的檢測結(jié)果陽性率達(dá)到16.39%(10/61)，與前述研究結(jié)果一致。另外本研究還發(fā)現(xiàn)肺癌組陽性率為55.93%，與黃毅等[13]的50.00%基本一致，但高于劉旭輝等[14]的27.30%(6/22),其原因可能與試劑盒、標(biāo)本質(zhì)量和樣本量不同有關(guān)。本研究結(jié)果還顯示，肺結(jié)核組陽性率94.93%，明顯高于肺癌組和對(duì)照組，肺癌組陽性率也明顯高于對(duì)照組，可能原因是結(jié)核分枝桿菌更容易感染機(jī)體免疫力低下者，而肺癌患者由于放、化療的原因致使機(jī)體免疫力下降，引起結(jié)核分枝桿菌潛伏感染的可能性增加。另外，黃毅等[13]認(rèn)為在腫瘤形成過程中可能產(chǎn)生一些相似的效應(yīng)性T淋巴細(xì)胞，在受到EAST6、CFP10蛋白刺激后釋放γ-干擾素，從而出現(xiàn)假陽性的結(jié)果，具體原因需進(jìn)一步考證。

綜上所述，全血γ-干擾素釋放試驗(yàn)在診斷肺結(jié)核感染中具有較高敏感性和特異性，可用于肺癌和肺結(jié)核的鑒別診斷。