韋拔雄 彭婧 陳月祿 陳碧君 鐘曉華

【摘要】 目的 對(duì)比不同類型的基底型細(xì)胞角蛋白在乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變患者診斷中的應(yīng)用效果。方法 58例乳腺疾病患者， 根據(jù)患者乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生類型不同分為普通增生組（乳腺導(dǎo)管普通增生性病變）與原位癌增生組（乳腺導(dǎo)管原位癌增生性病變）， 各29例。兩組患者均進(jìn)行CK5/6、WT1以及G1/S-特異性周期蛋白-D1（Cyclin D1）等基底型細(xì)胞角蛋白因子診斷， 觀察并對(duì)比兩組患者以上基底型細(xì)胞角蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果 普通增生組CK5/6陽性表達(dá)例數(shù)為26例， 占比為90%;WT1陽性表達(dá)例數(shù)為8例， 占比為28%;原位癌增生組CK5/6陽性表達(dá)例數(shù)為1例， 占比為3%;WT1陽性表達(dá)例數(shù)為23例， 占比為79%;原位癌增生組CK5/6陽性表達(dá)占比顯著低于普通增生組， WT1陽性表達(dá)占比顯著高于普通增生組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=43.309、15.591， P=0.000、0.000<0.05）。原位癌增生組患者Cyclin D1表達(dá)水平（59.1±40.5）%顯著高于普通增生組的（22.5±27.8）%， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 采用CK5/6、WT1以及Cyclin D1等基底型細(xì)胞角蛋白因子對(duì)乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變患者進(jìn)行相關(guān)診斷， 可有效判斷患者內(nèi)增生性病變類型， 這對(duì)患者治療方案的制定具有重要輔助意義， 達(dá)到提高治療效果、保障患者身體健康、提高生活質(zhì)量的最終目的。因此， 該方法具有被臨床推廣使用的意義。

【關(guān)鍵詞】 基底型細(xì)胞角蛋白;乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變;診斷價(jià)值

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.12.030

乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變類型相對(duì)較多， 如平坦型上皮不典型性增生與導(dǎo)管原位癌導(dǎo)管增生類型等[1]。經(jīng)相關(guān)研究結(jié)果顯示， 該類疾病患者之間的診斷重復(fù)性相對(duì)較差， 無法得到較為精確的診斷結(jié)果。因此， 臨床對(duì)該疾病不同類型的乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變的臨床治療具有重大影響， 導(dǎo)致治療效果較低， 從而直接影響到患者的身體健康與生活質(zhì)量[2]。因此， 采取相應(yīng)的輔助診斷方式、有效辨別乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變類型對(duì)提高該疾病的治療效果和保證患者身體健康及提高其生活質(zhì)量具有重要意義[3]。隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展進(jìn)步， 基底型細(xì)胞角蛋白在乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性類型疾病中的辨別應(yīng)用極為廣泛， 通過有效觀察患者CK5/6、WT1以及Cyclin D1等基底型細(xì)胞角蛋白因子的表達(dá)情況， 可達(dá)到有效辨別乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變類型的效果[4]。本文主要探討基底型細(xì)胞角蛋白在乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變患者診斷中的應(yīng)用效果， 具體過程如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選擇2019年3～12月在本院診斷治療的乳腺疾病患者58例， 根據(jù)患者乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生類型不同分為普通增生組（乳腺導(dǎo)管普通增生性病變）與原位癌增生組（乳腺導(dǎo)管原位癌增生性病變）， 各29例。普通增生組患者平均年齡（40.25±10.26）歲。原位癌增生組患者平均年齡（40.24±11.24）歲。兩組患者一般資料比較， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)本院相關(guān)研究結(jié)果顯示， 最終確診為乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變的患者;②對(duì)本次診斷研究知情， 且自愿簽署知情同意書的患者;③原位癌增生組均確診為乳腺導(dǎo)管原位癌增生性病變的患者， 普通增生組均確診為乳腺導(dǎo)管普通增生性病變的患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料不全， 對(duì)本次研究意見不統(tǒng)一的患者;②病理切片沒有蠟塊的患者;③非典型乳腺增生性乳腺導(dǎo)管上皮增生性病變患者;④存在診斷禁忌證， 且依從性和配合性均相對(duì)較差的患者。

1. 3 方法 采用免疫組化染色方法對(duì)兩組患者進(jìn)行染色標(biāo)記處理， 免疫組化試劑一抗（CK5/6、WT1、Cyclin D1）、試劑盒（二抗）由基因科技（上海）提供， 采用免疫組化多聚物法（GK6007）進(jìn)行。具體染色步驟為：①切片常規(guī)切蠟并至水;②抗原修復(fù)方法為微波爐， EDTA+， 修復(fù)時(shí)間為20 min;③采用3%的過氧化氫對(duì)內(nèi)源性過氧化物酶做封閉處理， 同時(shí)進(jìn)行避光處理， 需在室溫下保持25 min;④采用磷酸緩沖鹽溶液（PBS）進(jìn)行洗滌處理， 次數(shù)為2次， 5 min/次;⑤滴加一抗（CK5/6、WT1、Cyclin D1）， 工作稀釋度為1∶100， 時(shí)間為120 min， 溫度為37℃;⑥采用PBS進(jìn)行洗滌處理， 次數(shù)為2次， 5 min/次;⑦ 滴加EnVision二抗工作液， 時(shí)間為40 min， 溫度為37℃;⑧采用PBS進(jìn)行洗滌處理， 次數(shù)為2次， 5 min/次;⑨進(jìn)行DAB顯色， 適當(dāng)時(shí)終止顯色， 并采用自來水洗滌;⑩采用蘇木素進(jìn)行復(fù)染， 時(shí)間為3 min， 后采用自來水沖洗;采用1%的鹽酸酒精進(jìn)行分化， 時(shí)間為3 s， 后采用自來水沖洗反藍(lán)15 min;切片后常規(guī)脫水至透明;封片判斷染色結(jié)果。

1. 4 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) 觀察并對(duì)比兩組患者CK5/6、WT1以及Cyclin D1等因子的表達(dá)情況。

1. 5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩組患者CK5/6陽性和WT1陽性表達(dá)情況對(duì)比 普通增生組CK5/6陽性表達(dá)例數(shù)為26例， 占比為90%;WT1陽性表達(dá)例數(shù)為8例， 占比為28%;原位癌增生組CK5/6陽性表達(dá)例數(shù)為1例， 占比為3%;WT1陽性表達(dá)例數(shù)為23例， 占比為79%;原位癌增生組CK5/6陽性表達(dá)占比顯著低于普通增生組， WT1陽性表達(dá)占比顯著高于普通增生組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=43.309、15.591， P=0.000、0.000<0.05）。見表1。

2. 2 兩組患者Cyclin D1表達(dá)情況對(duì)比 原位癌增生組患者Cyclin D1表達(dá)水平顯著高于普通增生組， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

乳腺屬于性激素的靶器官， 當(dāng)乳腺受到內(nèi)分泌環(huán)境的影響時(shí)會(huì)呈現(xiàn)出周期性的變化， 而當(dāng)變化環(huán)境出現(xiàn)擴(kuò)大或者性刺激機(jī)會(huì)增多時(shí)， 不同程度上促進(jìn)“動(dòng)情素”分泌， 進(jìn)而造成患者雌激素增多和孕酮減少[5]。當(dāng)出現(xiàn)這一情況時(shí)， 患者極其容易出現(xiàn)乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生， 容易對(duì)患者的日常生活與工作造成影響， 大大降低其生活質(zhì)量， 因此， 臨床對(duì)該疾病的治療極為關(guān)注。但乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變類型相對(duì)較多， 且各類型判定相對(duì)復(fù)雜， 容易對(duì)治療結(jié)果造成不良影響。而對(duì)患者進(jìn)行相應(yīng)的早期臨床診斷， 根據(jù)診斷結(jié)果為患者實(shí)施針對(duì)性的治療， 可達(dá)到提高治療效果、保障患者身體健康的目的。因此， 采用有效的診斷方法對(duì)乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變患者進(jìn)行疾病類型診斷、對(duì)疾病治療方案的制定具有重要意義。

隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展進(jìn)步， 乳腺定向干細(xì)胞以及基底型細(xì)胞角蛋白因子目前已成為乳腺病理學(xué)上的重點(diǎn)研究對(duì)象。不過至今臨床醫(yī)學(xué)對(duì)乳腺中的細(xì)胞構(gòu)成仍然存在一定程度上的爭(zhēng)議， 但基底型細(xì)胞角蛋白在乳腺導(dǎo)管增生性疾病患者疾病類型的輔助診斷中卻已取得了廣大醫(yī)療學(xué)者的認(rèn)同。因此， 目前臨床醫(yī)學(xué)上多采用基底型細(xì)胞角蛋白因子的表達(dá)情況對(duì)乳腺導(dǎo)管增生性疾病患者進(jìn)行早期診斷， 以此達(dá)到有效判別患者最終疾病類型， 并根據(jù)判別結(jié)果實(shí)施正確治療方法， 提高治療效果的最終目的。

在傳統(tǒng)觀念中， 正常乳腺導(dǎo)管主要是由外皮肌上皮和內(nèi)層腺上皮構(gòu)成， 在乳腺導(dǎo)管普通內(nèi)增生性病變患者中增生成分相對(duì)復(fù)雜， 主要為肌上皮、腺上皮和大汗腺細(xì)胞混雜分布而成， 通過CK5/6、WT1以及Cyclin D1等基底型細(xì)胞角蛋白因子進(jìn)行染色處理， 能夠?qū)颊哒Ｈ橄俳M織以及乳腺癌組織進(jìn)行有效研究， 并通過基底型細(xì)胞角蛋白因子對(duì)正常乳腺上皮中存在的CK細(xì)胞群進(jìn)行表達(dá)標(biāo)記[6-8]。臨床醫(yī)學(xué)可通過表達(dá)標(biāo)記情況有效區(qū)分正常乳腺上皮與乳腺癌組織上皮情況， 進(jìn)而判斷乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變類型情況。

采用CK5/6、WT1以及Cyclin D1等基底型細(xì)胞角蛋白因子對(duì)乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變患者進(jìn)行相關(guān)診斷， 診斷效果顯著。乳腺導(dǎo)管內(nèi)普通增生性病變患者與乳腺導(dǎo)管原位癌增生患者比較， 原位癌增生患者WT1陽性表達(dá)占比顯著高于普通增生性病變患者， CK5/6陽性表達(dá)占比顯著低于普通增生性病變患者， Cyclin D1的表達(dá)水平明顯高于普通增生性病變患者， 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

綜上所述， 采用CK5/6、WT1以及Cyclin D1等基底型細(xì)胞角蛋白因子對(duì)乳腺導(dǎo)管內(nèi)增生性病變患者進(jìn)行相關(guān)診斷， 可有效判斷患者內(nèi)增生性病變類型， 這對(duì)患者治療方案的制定具有重要輔助意義， 能達(dá)到提高治療效果、保障患者身體健康、提高生活質(zhì)量的最終目的。因此， 該方法具有被臨床推廣使用的意義。

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[收稿日期：2020-02-17]