邵帥 張莉 劉華

[摘要]目的：分析p53基因單核苷酸多態(tài)性（SNPs）位點(diǎn)的多態(tài)性，探究云南漢族非綜合征性唇腭裂與p53基因的相關(guān)性。方法：選取2016年1月-2018年12月于筆者醫(yī)院就診的非綜合征性唇腭裂患兒100例為試驗(yàn)組，選取醫(yī)院同期無(wú)先天性畸形正?；純?00例為對(duì)照組。采用Taqman探針熒光定量PCR法對(duì)p53基因的SNPs位點(diǎn)rs12947788和rs1042522進(jìn)行基因分型，并用χ2檢驗(yàn)和Logistic回歸分析多態(tài)位點(diǎn)與非綜合征性唇腭裂的相關(guān)性。結(jié)果：p53的基因SNPs位點(diǎn)rs12947788的等位基因變體A攜帶者（AA+GA vs GG）發(fā)生非綜合征性唇腭裂的風(fēng)險(xiǎn)增加（OR=1.393，95%CI 1.030～1.884，P=0.032）。rs1042522（CC vs CG+GG）增加吸煙者母親生下NSCL/P患兒的風(fēng)險(xiǎn)（OR=2.561，95% CI=1.146～5.721，P=0.022）。rs12947788（AA+GA vs GG）可明顯增加有飲酒史母親（OR=3.235，95%CI=1.158～9.040，P=0.025）生下NSCL/P患兒的風(fēng)險(xiǎn)。結(jié)論：云南漢族人群非綜合征性唇腭裂與p53基因rs1042522、rs12947788多態(tài)具有一定的相關(guān)性。

[關(guān)鍵詞]非綜合征性唇腭裂;抑癌基因p53;基因多態(tài)性;相關(guān)性

Abstract： Objective? The single nucleotide polymorphism （SNPs） of p53 gene was analyzed to explore the correlation between p53 gene and non-syndromic cleft lip and palate of han nationality in yunnan province. Methods? A total of 100 children with non-syndromic cleft lip and palate admitted to our hospital from January 2016 to December 2018 were selected as the experimental group， and 100 children without congenital malformation during the same period in our hospital were selected as the control group. Taqman probe fluorescence quantitative PCR was used to genotype p53 SNPs sites rs12947788 and rs1042522， and the correlation between polymorphism sites and non-syndromic cleft lip and palate was analyzed by χ2 test and logistic regression. Results? Carriers of allele A of p53 SNPs rs12947788 （AA+GA vs GG） have an increased risk of developing non-syndromic cleft lip and palate （OR=1.393， 95%CI 1.030～1.884， P=0.032）. Rs1042522 （CC vs CG+GG） increased the risk of NSCL/P in children born to mothers of smokers （OR=2.561， 95% CI=1.146～5.721， P=0.022）. Rs12947788 （AA+GA vs GG） significantly increased the risk of NSCL/P in children born to mothers with drinking history （OR=3.235， 95%CI=1.158～9.040， P=0.025）. Conclusion? There is a certain correlation between non-syndromic cleft lip and palate and p53 gene rs1042522 and rs12947788 polymorphism in yunnan han population.

Key words： nonsyndromic cleft lip with or without cleft palate（NSCL/P）; tumor suppressor gene p53; gene polymorphism; garrelation

非綜合征性唇腭裂唇腭裂（Nonsyndromic cleft lip with or without cleft palate，NSCL/P）是臨床外科最常見(jiàn)的先天性出生缺陷之一，指不伴發(fā)其他系統(tǒng)器官畸形的不屬于任何綜合征性唇腭裂的唇裂、腭裂的總稱[1-3]。非綜合征性唇腭裂在世界范圍內(nèi)發(fā)病率約為1‰～2‰[4]，中國(guó)地區(qū)的發(fā)病率約為1.42‰[5]，位列我國(guó)新生兒出生缺陷病第2位，具有明顯的種族和地域差異。NSCL/P是一種由多種因素造成的復(fù)雜疾病，學(xué)者們一般都認(rèn)為是基因和環(huán)境共同作用下的結(jié)果，與妊娠期吸煙[6]、符合維生素補(bǔ)充[7]、飲酒[8]以及基因多態(tài)性[9]等因素密切相關(guān)。目前有大量關(guān)于基因多態(tài)性與非綜合征性唇腭裂相關(guān)的研究，干擾素調(diào)節(jié)因子-6（Interferon regulatory factor-6，IRF-6）基因和5，10-亞甲基四氫葉酸還原酶（Methylenetetrahydrofolate reductase，MTHFR）基因是學(xué)者們最主要的研究對(duì)象[10-11]。p53基因是最早發(fā)現(xiàn)的人體抑癌基因中的一員，與人類惡性腫瘤關(guān)系密切，在人體發(fā)生惡性腫瘤時(shí)，50%以上的概率會(huì)出現(xiàn)p53基因的突變[12]。有研究表明[13-14]，p53基因突變與多種系統(tǒng)性疾病有關(guān)。目前還沒(méi)有關(guān)于p53基因與非綜合征性唇腭裂相關(guān)性的研究，考慮到非綜合征性唇腭裂與基因多態(tài)性因素的密切聯(lián)系，本研究通過(guò)觀察分析p53基因的SNPs位點(diǎn)rs12947788和rs1042522的基因分型，來(lái)探究p53基因與非綜合征性唇腭裂的相關(guān)性關(guān)系，以期為臨床疾病預(yù)測(cè)提供可靠理論依據(jù)。

3? 討論

唇腭裂作為一種最常見(jiàn)的頜面部先天畸形之一，根據(jù)是否伴有其他先天性畸形可以分為綜合征性唇腭裂（Syndromic cleft lip with or without cleft palate，SCL/P）和非綜合征性唇腭裂（Non-syndromic cleft lip with or without cleft palate，NSCL/P）[15-16]。有研究表明SCL/P是單基因遺傳疾病，而NSCL/P的發(fā)病機(jī)制則較為復(fù)雜，且有較多研究證明NSCL/P的病因與多種因素有關(guān)。國(guó)外有一項(xiàng)研究表明[17-18]，NSCL/P不符合孟德?tīng)栠z傳定律，證明NSCL/P的發(fā)生發(fā)展受遺傳和環(huán)境兩種因素共同影響。截止目前，國(guó)內(nèi)外已發(fā)現(xiàn)有十幾個(gè)基因與NSCL/P的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。

人體抑癌基因p53是目前國(guó)內(nèi)外被研究的最多的腫瘤抑制基因之一，定位于人染色體短臂17p13.1區(qū)，長(zhǎng)度約為16～20Kb，構(gòu)成包括11個(gè)外顯子和10個(gè)內(nèi)含子，主要用于人體編碼由393個(gè)氨基酸組成的p53核內(nèi)磷酸蛋白，25Kb的mRNA是其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物[19-20]。p53蛋白分為兩種亞型，野生型p53（wtp53）是抑癌基因，主要用來(lái)校正DNA保持正常、介導(dǎo)細(xì)胞凋亡。突變型p53（mtp53）通常會(huì)刺激細(xì)胞，發(fā)揮癌基因的作用，抑制細(xì)胞凋亡。已有研究證明[21-22]，p53基因突變與包括呼吸系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)等多個(gè)系統(tǒng)在內(nèi)的原發(fā)性腫瘤密切相關(guān)。有動(dòng)物模型研究發(fā)現(xiàn)，抑癌基因p53的缺失會(huì)導(dǎo)致小鼠胚胎發(fā)育畸形，具體表現(xiàn)為顱面畸形[23-24]。在本研究?jī)蓚€(gè)p53基因多態(tài)性位點(diǎn)與非綜合征性唇腭裂的相關(guān)性分析結(jié)果中發(fā)現(xiàn)，rs12947788的等位基因變體A攜帶者（AA+GA vs GG）發(fā)生NSCL/P的風(fēng)險(xiǎn)增加（OR=1.393，95%CI 1.030～1.884，P=0.032）。除此之外其他基因型均與NSCL/P的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)無(wú)明顯相關(guān)關(guān)系。在本研究p53基因兩個(gè)多態(tài)位點(diǎn)與NSCL/P發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)性的分析結(jié)果中，根據(jù)危險(xiǎn)因素將研究人群的母親進(jìn)行分層時(shí)，發(fā)現(xiàn)兩個(gè)SNPs位點(diǎn)中，有2個(gè)與NSCL/P發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加相關(guān)。rs1042522（CC vs CG+GG）增加吸煙者母親生下的小兒發(fā)生NSCL/P的風(fēng)險(xiǎn)（OR=2.561，95% CI=1.146～5.721，P=0.022）。rs12947788（AA+GAvsGG）可明顯增加有飲酒史母親（OR=3.235，95%CI=1.158～9.040，P=0.025）生下的小兒患NSCL/P的風(fēng)險(xiǎn)。

對(duì)于本研究有與國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究不一致或有相矛盾的地方，可能是由于NSCL/P的發(fā)生存在著明顯的種族和地域差異[25-26]所致。且基因在不同地區(qū)和人群中亦有著較大的差異性，這可能導(dǎo)致NSCL/P的易感基因會(huì)隨著人群的不同而不同。我國(guó)種族較多，地域遼闊，大量的研究表明對(duì)于復(fù)雜的與遺傳和環(huán)境相關(guān)的疾病，需要將人群通過(guò)地域分開(kāi)來(lái)進(jìn)行研究[27]。且本研究樣本量較少，與先前國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究結(jié)果不一致也可能是由樣本量不足所導(dǎo)致的，擴(kuò)大樣本量及樣本收集范圍后得到的研究結(jié)果可能會(huì)更具有臨床意義。

綜上所述，p53基因rs12947788的等位基因變體A的攜帶者會(huì)增加NSCL/P的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn);p53基因rs12947788可明顯增加有飲酒史母親生下NSCL/P患兒的風(fēng)險(xiǎn);p53基因rs1042522可明顯增加有吸煙史母親生下NSCL/P患兒的風(fēng)險(xiǎn)。

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[收稿日期]2019-09-11

本文引用格式：邵帥，張莉，劉華，等.云南漢族非綜合征性唇腭裂與p53基因多態(tài)性的相關(guān)性研究[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué)，2020，29（4）：108-112.