李丹丹+喬木+王喜冰+梁學(xué)清+趙昕

[摘 要] 目的 綜合評估胱硫醚β-合成酶（CBS）基因G919A多態(tài)性與原發(fā)性高血壓（EH）發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系。方法 全面檢索PubMed、Embase、Medline、萬方數(shù)據(jù)庫、中國知網(wǎng)（CNKI）、維普資訊，收集CBS基因G919A多態(tài)性與EH發(fā)生關(guān)系的病例對照研究，優(yōu)勢比（OR）及95%可信區(qū)間（CI）評估關(guān)聯(lián)強(qiáng)度，應(yīng)用RevMan5.3軟件對納入研究進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)和效應(yīng)值OR合并，漏斗圖評價(jià)發(fā)表性偏倚；敏感度分析過程，分別以固定效應(yīng)模型和隨機(jī)效應(yīng)模型合并OR值，以評估結(jié)果的穩(wěn)定性。結(jié)果 共納入4篇文獻(xiàn)6組病例-對照研究，共累計(jì)EH組患者1147例，健康對照組1138例，根據(jù)異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果選取固定效應(yīng)模型或隨機(jī)效應(yīng)模型合并數(shù)據(jù)。Meta分析結(jié)果顯示：CBS基因919純合子模型（AA vs GG）、雜合子模型（GA vs GG）、顯性模型（AA+GA vs GG）、隱性模型（AA vs GG+GA）和基因頻率（A vs G）與EH關(guān)系的合并OR（95%CI）分別為3.03（1.95～4.72）、1.49（1.10～2.02）、1.61（1.23～2.10）、2.65（1.26～5.57）和1.55（1.35～1.79），均P<0.01。漏斗圖未檢測出顯著的發(fā)表性偏倚。結(jié)論 目前Meta分析表明CBS基因G919A多態(tài)性與EH發(fā)病相關(guān)聯(lián)，尤其是在中國人群。

[關(guān)鍵詞] 胱硫醚β-合成酶；原發(fā)性高血壓；基因多態(tài)性；Meta分析

中圖分類號：R544.1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1009-816X（2016）06-0422-05

[Abstract] Objective To evaluate the relationship between cystathionine beta-synthase （CBS） G919A genetic polymorphisms and the risk of essential hypertension （EH）. Methods A comprehensive search was conducted on PubMed， Embase， Medline， Wanfang Databases， CNKI and VIP to collect the case-control studies on the relationship between CBS G919A genetic polymorphisms and EH. Odds ratios （OR） with 95% confidence intervals （CI） were applied to assess the strength of association. The RevMan 5.3 software was applied for heterogeneity test and combined OR and their 95%CI calculation. Publication bias was assessed through funnel plot and the combined ORs were estimated through fixed-effects models or random-effects models for sensitivity analysis so as to assess the stability of the results. Results Four related literatures （six case-control studies） on the relationship between CBS G919A polymorphisms and EH were included，involving 1147 EH patients （case-groups） and 1138 controls.Based on the heterogeneity results，fixed-effects models or random-effects models were applied to estimate the combined ORs.The meta-analyses showed that combined OR （95% CI） for CBS 919 heterozygote model（AA vs GG），homozygote model（GA vs GG），dominant model（AA+GA vs GG），recessive model（AA vs GG+GA）and gene frequency（A vs. G） were 3.03（1.95～4.72）， 1.49（1.10～2.02）、1.61（1.23～2.10）、2.65（1.26～5.57） and 1.55（1.35～1.79）. No significant publication bias was detected by funnel plot and sensitivity analysis suggested the robustness of the results. Conclusions The present meta-analysis suggests that CBS 919A genetic polymorphisms positively correlate with EH， especially in Chinese population.

[Key words] Cystathionine beta-synthase （CBS）； Essential hypertension （EH）； Genetic polymorphism； Meta-analysis

原發(fā)性高血壓（essential hypertension，EH）是最常見的心血管疾病之一，主要以體循環(huán)動脈壓增高為主要臨床表現(xiàn)，目前認(rèn)為其是由遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的結(jié)果[1]。眾多環(huán)境及臨床疾病與EH相關(guān)，其中包括鈉鹽的攝入、飲酒、缺乏鍛煉、不良的飲食習(xí)慣、肥胖、胰島素抵抗型糖尿病及高脂血癥等[2]。盡管這些因素解釋了大部分高血壓發(fā)生的原因，但仍有高達(dá)60%的高血壓的風(fēng)險(xiǎn)差異是由于個(gè)人的基因所引起的[3]。研究發(fā)現(xiàn)，血漿同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）水平升高與EH的發(fā)生密切相關(guān)[4]。而胱硫醚β-合成酶（cystathionine beta-synthase，CBS）是Hcy代謝過程中的關(guān)鍵酶，因此，CBS基因缺陷可通過影響血漿總Hcy水平間接導(dǎo)致高血壓的發(fā)生，其中常見的突變位點(diǎn)有T833C、G919A、844ins68等。目前已有關(guān)于CBS基因G919A多態(tài)性與EH發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系的相關(guān)研究，但各研究結(jié)果間存在一定爭議。Meta分析對于存在差異的不同研究，能夠匯總多項(xiàng)研究結(jié)果，增大樣本量，提高效應(yīng)值估計(jì)精度，定量分析合并效應(yīng)量，成為循證醫(yī)學(xué)中有力的研究工具。本研究采用Meta分析評估CBS基因G919A多態(tài)性與EH發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系，為EH的早期診斷和篩選易感人群提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 文獻(xiàn)檢索途徑和策略：計(jì)算機(jī)全面檢索PubMed、Embase、Medline、萬方數(shù)據(jù)庫、中國知網(wǎng)、維普資訊，獲取有關(guān)CBS基因G919A多態(tài)性與EH關(guān)系的相關(guān)研究文獻(xiàn)。檢索中文主題詞或關(guān)鍵詞為：胱硫醚β-合成酶或CBS、基因、多態(tài)性、原發(fā)性高血壓。英文主題詞或關(guān)鍵詞為：Cystathionine beta-synthase or CBS，Gene，polymorphism or variant，Hypertension。檢索日期截止至2016年3月1日，檢索語種不限，同時(shí)輔以文獻(xiàn)追蹤法查閱相關(guān)文獻(xiàn)，同時(shí)手工檢索文獻(xiàn)，以確保文獻(xiàn)檢索的全面性。病例報(bào)道、評論、綜述、系統(tǒng)評價(jià)類文獻(xiàn)不作為納入文獻(xiàn)。

1.2 文獻(xiàn)納入標(biāo)準(zhǔn)：納入文獻(xiàn)均符合以下標(biāo)準(zhǔn)：①原始資料為已公開發(fā)表的文獻(xiàn)；②研究設(shè)計(jì)為病例-對照研究；③EH病例組診斷明確；④病例組和對照組各基因型數(shù)據(jù)表達(dá)明確；⑤對照組各基因型分布符合哈迪-溫伯格平衡（Hard-Weinberg equilibrirum，HWE）。兩位系統(tǒng)評價(jià)員獨(dú)立篩選，對納入文獻(xiàn)質(zhì)量進(jìn)行評價(jià)并提取基本資料，包括第一作者、發(fā)表年份、民族、基因分型方法、樣本量、病例組與對照組各基因型及基因頻率分布情況和對照組各基因型的HWE平衡情況。如有爭議則共同復(fù)查原文后協(xié)商決定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：對納入研究的原始數(shù)據(jù)應(yīng)用RevMan5.3軟件進(jìn)行合并統(tǒng)計(jì)分析。本研究以0R值及其95%CI為效應(yīng)指標(biāo)評價(jià)CBS基因G919A多態(tài)性與EH易感性的關(guān)聯(lián)強(qiáng)度，所采用的基因型模型有純合子模型（AA vs GG）、雜合子模型（GA vs GG）、顯性模型（AA+GA vs GG）、隱性模型（AA vs GG+GA）和直接比較基因頻率（A vs G）。采用Q檢驗(yàn)評估納入研究間的異質(zhì)性，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05，同時(shí)應(yīng)用I2定量異質(zhì)性大?。簷z驗(yàn)水準(zhǔn)為I2=56%，如納入研究間無明顯異質(zhì)性（I2≤56%，P≥0.05）則采用固定效應(yīng)模型；如異質(zhì)性明顯（I2>56%，P<0.05）則采用隨機(jī)效應(yīng)模型合并數(shù)據(jù)。繪制漏斗圖評估發(fā)表性偏倚。

2 結(jié)果

2.1 納入文獻(xiàn)的基本情況：經(jīng)過文獻(xiàn)檢索和嚴(yán)格篩選，最終納入4篇文獻(xiàn)[5～7，9]，共6個(gè)病例-對照研究，包括HE患者1147例，對照組1138例。因CBS基因G919A主要在我國范圍內(nèi)研究，故所得研究均以我國人群為研究對象，均采用PCR-RFLP基因分型方法，除趙磊（b）[8]研究的對照組不符合HWE外，其余對照組均符合HWE。各納入文獻(xiàn)基本特征和原始數(shù)據(jù)見表1。

2.2 Meta分析結(jié)果：異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果：純合子模型（AA vs GG，圖1，P=0.06>0.05）、雜合子模型（GA vs GG，圖略，P=0.01<0.05）、顯性模型（AA+GA vs GG，圖2，P=0.03<0.05）、隱性模型（AA vs GG+GA，圖略，P=0.04<0.05）和基因頻率（A vs G，圖3，P=0.05，I2=55%<56%），故純合子模型和基因頻率模型采用固定效應(yīng)模型合并數(shù)據(jù)，其余模型均采用隨機(jī)效應(yīng)模型合并數(shù)據(jù)，與EH關(guān)系的合并OR（95% CI）分別為3.03（1.95～4.72）、1.49（1.10～2.02）、1.61（1.23～2.10）、2.65（1.26～5.57）和1.55（1.35～1.79），對應(yīng)Z值分別為4.91、2.56、3.45、2.58和6.05；均P<0.01。表明CBS919各基因型模型均與EH相關(guān)聯(lián)，說明CBS919多態(tài)性與EH相關(guān)。

考慮到種族差異對CBS基因多態(tài)性的影響，本文進(jìn)一步進(jìn)行亞組分析（如圖3，基因頻率A vs G各種族亞組與EH關(guān)系的meta分析，其余各基因型模型的森林圖未列出），亞組分析表明，不同民族CBS919各基因型模型與EH的關(guān)聯(lián)性不同（結(jié)果見表2），可見，CBS基因多態(tài)性存在明顯的種族差異。

2.3 發(fā)表性偏倚與敏感度分析：漏斗圖中各點(diǎn)分布基本對稱（圖4），說明無明顯的發(fā)表性偏倚。在敏感度分析過程，分別以固定效應(yīng)模型和隨機(jī)效應(yīng)模型合并OR值，其結(jié)果基本一致，并通過加入趙磊（b）[8]的研究，其合并數(shù)據(jù)分析的結(jié)果與之前結(jié)果亦一致，說明目前所得結(jié)果是穩(wěn)定的。

3 討論

血漿Hcy水平升高作為心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素己被廣泛認(rèn)同。CBS是Hcy代謝轉(zhuǎn)硫基過程中的重要酶，該基因定位于染色體21q22.3，長25～30KB，編碼551個(gè)氨基酸長度。CBS基因G919A位于第8外顯子，當(dāng)?shù)?07位氨基酸由甘氨酸（Gly）代替了絲氨酸（Ser），導(dǎo)致CBS活性下降，但并不影響CBS與5′磷酸吡哆醛的結(jié)合，其引起酶活性下降的機(jī)制仍不清[10]。目前對CBS基因多態(tài)性的研究主要集中在腦血管疾病及冠心病領(lǐng)域[11～13]。絕大多數(shù)研究者認(rèn)為，CBS基因突變導(dǎo)致CBS缺乏或活性降低是血管性疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，CBS基因多態(tài)性存在明顯的地域和種族差異，與本文亞組分析結(jié)果一致。

目前已有較多探索CBS基因G919A多態(tài)性與EH發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系的研究，但各研究結(jié)果存在一定差異。本研究運(yùn)用Meta分析的方法增大樣本含量，提高了檢驗(yàn)效能和效應(yīng)量估計(jì)精度，將不一致的研究結(jié)果進(jìn)行定量綜合。本文最終共納入6個(gè)病例-對照研究，根據(jù)異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果選取固定效應(yīng)模型或隨機(jī)效應(yīng)模型合并效應(yīng)指標(biāo)OR值。Meta分析結(jié)果顯示，CBS基因919純合子模型（AA vs GG）、雜合子模型（GA vs GG）、顯性模型（AA+GA vs GG）、隱性模型（AA vs GG+GA）和基因頻率（A vs G）與EH的合并OR（95%CI）分別為3.03（1.95～4.72）、1.49（1.10～2.02）、1.61（1.23～2.10）、2.65（1.26～5.57）和1.55（1.35～1.79），均P<0.01。表明CBS基因G919A多態(tài)性與EH發(fā)病相關(guān)聯(lián)，尤其是在中國人群，且漏斗圖未檢測出顯著的發(fā)表性偏倚。因CBS基因G919A主要在我國范圍內(nèi)研究，國外未見此類研究，故所得研究均以我國人群為研究對象，但由于本研究納入的文獻(xiàn)數(shù)量有限，可能受到混雜因素如種族因素的影響，考慮到種族差異對CBS基因多態(tài)性的影響，本文進(jìn)一步進(jìn)行亞組分析，結(jié)果表明，不同民族CBS 919各基因型模型與EH的關(guān)聯(lián)性不同，但為得到更可靠的結(jié)論，需要進(jìn)一步開展多中心、大樣本、設(shè)計(jì)良好的病例-對照研究，更新系統(tǒng)評價(jià)，為EH的遺傳背景提供進(jìn)一步證據(jù)，為其早期診斷和預(yù)防提供循證醫(yī)學(xué)依據(jù)。

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（收稿日期：2016-7-11）