李 慧，趙紅英，盧 峰

（1.簡陽市人民醫(yī)院血液內(nèi)科，簡陽 641400；2.云南省滇南中心醫(yī)院·紅河州第一人民醫(yī)院腫瘤血液科，蒙自 661100；3.簡陽市人民醫(yī)院檢驗科，簡陽 641400）

急性白血?。ˋcute leukemia，AL）是一種常見的血液系統(tǒng)的惡性腫瘤，其發(fā)生、發(fā)展與機體免疫功能的紊亂密切相關(guān)［1］。在AL的病情發(fā)展過程中，機體的免疫微環(huán)境是動態(tài)變化的。隨著免疫微環(huán)境的改變，微環(huán)境中的各種免疫細胞亞群也隨之發(fā)生變化［2］。人們可以通過檢測T細胞亞群的具體情況來評估機體的免疫狀態(tài)，間接反映AL微環(huán)境的變化情況。但T細胞亞群與疾病的關(guān)系仍然存在差異。有文獻報道［3］，部分AL患者T細胞亞群百分率與健康人比較沒有差異，但亦有研究認為［4］，T淋巴細胞亞群的水平與疾病相關(guān)。因此，筆者通過監(jiān)測AL患者的T細胞亞群變化情況，并動態(tài)觀察其在AL患者治療前后的變化，為臨床治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2016年6月～2018年6月在我院進行治療的AL患者80例作為觀察組，將其按核型分析和基因檢測分為低、中和高危組，例數(shù)分別為24例、27例和29例；治療后按治療效果重新分為三組，分別為完全緩解組41例，復(fù)發(fā)組17例以及未緩解組22例。觀察組男性45例，女性35例，年齡19～69歲，平均年齡（26.87±4.34）歲。在疾病類型方面，急性淋巴細胞白血病42例，急性髓細胞性白血病38例。并選擇同期健康志愿者40例作為正常對照組，該組男性25例，女性15例，年齡18～65歲，平均年齡（24.87±6.54）歲。兩組在一般資料等方面進行比較均P＞0.05，具有可比性。本研究經(jīng)兩組知情且同意，并獲得本院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核并批準。

1.2 納入與排除標準

1.2.1 納入標準（1）經(jīng)血常規(guī)，骨髓涂片，流式細胞學(xué)，細胞組化染色等檢查確診為AL患者［5］；（2）年齡≥18歲；（3）1月前未接受過相關(guān)治療。

1.2.2 排除標準（1）合并其他血液性疾病者；（2）合并重度感染、嚴重臟器功能損害或不全者；（3）半年內(nèi)使用放、化療，免疫抑制劑者。

1.3 檢測方法采集各組患者的外周靜脈血2 mL，加入EDTAK2抗凝。①取試管兩只，分別標記為對照管和測定管，加入相應(yīng)的抗體及標本。測定管：20μLCD4-FITC/CD8-PE/CD3-PC5+100μL 全血，對照管：20μLIgG1- FITC/IgG1-PE/IgG1-PC5+100μL全血，混勻，避光15 min。②加入500μL溶血劑，混勻，避光孵育10 min。③加入500μL鞘液及100μL熒光微球混勻，上流式細胞儀（購自美國貝克曼庫爾特有限公司）檢測。由計算機自動輸出結(jié)果，單位為%。

骨髓原始細胞≤5%；臨床無白血病細胞浸潤的癥狀和體征；外周血紅蛋白≥100 g/L（男性）或≥90 g/L（女性），中性粒細胞≥1.5×109 /L且分類無幼稚細胞，血小板≥100×109 /L為完全緩解。完全緩解患者出現(xiàn)骨髓原始細胞＞5%和（或）髓外白血病細胞浸潤和（或）遺傳學(xué)或分子生物學(xué)再次出現(xiàn)陽性為復(fù)發(fā)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法使用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析?；颊逿細胞亞群水平為計量資料，使用均數(shù)±標準差來表示，初診AL組和正常對照組比較使用獨立樣本t檢驗，三組間比較使用方差分析，兩兩比較使用LSD-T檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 初診AL組和正常對照組患者T細胞亞群比較

初診AL組與正常對照組相比，CD3+T、CD4+T以及CD4T+/CD8T+顯著降低，CD8+T顯著升高，均P＜0.05，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。

表1 初診AL組和正常對照組T細胞亞群比較

2.2 低、中和高危組患者T 細胞亞群比較三組患者的CD3+T、CD4+T、CD8+T以及CD4+T/CD8+T比較，均無顯著性差異（P＞0.05）；且兩兩比較，無顯著性差異（P＞0.05），見表2。

表2 低、中和高危組患者T 細胞亞群比較

2.3 治療后T 細胞亞群比較與完全緩解組相比，未緩解組的CD3+T、CD4+T以及CD4+/CD8+水平均降低，CD8+T水平升高（P＜0.05）；復(fù)發(fā)組的CD3+T、CD4+T水平均升高（P＜0.05）。與未緩解組相比，復(fù)發(fā)組的CD3+T、CD4+T以及CD4+T/CD8+T水平均升高（P＜0.05）。

表3 治療后T 細胞亞群比較

3 討論

T淋巴細胞具有免疫殺傷、免疫輔助以及免疫抑制等功能［6］。根據(jù)T細胞表面的標志和功能狀態(tài)，可分為若干亞群，各類T細胞在機體內(nèi)數(shù)量和功能均處于平衡狀態(tài)，共同維持機體免疫功能的穩(wěn)定狀態(tài)［7］。各類T細胞亞群出現(xiàn)比例失調(diào)或功能受損，是血液腫瘤形成的一大原因［8］。有學(xué)者研究報道［9］，AL患者存在T細胞亞群數(shù)量的改變與功能的損害。因此對AL患者外周血中CD3+T、CD4+T、CD8+T以及CD4+T/CD8+T的情況進行檢測，了解其與臨床特征和預(yù)后的關(guān)系，對臨床上治療AL具有重要意義。

機體的免疫異常可使腫瘤細胞逃避宿主的免疫監(jiān)視，導(dǎo)致惡性腫瘤的發(fā)生［10］。CD4+T細胞亞群和CD8+T細胞亞群均為T細胞亞群的兩個分類，CD4+T細胞亞群具有免疫協(xié)調(diào)功能，而CD8+T細胞亞群則具有殺傷靶細胞和免疫抑制的作用，因此CD4+T/CD8+T的比例穩(wěn)定對維持細胞的免疫功能具有重要作用［11，12］。另外，CD3+T則一般用于計數(shù)T細胞的總數(shù)，其數(shù)量的降低顯示整體免疫性功能的持續(xù)降低［13］。本次研究結(jié)果中，初診AL組與正常對照組相比，CD3+T、CD4+T以及CD4+T/CD8+T顯著降低，這提示AL患者存在T細胞平衡失調(diào)，其免疫功能受到抑制或T細胞數(shù)量有所下降，使得機體識別和殺傷腫瘤細胞的能力下降，腫瘤細胞生長失去抑制，對健康的細胞、組織的侵襲能力更強［14］。此外，CD4+T/CD8+T比值顯著降低時，CD8+T水平卻顯著升高，CD4+T/CD8+T比值嚴重倒置，提示AL患者機體的免疫功能長期處于抑制狀態(tài)［15］。這可能與AL患者免疫應(yīng)答及免疫監(jiān)視出現(xiàn)異常所致。另一方面，本次研究還顯示，三組患者的CD3+T、CD4+T、CD8+T以及CD4+T/CD8+T比較，均無顯著性差異；且兩兩比較，無顯著性差異。這提示筆者急性白血病患者的CD3+T、CD4+T、CD8+T以及CD4+T/CD8+T水平與核型分析和基因檢測的分類無關(guān)。

本次研究還監(jiān)測了治療后AL患者T細胞亞群的變化情況，結(jié)果顯示未完全緩解組與完全緩解組相比，其CD3+T、CD4+T以及CD4+T/CD8+T水平均降低，CD8+T水平升高；復(fù)發(fā)組與完全緩解組相比其CD3+T、CD4+T水平均升高。復(fù)發(fā)組與未緩解組相比其CD3+T、CD4+T以及CD4+T/CD8+T水平均升高。這說明AL患者存在的免疫功能失調(diào)經(jīng)過治療之后有所改善。CD3+T、CD4+T的含量以及CD4+T/CD8+T的比值若降低，B細胞分泌抗體形成那個免疫復(fù)合物并激活補體，將會導(dǎo)致機體組織受損或生理功能紊亂。這可能是因為AL患者的免疫功能處于免疫抑制的狀態(tài)，機體識別和殺傷突變細胞的能力亦下降［16，17］，但是治療之后，若AL患者疾病得到緩解或痊愈，其水平有所升高。CD8+T細胞增多是引起細胞免疫損害的基礎(chǔ)，可通過CD4+T/CD8+T比值得到敏感的反映［18，19］，當(dāng) CD4+T/CD8+T比值升高，提示免疫應(yīng)答的正調(diào)節(jié)點占有優(yōu)勢。有研究報道［20］，CD4+T/CD8+T比值的升高更有利于患者的恢復(fù)和預(yù)后，維持細胞免疫反應(yīng)的平衡狀態(tài)。因此，細胞的免疫功能若受損將會進一步加重病情，而改善細胞免疫功能將有利于機體的恢復(fù)。治療過后，CD3+T、CD4+T的含量以及CD4+T/CD8+T的比值明顯上升，這有助于加快機體生理功能的恢復(fù)，提高患者抗腫瘤的能力。

總之，對T細胞亞群的變化情況進行檢測，特別是CD4+T/CD8+T比值的檢測，對AL患者的免疫功能的監(jiān)測以及臨床特征和預(yù)后有一定的臨床意義。