黃岸豪，黎土軒，孟 磊，謝建興

（廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科，廣州 510405）

前列腺癌的發(fā)生發(fā)展，可以導(dǎo)致患者病死率的上升，并可以導(dǎo)致多器官功能衰竭或者遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的發(fā)生，臨床預(yù)后較差。流行病學(xué)研究顯示，前列腺癌的發(fā)病率可達(dá)0.6%～1.6%左右［1］，特別是部分地區(qū)的發(fā)病率更高。近年來基礎(chǔ)領(lǐng)域的研究顯示，細(xì)胞生物學(xué)因子的改變，可以通過影響到癌細(xì)胞的增殖、凋亡或者侵襲能力等，進(jìn)而促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞對(duì)于臨近組織的浸潤(rùn)，促進(jìn)臨床分期的進(jìn)展。B淋巴細(xì)胞瘤-2（BCL2）是癌細(xì)胞凋亡的特異性抑制因子，BCL-2的上升可以顯著促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖活性，前列腺特異性抗原（PSA）是癌細(xì)胞分化、侵襲的特異性分子［2，3］，為了進(jìn)一步探討B(tài)CL2和PSA在前列腺癌病情進(jìn)展中的作用，本研究選取2014年2月～2015年12月在我院接受治療的前列腺癌患者為研究對(duì)象，探討了BCL2和PSA的異常表達(dá)及其與患者臨床病理特征間的關(guān)系，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 患者一般資料選取2014年2月～2015年12月在我院接受治療的前列腺癌患者為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡≥50周歲；（2）經(jīng)病理診斷確診為前列腺癌者；（3）無其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾病者；排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）臨床資料不全者；（2）合并其他部位原發(fā)腫瘤者；（3）不愿參與本項(xiàng)研究者。根據(jù)納入排除標(biāo)準(zhǔn)共納入研究對(duì)象110例，年齡52～72歲，平均62.24±3.18歲；前列腺增生組納入排除標(biāo)準(zhǔn)：年齡≥50周歲；無腫瘤疾病者。兩組患者在年齡等一般資料方面無明顯差別，具有可比性。本項(xiàng)研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)評(píng)審?fù)ㄟ^，且所有患者均知情同意。

1.2 檢測(cè)方法采用石蠟切片脫蠟至水，切片厚度3mm，3%H2O2室溫孵育 5 min，采用去離子水水沖洗3次，每次3min，采用濃度為10% 牛奶蛋白（1g蛋白加入100mL純水）封閉，室溫孵育 5min，加入BCL2和PSA抗體（鼠來源，南京碧云天生物科技有限公司），37 ℃ 孵育 2h，PBS緩沖液沖洗3次，每次5min，滴加HRP標(biāo)記的二抗（兔來源，購自羅氏檢測(cè)公司），37 ℃ 孵育 30 min，PBS 沖洗3次，每次5min，加入 NBT/BCIP色劑顯色 5min，復(fù)染，脫水，透明，封片，鏡下觀察。OLIPICS電子顯微鏡購自上海精密儀器有限公司，配套試劑購自南京泰康生物科技有限公司。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)觀察兩組患者BCL2和PSA陽性表達(dá)率，比較不同臨床病理特征前列腺癌患者BCL2和PSA陽性表達(dá)率的差異，分析影響B(tài)CL2和PSA陽性表達(dá)率的因素。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)錄入后，采用SPSS 11.5軟件進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)和計(jì)量資料分別采用例和均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。兩組患者和不同臨床病理特征前列腺癌患者BCL2和PSA陽性表達(dá)率的的比較采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行分析，采用Logistic回歸分析法分析影響B(tài)CL2和PSA陽性表達(dá)率的因素。P＜0.05：差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者BCL2和PSA陽性表達(dá)率的比較表1顯示，前列腺癌組患者的BCL2和PSA陽性表達(dá)率均高于前列腺增生組（χ2值=49.107、147.468，P＜0.001）。

表1 兩組患者BCL2和PSA陽性表達(dá)率的比較

2.2 不同臨床病理特征前列腺癌患者BCL2和PSA陽性表達(dá)率的比較表2顯示，中低分化、有轉(zhuǎn)移、TNM分期為Ⅲ+Ⅳ期、有浸潤(rùn)的前列腺癌患者的BCL2和PSA陽性表達(dá)率較高（P＜0.05），而不同年齡的前列腺癌患者的BCL2和PSA陽性表達(dá)率無明顯差別。

表2 不同臨床病理特征前列腺癌患者BCL2和PSA陽性表達(dá)率的比較

2.3 影響前列腺癌患者BCL2和PSA陽性表達(dá)率的因素將單因素分析有意義的分化程度、轉(zhuǎn)移情況、TNM分期和有無浸潤(rùn)作為自變量，將前列腺癌患者的BCL2和PSA陽性表達(dá)率作為因變量，進(jìn)行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果有無轉(zhuǎn)移和分化程度進(jìn)入回歸方程，說明轉(zhuǎn)移情況和分化程度是影響前列腺癌患者BCL2和PSA陽性表達(dá)率的因素，見表3。

表3-1 影響前列腺癌患者BCL2陽性表達(dá)率的因素

表3-2 影響前列腺癌患者PSA陽性表達(dá)率的因素

3 討論

前列腺癌的高危因素主要包括吸煙、高雄激素及遺傳因素等，長(zhǎng)期的發(fā)生發(fā)展過程中，前列腺癌病情的進(jìn)展可以導(dǎo)致多器官轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)或者臨近正常組織的浸潤(rùn)等，增加不良臨床預(yù)后的發(fā)生。臨床隨訪研究可以發(fā)現(xiàn)，前列腺癌的中位生存時(shí)間不足32個(gè)月，五年生存率不足35%，臨床治療效果較為局限［4］。而通過對(duì)于前列腺癌發(fā)病過程中相關(guān)生物學(xué)機(jī)制的研究，可以為臨床上前列腺癌的生物學(xué)治療、靶向治療等提供理論參考，并有利于進(jìn)一步揭示疾病的發(fā)生機(jī)制。

PSA蛋白是腫瘤相關(guān)特異性抗原，其能夠在影響前列腺移行上皮細(xì)胞膜表面的受體、前列腺細(xì)胞膜受體的雄激素敏感性等方面發(fā)揮作用，基礎(chǔ)領(lǐng)域的研究顯示PSA蛋白可以增加雄激素對(duì)于前列腺細(xì)胞的持續(xù)性刺激作用，導(dǎo)致前列腺病變的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)一步增加［5，6］。同時(shí)，PSA蛋白羧基末端上包含了多個(gè)巰基結(jié)構(gòu)，能夠通過結(jié)合移行細(xì)胞膜表面的糖蛋白，進(jìn)而誘導(dǎo)細(xì)胞早期惡變的發(fā)生［7，8］；BCL2是細(xì)胞凋亡抑制家族成員，其對(duì)于癌細(xì)胞的凋亡抑制作用，能夠持續(xù)性促進(jìn)癌細(xì)胞的擴(kuò)增，導(dǎo)致癌細(xì)胞的侵襲能力的增強(qiáng)及對(duì)于臨床正常組織的浸潤(rùn)［9，10］。本次研究在探討了PSA或者BCL2在前列腺癌組織中的異常表達(dá)的同時(shí)，揭示了其與患者臨床病理特征間的關(guān)系。

在本次研究中可以發(fā)現(xiàn)，前列腺癌組織中的BCL2和PSA的陽性表達(dá)率明顯高于無惡性病變的前列腺組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示BCL2和PSA可能參與到了前列腺癌的發(fā)生發(fā)展過程中，BCL2和PSA的高表達(dá)可以通過影響到癌細(xì)胞的細(xì)胞周期的比例、促進(jìn)癌細(xì)胞對(duì)于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附能力，增強(qiáng)癌病灶對(duì)于臨床正常組織的侵襲能力等方面發(fā)揮作用，進(jìn)而促進(jìn)了前列腺癌的病情進(jìn)展。董忠等［11，12］研究者在尋找可靠的前列腺癌的臨床預(yù)后指標(biāo)的過程中發(fā)現(xiàn)，BCL2和PSA在預(yù)后較差的患者中表達(dá)陽性率較高，高于預(yù)后較好組，且患者的BCL2和PSA陽性率越高，患者的病情越為嚴(yán)重，這與本次研究得到的相關(guān)結(jié)論較為一致。在不同的年齡前列腺癌患者組織中，并未發(fā)現(xiàn)BCL2和PSA的表達(dá)差異，但可以發(fā)現(xiàn)在發(fā)生了淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、癌細(xì)胞分化不良或者TNM分期較晚的患者中，相關(guān)指標(biāo)的陽性率較高，從機(jī)制上考慮而者與前列腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等的關(guān)系可能與下列因素有關(guān)［13］：（1）BCL2促進(jìn)了癌細(xì)胞的增殖調(diào)控異常，影響到了癌相關(guān)信號(hào)通路NOTCH的表達(dá)，提高了G1/S期比例，導(dǎo)致其細(xì)胞在泌尿系統(tǒng)組織中的播散；（2）PSA的表達(dá)上升，影響到了前列腺癌細(xì)胞的早期分化調(diào)節(jié)障礙，導(dǎo)致癌細(xì)胞分化不良。但需要注意的是，謝贛生等［14］研究者的研究并未發(fā)現(xiàn)PSA的表達(dá)與患者細(xì)胞分化程度的關(guān)系，這與本研究得到的結(jié)論存在一定的差別，主要考慮可能與臨床病例選擇過程中納入標(biāo)準(zhǔn)的不統(tǒng)一有關(guān)。最后，本研究發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移情況和分化程度是影響前列腺癌患者BCL2和PSA陽性表達(dá)率的因素，進(jìn)一步提示了BCL2和PSA與前列腺癌的關(guān)系。

綜上所述，前列腺癌患者的BCL2和PSA陽性表達(dá)率較高，且與患者的分化程度和有無轉(zhuǎn)移情況密切相關(guān)。但本研究對(duì)于二者的表達(dá)與患者遠(yuǎn)期生存預(yù)后的關(guān)系研究不足，存在一定的局限。