鄭赫

梅毒(Syhillis)是由梅毒螺旋體(Treponema pallidum,TP)引起的傳染病,其傳染特性明顯,一旦患者發(fā)生傳染,病毒會(huì)快速的攻占全身細(xì)胞,幾乎所有器官都難以避免［1］。而且因?yàn)榛疾€(gè)體的體質(zhì)差異、患病時(shí)間等因素的影響,臨床特征存在一定的差異性［2］,但是與其他普通疾病的癥狀相比又有很多相似性,因此導(dǎo)致誤診和漏診幾率都非常高。隨著人們性觀念的改變等,研究發(fā)現(xiàn)現(xiàn)在梅毒的發(fā)生率有升高的趨勢(shì),梅毒的發(fā)生會(huì)給患者身心造成很大的傷害,而且因?yàn)槠涮厥獾膫魅就緩?會(huì)給患者的伴侶以及家人造成恐慌等,大大降低了患者的生活質(zhì)量及幸福指數(shù)［3］。因此及時(shí)檢測(cè)確診對(duì)治療有著積極的意義。本文研究了TRUST 和TPPA 兩種抗體免疫學(xué)檢測(cè)方法在梅毒檢測(cè)臨床中的應(yīng)用情況,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2017 年12 月～2018 年12 月收治的150 例梅毒患者為研究對(duì)象,其中男80 例,年齡18～72 歲,平均年齡(44.03±10.98)歲；女70 例,年齡20～73 歲,平均年齡(45.88±10.07)歲。

1.2 儀器和試劑 ①TRUST(Syphilis Toluidine Red Untreated Serum Test) 試劑,(北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)有限公司,國(guó)藥準(zhǔn)字S10940068)；②TP-PA(Particle agglutination test of treponema pallidum)試劑,(上海華臣生物試劑有限公司,國(guó)藥準(zhǔn)字S10940058)。

1.3 方法

1.3.1 血液樣品的處理 采集患者空腹時(shí)靜脈血,按照標(biāo)準(zhǔn)要求使用相應(yīng)量的肝素進(jìn)行抗凝,隨后使用離心機(jī)進(jìn)行分離,取其上層血清約4 ml,注意在整個(gè)過(guò)程中要進(jìn)行無(wú)菌操作,確保標(biāo)本無(wú)溶血、無(wú)脂血而且沒(méi)有微生物污染,無(wú)需加熱滅活,直接用于試驗(yàn)檢測(cè)。

1.3.2 TRUST 方法 嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行使用,在室內(nèi)溫度適宜的條件下,首先對(duì)試劑進(jìn)行稀釋,稀釋濃度為1∶32,稀釋溶劑為普通生理鹽水,稀釋后在血液樣本當(dāng)中加入心磷脂應(yīng)用于抗原,隨后將待檢測(cè)的血液樣本放置于振蕩器中進(jìn)行水平振蕩,振蕩時(shí)間為8 min,注意在振蕩過(guò)程中每間隔1 min,振蕩的次數(shù)為100 次；振蕩過(guò)程中要密切關(guān)注,如果出現(xiàn)凝集要進(jìn)行及時(shí)記錄,確定血液呈現(xiàn)陽(yáng)性時(shí)候的滴度。

1.3.3 TPPA 方法 嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行使用,在適宜的室內(nèi)溫度條件下,首先使用稀釋液將U 型板上的血清樣本進(jìn)行充分的稀釋,稀釋完成后依次加入未致敏明膠顆粒、致敏明膠顆粒,然后將血液樣本孵育至少2 h,在過(guò)程中密切關(guān)注反應(yīng)情況,對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及時(shí)記錄。

1.4 觀察指標(biāo) 比較兩組方法對(duì)梅毒分期及總檢測(cè)準(zhǔn)確率。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

病理結(jié)果顯示：150 例患者均為梅毒感染患者,其中梅毒Ⅰ期90 例,Ⅱ期40 例,Ⅲ期20 例。TPPA 對(duì)梅毒Ⅰ期、Ⅲ期的檢出準(zhǔn)確率分別為95.56%、100.00%,均高于TRUST 的83.33%、80.00%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；兩種檢測(cè)方法對(duì)梅毒Ⅱ期的檢出準(zhǔn)確率均為100.00%,比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。TPPA 對(duì)梅毒的檢出總準(zhǔn)確率為97.33%(146/150),高于TRUST的87.33%(131/150),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩種方法檢測(cè)準(zhǔn)確率比較［n(%)］

3 討論

梅毒作為最常見(jiàn)的臨床傳染性疾病,其危害性極大。梅毒發(fā)病機(jī)理是機(jī)體感染了梅毒螺旋體,梅毒螺旋體是梅毒的病原體,其具有透明、不易著色的特點(diǎn),又被稱為蒼白螺旋體［4］,其抗原分為三種：一是螺旋體表面特異性抗原,可以刺激機(jī)體產(chǎn)生特異的凝集抗體及密螺旋體制動(dòng)或溶解抗體；二是螺旋體內(nèi)類屬抗原,可以產(chǎn)生補(bǔ)體結(jié)合抗體,與非病原性螺旋體有交叉反應(yīng)；三是螺旋體與宿主組織磷脂形成的復(fù)合抗原,當(dāng)螺旋體侵入組織后,組織中的磷脂可粘附在螺旋體上,形成復(fù)合抗原可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗磷脂的自身免疫抗體。梅毒一般會(huì)通過(guò)直接接觸、間接接觸以及胎盤傳染三種途徑進(jìn)行傳播感染。其中直接接觸傳染又分為性直接接觸、非性直接接觸傳染兩種,性直接接觸傳染在所有傳染中所占的比例最多,是最主要的傳播途徑之一［5］。梅素螺旋體對(duì)于溫度和干燥具有很高的敏感性,通常離體干燥一到兩個(gè)小時(shí)就會(huì)死亡,而且對(duì)于對(duì)化學(xué)消毒劑、一些藥品如青霉素、四環(huán)素、砷劑等也存在很高的敏感性［6］。

人體是梅毒唯一的自然傳染源,也就是唯一宿主,通常分為先天性梅毒和后天性梅毒兩種。先天性梅毒是指母體患有梅毒通過(guò)妊娠將梅毒螺旋體傳染給胎兒,通常會(huì)在胎兒體內(nèi)大量繁殖造成胎兒機(jī)體組織發(fā)生病變,導(dǎo)致流產(chǎn)或者胎死腹中［7］；大多數(shù)的梅毒感染者屬于后天傳染,按照傳染過(guò)程分為三期：Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期,Ⅰ期和Ⅱ期又統(tǒng)稱為早期梅毒,此期傳染性強(qiáng)而破壞性小,Ⅲ期梅毒又稱為晚期梅毒,該期傳染性小、病程長(zhǎng)而破壞性大［8］。Ⅰ期梅毒是指梅毒螺旋體侵入皮膚黏膜約3 周后,再侵入局部出現(xiàn)無(wú)痛性硬結(jié)及潰瘍,稱為硬性下疳。局部組織鏡檢可見(jiàn)淋巴細(xì)胞及巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)。下疳多發(fā)生于外生殖器,其潰瘍滲出物含有大量梅毒螺旋體,傳染性極強(qiáng)。下疳?？勺匀挥?約2～3 個(gè)月無(wú)癥狀的隱伏期后進(jìn)入第Ⅱ期。Ⅱ期梅毒：進(jìn)入Ⅱ期后其主要表現(xiàn)為全身皮膚黏膜出現(xiàn)梅毒疹,全身淋巴結(jié)腫大,有時(shí)亦累及骨、關(guān)節(jié)、眼及其他器官。在梅毒疹及淋巴結(jié)中有大量螺旋體。不經(jīng)治療癥狀一般可在3 周～3 個(gè)月后自然消退而全愈；部分病例經(jīng)隱伏3～12 個(gè)月后可再發(fā)作,但是要特別注意Ⅱ期梅毒如果治療不當(dāng),經(jīng)過(guò)5 年或更久的反復(fù)發(fā)作,而進(jìn)入Ⅲ期。Ⅲ期梅毒：主要表現(xiàn)為皮膚黏膜的潰瘍性損害或內(nèi)臟器官的肉芽腫樣病變(梅毒瘤),嚴(yán)重者在經(jīng)過(guò)10～15 年后引起心血管及中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害,導(dǎo)致動(dòng)脈瘤、脊髓癆及全身麻痹等,此期的病灶中螺旋體很少,不易檢出。

梅毒的強(qiáng)危害性以及傳染性通常會(huì)給患者造成很大的傷害,及時(shí)的診斷治療可以有效阻斷進(jìn)一步的傳播。目前較為常用的方法為梅毒抗體檢測(cè)是免疫學(xué)檢測(cè)方法,TRUST 和TPPA 是其中使用較高的方法。TRUST 是采用抗原抗體凝集反應(yīng)中的抗原抗體凝集反應(yīng),其原理是：將梅毒(Nichols 株)的精制菌體成分包被在人載體明膠粒子上,這種致敏粒子會(huì)和樣品中的梅毒螺旋體抗體發(fā)生凝集反應(yīng)從而產(chǎn)生粒子凝集反應(yīng)抗體,并且可用來(lái)測(cè)定抗體效價(jià),此方法的優(yōu)勢(shì)是反應(yīng)素滴度動(dòng)態(tài)變化,可以應(yīng)用于治療效果的觀察,或者復(fù)發(fā)以及治愈后再次感染后的檢測(cè),此方法最大優(yōu)點(diǎn)是其操作非常簡(jiǎn)便而且費(fèi)用低廉,進(jìn)行廣譜性檢查時(shí)快速有效,但是其主要缺點(diǎn)是無(wú)法明確反映出以往是否發(fā)生過(guò)感染,而且如果患者同時(shí)感染了相關(guān)性的疾病,就很有可能檢測(cè)出假陽(yáng)性結(jié)果［9］。TPPA 方法的主要原理是蒼白螺旋體致敏明膠顆?？梢耘c患者血清當(dāng)中的梅毒螺旋體抗體發(fā)生結(jié)合反應(yīng),從而形成凝集效應(yīng),使用TPPA 時(shí)其檢測(cè)陽(yáng)性率相對(duì)較高,作為篩選陽(yáng)性標(biāo)本復(fù)檢以及發(fā)生疑似感染時(shí)進(jìn)行確診實(shí)驗(yàn)時(shí)十分有效。但是也要看到,只要患者感染梅毒螺旋體,其檢測(cè)結(jié)果就會(huì)一直顯示陽(yáng)性,無(wú)法判定其梅毒病程,還需要結(jié)合其他方法進(jìn)行分析確認(rèn)［10］。

本文研究結(jié)果可知,病理結(jié)果顯示：150 例患者均為梅毒感染患者,其中梅毒Ⅰ期90 例,Ⅱ期40 例,Ⅲ期20 例。TPPA 對(duì)梅毒Ⅰ期、Ⅲ期的檢出準(zhǔn)確率均高于TRUST,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；兩種檢測(cè)方法對(duì)梅毒Ⅱ期的檢出準(zhǔn)確率均為100.00%,比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。TPPA 對(duì)梅毒的檢出總準(zhǔn)確率高于TRUST,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。因此說(shuō)明TPPA 方法在臨床中使用價(jià)值相對(duì)更高。張林麗等［11］對(duì)比了四種梅毒抗體檢測(cè)方法,同樣發(fā)現(xiàn)TPPA 方法檢測(cè)結(jié)果敏感度更高,與本文研究結(jié)果一致。

綜上所述,采用TPPA 方法檢測(cè)梅毒優(yōu)于TRUST方法,可以為臨床診斷提供重要依據(jù),具有很高的臨床推廣使用價(jià)值。