□ 羅 妍 劉家麒 上海德諾產(chǎn)品檢測有限公司

食品是人類攝入營養(yǎng)物質(zhì)的主要來源，并且與人類健康有著密切的聯(lián)系。隨著人們生活水平的不斷提高，對食品的質(zhì)量與安全的要求也隨之越來越高。食品微生物檢驗(yàn)的目的就是生產(chǎn)出安全、衛(wèi)生、符合標(biāo)準(zhǔn)的食品。然而，作為食品微生物檢測的前道工序，如何做好食品微生物實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作至關(guān)重要。本文將從微生物實(shí)驗(yàn)前試劑的配制、實(shí)驗(yàn)器材的滅菌、實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境要求、實(shí)驗(yàn)所用器材的維護(hù)與保養(yǎng)以及最后樣品接收時的核對工作展開論述，淺談食品微生物實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作的重要性，以便做好實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作，為實(shí)驗(yàn)的后續(xù)開展及有效性提供有效保障。

本文將從5個部分開展論述：實(shí)驗(yàn)試劑的配制；實(shí)驗(yàn)器材的滅菌；實(shí)驗(yàn)室的清潔；實(shí)驗(yàn)室器材的檢查與維護(hù)與接收樣品時的核對工作。

實(shí)驗(yàn)試劑的配制

實(shí)驗(yàn)試劑的配制數(shù)量是根據(jù)每天樣品檢測量多少而決定的，也是檢測的一道重要前序工作。

嚴(yán)格按照使用說明配制

每種試劑的瓶身都會有使用說明，其中包含配制方法。配制試劑、培養(yǎng)基時必須嚴(yán)格按照配制說明進(jìn)行配制，不能憑經(jīng)驗(yàn)一概而論。有時生產(chǎn)廠家、培養(yǎng)基種類不同，配制方法及使用說明也會有所不同。在配制結(jié)束后應(yīng)及時記錄，絕不允許隔天補(bǔ)記。培養(yǎng)基需要每隔一段時間要進(jìn)行檢查，防止使用已經(jīng)過期的培養(yǎng)基從而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性受到影響。

配制過程中的誤差避免

無論微生物實(shí)驗(yàn)還是理化實(shí)驗(yàn)，很多時候都需要確保實(shí)驗(yàn)的精準(zhǔn)性。培養(yǎng)基配制誤差是直接導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏離的一大主要因素。所以在微生物實(shí)驗(yàn)中培養(yǎng)基配制過程中應(yīng)避免人為誤差。尤其稱取培養(yǎng)基時應(yīng)拿藥勺少量多次精確稱取，稱過量的試劑應(yīng)廢棄，不應(yīng)往回倒，防止整瓶試劑或培養(yǎng)基污染或受潮。

實(shí)驗(yàn)器材的滅菌

微生物實(shí)驗(yàn)主要就是講究無菌操作，滅菌效果也是微生物實(shí)驗(yàn)的一大重要組成因素。如果空白對照有菌落生長，說明配制的試劑滅菌不徹底，或是培養(yǎng)皿滅菌不徹底致，那么實(shí)驗(yàn)將會失效。

滅菌時間

不同物品的滅菌時間不同，具體參考表1。

表1 常見物品的滅菌時間

滅菌方法

常見的滅菌方法有物理滅菌法和化學(xué)滅菌法兩種。微生物室最常用的滅菌方法就是物理滅菌法中的干熱滅菌法和濕熱滅菌法。

使用干熱空氣殺滅微生物的方法叫做干熱滅菌法。即：161 ℃持續(xù)加熱2 h。干熱滅菌法常用于空玻璃儀器、金屬器具的滅菌。凡帶有塑料橡膠的物品、液體培養(yǎng)基及試劑均不適用于干熱滅菌法。

常用的濕熱滅菌法有巴氏滅菌法、煮沸滅菌法、流動蒸汽消毒法及高壓蒸汽滅菌法。其中，高壓蒸汽滅菌法用途廣、效率高，是微生物實(shí)驗(yàn)室最常用的滅菌方法。當(dāng)蒸汽壓力達(dá)到103.1 KPa時，水蒸氣的溫度升高到121 ℃，經(jīng)過15～20 min，可全部殺死鍋內(nèi)物品上的各種微生物和它們的孢子或芽孢。此法適用于耐高溫而又不怕蒸汽的物品滅菌。

檢查是否滅菌徹底

檢查濕熱滅菌的效果需要使用濕熱滅菌指示膠帶，滅菌后膠帶上有黑色條紋狀出現(xiàn)。檢查干熱滅菌的效果需要使用干熱滅菌指示卡，滅菌后指示卡呈深棕色。此外，滅菌指示計(jì)應(yīng)合理保存，不應(yīng)敞露在空氣中。每天實(shí)驗(yàn)前所準(zhǔn)備的需要滅菌的物品都需要貼上相應(yīng)的指示條，檢查滅菌是否徹底。如果培養(yǎng)皿、試劑、試管等微生物實(shí)驗(yàn)器材滅菌不徹底將會導(dǎo)致整個實(shí)驗(yàn)失效。

實(shí)驗(yàn)室的清潔

實(shí)驗(yàn)室是進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)的地方，不僅要保證實(shí)驗(yàn)室的安全，還要保持實(shí)驗(yàn)室的清潔與衛(wèi)生，為科學(xué)實(shí)驗(yàn)創(chuàng)造良好的環(huán)境。同時，好的檢測環(huán)境也保證了檢驗(yàn)質(zhì)量，提升數(shù)據(jù)可靠性。

實(shí)驗(yàn)室清潔

實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員需要負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)室的衛(wèi)生工作，并定期記錄。養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣非常重要。每次微生物實(shí)驗(yàn)后都需要打掃清潔，并填寫記錄。無菌室內(nèi)需放置75%濃度的酒精棉球，多用于實(shí)驗(yàn)前消毒。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后可以用消毒水浸泡過的抹布擦拭桌面，以達(dá)到良好的清潔效果，消毒清潔后的無菌室應(yīng)用紫外燈照射1 h。此外，觀察室、待滅菌器材桌面也需要經(jīng)常用干凈抹布擦拭。特別需要注意的是，無菌室內(nèi)的消毒抹布不能與無菌室外的其他抹布混用，防止交叉污染。

紫外燈的使用

紫外燈一般是在實(shí)驗(yàn)前1 h開啟,開啟后人員不得進(jìn)入無菌室。做完實(shí)驗(yàn)，人員打掃完實(shí)驗(yàn)室后再次開啟1 h。與此同時，每天的無菌室紫外燈滅菌記錄應(yīng)同步填寫，保證實(shí)驗(yàn)室滅菌效果的同時，也要保證記錄的按時、準(zhǔn)確填寫，以及記錄的真實(shí)性。無菌室紫外燈剛關(guān)閉后不能立即進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，更不能在紫外線菌燈開啟的狀態(tài)下進(jìn)行微生物實(shí)驗(yàn)，這樣會對人體造成傷害。紫外線菌燈需要定期維護(hù)更換，以確保滅菌效果。

實(shí)驗(yàn)室器材的檢查與維護(hù)

實(shí)驗(yàn)室的各種儀器是單位的固有資產(chǎn)，使用或維護(hù)不當(dāng)就會造成機(jī)器損壞，給單位帶來不必要的經(jīng)濟(jì)損失。

移液管的準(zhǔn)備工作

目前，1 mL和10 mL玻璃移液管是中小型食品企業(yè)微生物實(shí)驗(yàn)用的較多的玻璃儀器。那么，移液管在實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備前夕，一旦操作不當(dāng)就會造成頭端破損，從而導(dǎo)致定量實(shí)驗(yàn)的精準(zhǔn)性受到影響。每天用完的移液管需要輕拿輕放，洗凈后烘干，最后需要在尾部塞少量棉花后（做實(shí)驗(yàn)起阻隔細(xì)菌的作用）方可滅菌。滅菌前需要讓移液管呈75°方向角緩慢傾斜放入滅菌桶，如果垂直放置會較為容易導(dǎo)致移液管頭端破損。玻璃儀器中，之所以強(qiáng)調(diào)移液管，是因?yàn)橄啾仍嚬芎团囵B(yǎng)皿，移液管是用于微生物檢驗(yàn)定量的實(shí)驗(yàn)器材，它決定了實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。經(jīng)過長期一段時間的不當(dāng)操作，將會導(dǎo)致玻璃移液管由于實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作操作不當(dāng)而損壞報(bào)廢。此外，檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)由于樣品檢測量較大，一般會選用移液槍進(jìn)行微生物檢測。

實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的維護(hù)

微生物實(shí)驗(yàn)室的恒溫培養(yǎng)箱是相對比較昂貴的儀器，也是微生物檢驗(yàn)的必備儀器。根據(jù)檢測樣品的培養(yǎng)溫度需要，每個培養(yǎng)箱都會設(shè)定不同的溫度值。每天進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后首先就需要檢查每個培養(yǎng)箱是否正常運(yùn)行，溫濕度是否正常，加濕器剩余水量情況，并做好相關(guān)記錄，確保實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)物能得到及時、有效培養(yǎng)。培養(yǎng)箱的維護(hù)至關(guān)重要，由于維護(hù)不當(dāng)造成損壞，將會對單位造成不必要的損失。

高壓滅菌鍋和烘箱的使用具有一定的危險(xiǎn)性，相關(guān)人員需要經(jīng)過專業(yè)的培訓(xùn)后方可操作，操作不當(dāng)可能造成人身傷害。這兩種設(shè)備都需要年檢合格才能繼續(xù)使用，高壓滅菌鍋需要使用人員定期排水和注水、規(guī)范操作，延長使用壽命。

樣品接收工作

核對樣品

檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)中的采樣人員每天都會把當(dāng)天采集的樣品帶回，由發(fā)樣人員在抽樣單上貼上檢測編號后，由微生物相關(guān)檢測專員根據(jù)檢測指標(biāo)進(jìn)行檢測。檢測前的最后一步就是核對樣品是否存在發(fā)樣問題，防止進(jìn)入無菌室進(jìn)行檢測時才發(fā)現(xiàn)樣品數(shù)量缺少等問題導(dǎo)致無法檢測。

不接收任何與抽樣、檢測要求不符的樣品

在接收樣品時首先需要核對每個樣品的編號，如分級采樣的樣品一般1個編號為5件同種樣品，當(dāng)發(fā)現(xiàn)檢測數(shù)量不符或檢測量不夠時，要及時和發(fā)樣人員聯(lián)系，不檢測任何不符合要求的樣品。如果發(fā)樣編號貼錯，應(yīng)與發(fā)樣人員確認(rèn)后開始檢測，確保檢測的有效性。此外，遇見疑似不做微生物指標(biāo)檢測的樣品，應(yīng)及時確認(rèn)，如果確實(shí)是樣品發(fā)錯，立即退還發(fā)樣人員。

食品企業(yè)樣品微生物檢測樣品數(shù)量是根據(jù)不同生產(chǎn)情況而定的，檢測前也需要核對樣品種類與數(shù)量。

總結(jié)

綜上所述，全文針對實(shí)驗(yàn)試劑的配制、實(shí)驗(yàn)器材的滅菌、實(shí)驗(yàn)室的清潔、實(shí)驗(yàn)室器材的檢查與維護(hù)、接收樣品時的核對工作等方面進(jìn)行了闡述。由此可見，微生物實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作是非常重要的，它是微生物實(shí)驗(yàn)的前道工序，決定了微生物實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和有效性。經(jīng)過本文的闡述，想必大家對之會有了一定的了解。

最后本人學(xué)識有限，如果有所疏漏或問題也希望廣大讀者能夠不吝提出、指正，本人深表感激！