曹 敏，張 瑞，鐘 婷，虞道耿，陳銀華，駱 凱

（1. 海南大學(xué)熱帶作物學(xué)院，海南 海口 570228；2. 中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作

鄉(xiāng)土草的馴化選育和推廣利用不僅是解決我國(guó)牧草新品種緊缺的快捷和可行之途，還是一項(xiàng)符合國(guó)際發(fā)展趨勢(shì)的長(zhǎng)期性工作[1]。摸清不同鄉(xiāng)土草種生物學(xué)和生態(tài)學(xué)特性，尤其是種子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)特性，是其馴化選育、高效栽培和推廣建植的重要前提。因?yàn)榉N子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)時(shí)期是植物生活史中最敏感和脆弱的階段，易受多種環(huán)境因子的綜合影響[2-3]；加之種子萌發(fā)特性在物種間具有很大的變異，共同決定了植物進(jìn)入生態(tài)系統(tǒng)的時(shí)間和幼苗期耐受生存環(huán)境的能力[4]。因此，研究多環(huán)境因素對(duì)種子萌發(fā)的影響，有助于掌握和預(yù)測(cè)物種的時(shí)空分布、建植率和收獲量等信息，也為鄉(xiāng)土草優(yōu)質(zhì)栽培和新品種推廣提供有用的參考數(shù)據(jù)[5-6]。

硬皮豆(Macrotyloma uniflorum)，豆科硬皮豆屬一年生鄉(xiāng)土草，具抗旱、耐貧瘠、抗病蟲(chóng)害、生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)、粗放管理等優(yōu)點(diǎn)，被認(rèn)為是一種優(yōu)良的綠肥和飼料作物[7]。有報(bào)道稱(chēng)，該物種的干種子蛋白質(zhì)含量為23%～26%，脂肪含量0.9%左右，也是海南本地的一種低脂、高蛋白食用豆類(lèi)食品[8]。崖州硬皮豆出苗快、長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)、葉量多，與田間雜草競(jìng)爭(zhēng)力強(qiáng)，可作為種木薯(Manihot esculenta)或其他果園優(yōu)良的行間控草作物，應(yīng)用前景廣闊。

關(guān)于崖州硬皮豆，目前僅見(jiàn)生物學(xué)特征和營(yíng)養(yǎng)栽培研究的報(bào)道。崖州硬皮豆為海南特有的農(nóng)家品種，具有多項(xiàng)優(yōu)良性狀，其葉片具有敏感的感光性膨壓運(yùn)動(dòng)特性，能夠調(diào)節(jié)葉面水分蒸騰強(qiáng)度，根系發(fā)達(dá)，根瘤豐富，發(fā)展崖州硬皮豆生產(chǎn)可對(duì)海南西南部秋冬旱季土地起到用養(yǎng)結(jié)合的良好效果；同時(shí)還可以作為常規(guī)和基因工程育種的寶貴材料[7,9]。崖州硬皮豆的馴化選育是鄉(xiāng)土草資源開(kāi)發(fā)利用的一項(xiàng)科研成果，但相關(guān)的生物學(xué)和生態(tài)學(xué)特性掌握甚少，這將成為全面發(fā)掘該品種生產(chǎn)和生態(tài)服務(wù)功能的阻礙?；诖?，本研究以采自海南島的崖州硬皮豆為材料，在實(shí)驗(yàn)室模擬條件下分析不同溫度、光照、水勢(shì)、鹽分和埋深對(duì)種子萌發(fā)和出苗的影響，探討種子萌發(fā)特性對(duì)環(huán)境變化的適應(yīng)對(duì)策，為崖州硬皮豆種子學(xué)研究奠定基礎(chǔ)，也為引種馴化和開(kāi)發(fā)利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

崖州硬皮豆種子由中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供。種子于2019 年1 月采于海南省東方市感城鎮(zhèn)(18°50′ N,108°38′ E)，經(jīng)人工清選干燥后，置于中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶牧草研究中心種子庫(kù)(4 ℃)貯存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 種子千粒重測(cè)定

隨機(jī)數(shù)取100 粒種子稱(chēng)其重量，重復(fù)8 次，計(jì)算平均值。最終求得崖州硬皮豆的千粒重為(27.5 ±0.3) g。

1.2.2 種子硬實(shí)率測(cè)定

采用紙上萌發(fā)法測(cè)定所有供試種種子硬實(shí)率，隨機(jī)數(shù)取50 粒飽滿(mǎn)種子置于墊有雙層濾紙、直徑為11 cm 的干凈培養(yǎng)皿中，4 次重復(fù)，將培養(yǎng)皿置于25 ℃ (光照12 h，黑暗12 h)條件下培養(yǎng)，適時(shí)補(bǔ)充水分以保持萌發(fā)床濕潤(rùn)，第28 天統(tǒng)計(jì)未吸脹種子數(shù)(種子吸水3 d 后，所有吸水種子數(shù)目均不再增加)。最終求得崖州硬皮豆的硬實(shí)率為(32.0 ±3.6)%。后續(xù)試驗(yàn)在開(kāi)始前，種子均用解剖刀人工切破種皮，以破除硬實(shí)，之后將破除硬實(shí)的種子貯藏在室溫條件下，一周內(nèi)使用。

1.2.3 種子萌發(fā)的溫度和光照設(shè)置

同上使用紙上萌發(fā)法，分別置于恒溫15、20、25、30、35、40、45 ℃和變溫10 ℃/25 ℃、15 ℃/30 ℃、20 ℃/35 ℃條件下進(jìn)行培養(yǎng)。各溫度處理下分別設(shè)置光暗交替(12 h/12 h)和黑暗(24 h)兩個(gè)處理，其中黑暗處理采用雙層錫紙包裹培養(yǎng)皿模擬全黑暗條件的方法，每個(gè)處理設(shè)置4 個(gè)重復(fù)。以胚根突破種皮作為判斷種子萌發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)，為得到更詳細(xì)的種子萌發(fā)動(dòng)態(tài)，在種子吸水后萌發(fā)速率最快的時(shí)間段(前48 h)增加統(tǒng)計(jì)次數(shù)，之后每24 h統(tǒng)計(jì)一次萌發(fā)數(shù)，試驗(yàn)持續(xù)兩周。

1.2.4 水勢(shì)脅迫和NaCl 脅迫設(shè)置

同上使用紙上萌發(fā)法，在30 ℃、12 h/12 h 光暗交替的培養(yǎng)條件下，根據(jù)Michel 和Kaufmann[10]的方法及計(jì)算公式分別設(shè)置水勢(shì)為0 (CK)、 -0.2、-0.4、 -0.6、 -0.8、 -1.0、 -1.2 MPa 的PEG-6000溶液。相同培養(yǎng)條件下，分別設(shè)置0 (CK)、50、100、150、200、250、300、400 mmol·L-1的NaCl溶液。每個(gè)處理設(shè)置4 個(gè)重復(fù)，每重復(fù)50 粒種子，每24 h 統(tǒng)計(jì)一次，持續(xù)兩周，萌發(fā)標(biāo)準(zhǔn)同上。試驗(yàn)期間，每隔2 d 更換一次溶液以保持相對(duì)恒定的溶液濃度。

1.2.5 埋深設(shè)置

采用盆缽法，分別設(shè)置0、1、2、3、4、5、6、7 cm 共8 個(gè)埋深梯度，每個(gè)處理設(shè)4 個(gè)重復(fù)，每重復(fù)20 粒種子。試驗(yàn)基質(zhì)為農(nóng)田表層土壤，經(jīng)130 ℃高 溫 消 毒 處 理6 h。每24 h 統(tǒng) 計(jì) 一 次 出 苗率，以崖州硬皮豆子葉突出表層視為出苗，連續(xù)5 d沒(méi)有種子出苗視為試驗(yàn)結(jié)束，試驗(yàn)周期為21 d。

1.3 數(shù)據(jù)分析

1.3.1 萌發(fā)和出苗指標(biāo)

萌發(fā)(出苗)率 = (n/N) × 100%；

式中：n 為全部萌發(fā)(出苗)的種子數(shù)，N 為供試種子數(shù)。

萌發(fā)速率：采用Germinator 軟件包計(jì)算萌發(fā)達(dá)到非硬實(shí)種子數(shù)50%所需的時(shí)間(t50)，種子萌發(fā)速率用1/t50表示。

1.3.2 種子萌發(fā)的溫度模型

采用種子萌發(fā)速率與溫度(T，℃)模型，計(jì)算公式[11-12]為1/t50= k + mt。根據(jù)擬合出的方程式計(jì)算出最低臨界溫度(Tb)、最適萌發(fā)溫度(To)以及最高臨界溫度(Tc)。

1.3.3 統(tǒng)計(jì)分析與作圖

采用SPSS 20.0 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，根據(jù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行獨(dú)立樣本T 檢驗(yàn)或雙因素方差分析(ANOVA)，采用Duncan’s 法對(duì)平均值進(jìn)行多重比較。所有數(shù)據(jù)的錄入和作圖均使用Excel 2010 軟件。

2 結(jié)果

2.1 溫度和光照互作對(duì)崖州硬皮豆種子萌發(fā)的影響

溫度、光照及二者互作對(duì)崖州硬皮豆種子萌發(fā)速率有一定影響，其中溫度對(duì)種子萌發(fā)速率(1/t50)影響極顯著(P＜0.01)，而光照對(duì)萌發(fā)速率(1/t50)的 影 響 不 顯 著(P ＞ 0.05) (表1)。恒 溫 條 件下，崖州硬皮豆種子萌發(fā)率隨溫度升高，整體呈先上升后下降的趨勢(shì)。萌發(fā)溫度在低于20 ℃和高于40 ℃時(shí)顯著下降(P＜0.05)，在10 ℃和45 ℃條件下種子均不萌發(fā)。萌發(fā)率在10 ℃/25 ℃、15 ℃/30 ℃和20 ℃/35 ℃之間差異不顯著(P ＞ 0.05)，3 個(gè)變溫均顯著低于20、25、30 和35 ℃恒溫(P＜0.05)，但顯著高于低溫10 、15 ℃和高溫45 ℃ (P＜0.05)。僅在15 ℃時(shí)，光照條件下的崖州硬皮豆種子萌發(fā)率顯著高于黑暗條件下的(P＜0.05)，而在其他溫度條件下，光照和黑暗對(duì)種子萌發(fā)率的影響均不顯著(P ＞ 0.05) (圖1)。

光暗交替(12 h/12 h)和黑暗(24 h)下，崖州硬皮豆種子萌發(fā)速率與恒溫溫度的線性關(guān)系表現(xiàn)出相似的結(jié)果。隨著溫度的升高，種子萌發(fā)速率(1/t50)呈現(xiàn)明顯的先升高后降低的趨勢(shì)；種子萌發(fā)速率(1/t50)在0 ～ 30 ℃區(qū)間里與溫度呈直線正相關(guān)關(guān)系，在30 ～ 45 ℃時(shí)與溫度呈直線負(fù)相關(guān)關(guān)系(圖2)。根據(jù)種子萌發(fā)速率(1/t50)和溫度之間的線性關(guān)系方程，推算出光照條件下Tb、To、Tc分別為11.0、32.8 和45.5 ℃，黑暗條件下Tb、To、Tc分別為13.4、32.4 和45.9 ℃。

表 1 溫度、光照及其互作對(duì)崖州硬皮豆種子萌發(fā)影響的雙因素方差分析Table 1 Two-way ANOVA for the effects of temperature, light, and their interaction on the germination of Macrotyloma uniflorum ‘Yazhou’

圖 1 光照和溫度對(duì)崖州硬皮豆種子萌發(fā)率的影響Figure 1 Effects of light and temperature on the germination percentage and index of M. uniflorum ‘Yazhou’

圖 2 種子萌發(fā)速率(1/t50)與萌發(fā)溫度的線性關(guān)系Figure 2 Linear regression of germination rate (1/t50)as a function of temperature

2.2 水分脅迫和NaCl 脅迫對(duì)崖州硬皮豆種子萌發(fā)的影響

崖州硬皮豆種子萌發(fā)率和萌發(fā)速率隨滲透勢(shì)脅迫的加劇而降低(表2)。水勢(shì)在-0.4～0 MPa 的種子萌發(fā)率無(wú)顯著差異(P ＞ 0.05)，且均超過(guò)99%。水勢(shì)從 -0.6 MPa 開(kāi)始，種子萌發(fā)率顯著降低(P ＜0.05)，達(dá)到 -1.2 MPa 時(shí)，萌發(fā)率僅為6.5%。

隨著NaCl 濃度的增加，崖州硬皮豆種子的萌發(fā)率呈逐漸下降的趨勢(shì)(表3)。當(dāng)NaCl 溶液濃度低于200 mmol·L-1時(shí)，崖州硬皮豆種子的萌發(fā)率相比較未處理(CK)條件下無(wú)顯著變化(P ＞ 0.05)；而NaCl 溶液濃度處于250～400 mmol·L-1時(shí)，崖州硬皮豆的萌發(fā)率被顯著抑制 (P＜0.05)。崖州硬皮豆種子萌發(fā)速率(1/t50)與NaCl 濃度呈明顯的負(fù)相關(guān)關(guān)系。

表 2 水分脅迫對(duì)崖州硬皮豆種子萌發(fā)率和1/t50 的影響Table 2 Effects of water stress on germination percentage and 1/t50 of M. uniflorum ‘Yazhou’

表 3 NaCl 脅迫對(duì)崖州硬皮豆種子萌發(fā)率和1/t50 的影響Table 3 Effects of NaCl stress on germination percentage and 1/t50 of M. uniflorum ‘Yazhou’

崖州硬皮豆種子萌發(fā)率和萌發(fā)速率隨滲透勢(shì)脅迫的加劇而降低(表2)。水勢(shì)在-0.4～0 MPa 的種子萌發(fā)率無(wú)顯著差異(P ＞ 0.05)，且均超過(guò)99%。水勢(shì)從 -0.6 MPa 開(kāi)始，種子萌發(fā)率顯著降低(P ＜0.05)，達(dá)到 -1.2 MPa 時(shí)，萌發(fā)率僅為6.5%。

2.3 埋藏深度對(duì)崖州硬皮豆種子出苗的影響

隨著埋藏深度的增加，崖州硬皮豆種子出苗率呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)(圖3)。埋藏深度在0～6 cm 時(shí)，崖州硬皮豆均有不同程度的出苗率，在1 和2 cm 埋深條件下出苗率較高，之后隨著埋藏深度的增加顯著下降(P＜0.05)，達(dá)到7 cm 時(shí)種子出苗率為0。埋藏深度在0 cm 時(shí)的出苗率顯著低于1 cm 的(P＜0.05)。

圖 3 埋藏深度對(duì)崖州硬皮豆種子出苗率的影響Figure 3 Effects of burial depth on seedling percentage of M. uniflorum ‘Yazhou’

3 討論

3.1 溫度和光照對(duì)崖州硬皮豆種子萌發(fā)的影響

種子萌發(fā)是一個(gè)極其活躍的生理生化過(guò)程，伴隨著一系列酶催化的物質(zhì)代謝反應(yīng)，而溫度影響酶的活性，在最適溫度范圍內(nèi)，酶的活性最強(qiáng)，因此適宜的溫度成為影響種子萌發(fā)的主要因素之一[13]。這一范圍內(nèi)，溫度過(guò)低或過(guò)高都不利于種子的萌發(fā)，通常使用溫度三基點(diǎn)(最低、最適、最高)來(lái)描述一個(gè)物種所能萌發(fā)的溫度范圍[14]。本研究根據(jù)種子萌發(fā)速率與萌發(fā)溫度的線性回歸方程推算，在11～46 ℃內(nèi)崖州硬皮豆可萌發(fā)，且在20～ 40 ℃下具有91%以上的萌發(fā)率，可見(jiàn)崖州硬皮豆種子具有廣闊的萌發(fā)溫幅，能在較大的溫度范圍內(nèi)建植。多數(shù)情況下，變溫環(huán)境相比較恒溫環(huán)境更有利于種子萌發(fā)。以羊草(Leymus chinensis)種子萌發(fā)特性最為典型，在28 ℃或35 ℃恒溫條件下，種子幾乎不發(fā)芽，當(dāng)處于5 ℃/28 ℃、5 ℃/35 ℃和16 ℃/28 ℃變溫時(shí)，種子萌發(fā)率可超過(guò)80%[15]。但是，變溫處理對(duì)崖州硬皮豆種子萌發(fā)不僅沒(méi)有影響，甚至還起到抑制作用，這可能是避免種子在溫度波動(dòng)較大的地表萌發(fā)的一種適應(yīng)機(jī)制，與長(zhǎng)芒草(Stipa bungeana)[16-17]的研究結(jié)果相似。在亞適溫條件下，相比較15 ℃恒溫，崖州硬皮豆的萌發(fā)率在10 ℃/25 ℃和15 ℃/30 ℃變溫時(shí)更高，說(shuō)明變溫減緩了低溫對(duì)種子萌發(fā)的抑制作用。

不同植物種子萌發(fā)對(duì)光照的需求在種間存在較大差異，以形成對(duì)早期生境的生態(tài)適應(yīng)性，保證盡可能多的幼苗存活與建成[18]。一般認(rèn)為，種子萌發(fā)對(duì)光照的響應(yīng)主要由遺傳特性決定，但實(shí)際情況往往更為復(fù)雜，比如溫度可能在一定程度上改變種子萌發(fā)的光需求[19]。多數(shù)種子萌發(fā)的光控試驗(yàn)是在適宜的溫度、水分和O2條件下進(jìn)行的，但自然界各生境特征差異大且易出現(xiàn)極端環(huán)境，研究光照和溫度、水分、O2等環(huán)境因子的耦合作用對(duì)種子萌發(fā)影響，對(duì)光調(diào)控種子萌發(fā)機(jī)理的深入了解具有重要的意義。本研究表明，光照對(duì)崖州硬皮豆種子萌發(fā)的影響因溫度不同而異。在適宜的萌發(fā)溫度范圍內(nèi)，崖州硬皮豆種子萌發(fā)率和萌發(fā)指數(shù)在光照和黑暗下差異不顯著(P ＞ 0.05)，說(shuō)明崖州硬皮豆屬于光中性種子。Metcalfa 和Grubb[20]對(duì)來(lái)自東南亞低地雨林的140 種植物種子進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)種子萌發(fā)的需光性隨種子大小的增加逐漸減弱，崖州硬皮豆對(duì)光照需求小的特性可能與其種子較大(千粒重27.5 g)有關(guān)。在15 ℃的低溫時(shí)，光照卻顯著促進(jìn)崖州硬皮豆種子萌發(fā)(P ＜0.05)，說(shuō)明低溫誘導(dǎo)崖州硬皮豆形成強(qiáng)迫性休眠，而光照可能作為打破強(qiáng)迫性休眠的信號(hào)因子[5,21-22]。

3.2 水分和鹽脅迫對(duì)崖州硬皮豆種子萌發(fā)的影響

水分脅迫使外界環(huán)境形成大于種子內(nèi)部的滲透勢(shì)，這種差異將導(dǎo)致種子吸水速率減緩、萌發(fā)抑制或發(fā)芽延遲[23]。種子萌發(fā)對(duì)水分脅迫的反應(yīng)與植物抗旱性相關(guān)，能在一定程度上反映該物種在干旱環(huán)境下的生存能力。本研究發(fā)現(xiàn)，崖州硬皮豆在PEG 6000 脅迫水勢(shì)達(dá)到 -0.4 MPa 時(shí)，種子萌發(fā)率與對(duì)照相比未發(fā)生改變，這與Hu 等[16]在窄葉野豌豆(Vicia angustifolia)和‘蘭箭3 號(hào)’箭筈豌豆(V.sativa‘Lanjian 3’)上的研究結(jié)果相似。輕度干旱脅迫下，植物種子會(huì)通過(guò)改變可溶性糖和脯氨酸等調(diào)節(jié)物質(zhì)以維持相對(duì)正常的細(xì)胞膨壓，保證萌發(fā)生理過(guò)程順利進(jìn)行[24]。崖州硬皮豆萌發(fā)速率(1/t50)在 -0.2 MPa 時(shí)就已顯著下降(P＜0.05)，說(shuō)明萌發(fā)速率對(duì)水分脅迫的變化與萌發(fā)率相比更為敏感，其原因可能是通過(guò)降低萌發(fā)速率，避免種子在水分缺乏的環(huán)境中大量萌發(fā)[3]。在劇變的環(huán)境中，這一機(jī)制可以提高種子較大且萌發(fā)吸水量較高的崖州硬皮豆幼苗的成活率。在鹽脅迫中同樣得到相似的結(jié)果。

鹽分是土壤的重要組成部分，過(guò)量鹽分會(huì)抑制植物生長(zhǎng)和發(fā)育，進(jìn)而導(dǎo)致作物產(chǎn)量和質(zhì)量的下降[25]。鹽分對(duì)種子萌發(fā)階段的影響程度決定該物種適應(yīng)廣泛分布的鹽漬化土地的能力，因而備受關(guān)注。景艷霞和袁慶華[26]發(fā)現(xiàn)，紫花苜蓿(Medicago sativa)種子在150 mmol·L-1NaCl 濃度條件下的萌發(fā)率顯著低于對(duì)照(P＜0.05)，當(dāng)濃度達(dá)到300 mmol·L-1時(shí)，種子萌發(fā)率為0。盧艷敏等[27]認(rèn)為，白三葉(Trifolium repens)對(duì)NaCl 的耐受濃度閾值小于300 mmol·L-1。汪永平等[28]對(duì)5 份草木樨(Melilotus)種質(zhì)進(jìn)行耐鹽性評(píng)價(jià)，結(jié)果表明，NaCl 濃度達(dá)到200 mmol·L-1時(shí)所有種質(zhì)的萌發(fā)率相比較對(duì)照均顯著(P＜0.05)降低。本研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)鹽脅迫在200 mmol·L-1的NaCl 濃 度 以 下，對(duì) 崖 州 硬 皮 豆 萌發(fā)率沒(méi)有顯著的抑制作用(P ＞ 0.05)，與上述報(bào)道比較，崖州硬皮豆種子表現(xiàn)出較強(qiáng)的萌發(fā)耐鹽性，具有在鹽漬化地區(qū)推廣的潛質(zhì)。適應(yīng)生態(tài)理論認(rèn)為，植物種子萌發(fā)特性主要形成于原生境的適應(yīng)過(guò)程中[29]，崖州硬皮豆種子萌發(fā)對(duì)鹽分限制因子的響應(yīng)特征可能是長(zhǎng)期適應(yīng)海濱鹽漬化區(qū)域進(jìn)化而成的[7]。

3.3 埋深對(duì)崖州硬皮豆出苗的影響

土壤埋藏使種子周?chē)沫h(huán)境發(fā)生一系列變化，如光照、溫度、濕度、通透性以及土壤微生物等，對(duì)其萌發(fā)和出苗的調(diào)控起到關(guān)鍵作用。本研究結(jié)果顯示，淺層的土壤埋藏為崖州硬皮豆種子萌發(fā)創(chuàng)造了適宜的環(huán)境條件，使出苗率得到提高。超過(guò)適宜的埋藏深度后，崖州硬皮豆種子隨著埋藏深度的增加，出苗率逐漸受到抑制，其原因可能是頂土層的壓力大于種子突破土層的能力[30]。除此之外，隨著土壤深度的增加，土壤含氧量降低，種子在低氧分壓的環(huán)境下會(huì)進(jìn)入強(qiáng)迫休眠或吸漲后死亡[31]，這也可能是導(dǎo)致崖州硬皮豆出苗率下降的另一個(gè)原因。Hu 等[16]認(rèn)為，土壤埋藏對(duì)光強(qiáng)和光質(zhì)的改變可能是改變長(zhǎng)芒草出苗率的原因之一。本研究發(fā)現(xiàn)，崖州硬皮豆在適宜溫度條件下的種子萌發(fā)對(duì)光照不敏感(圖1)，與土壤表層(0 cm)種子出苗率較高的結(jié)果基本吻合。埋藏深度1 cm 的種子出苗率顯著高于土壤表層(P＜0.05)，其原因可能是表層水分蒸發(fā)過(guò)快，無(wú)法滿(mǎn)足崖州硬皮豆這類(lèi)較大粒種子萌發(fā)的水分需求，這與前人在黃花磯松(Limonium aureum)[5]和霸王(Zygophyllum xanthoxylum)[32]等植物的研究結(jié)果一致。

4 結(jié)論

本研究得出以下主要結(jié)論：1)崖州硬皮豆種子具有約32%的硬實(shí)率，在生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)注意種子硬實(shí)的破除；2)崖州硬皮豆最適萌發(fā)溫度在32～33 ℃，光照對(duì)崖州硬皮豆種子萌發(fā)的影響取決于溫度的變化；3)隨著水分和鹽脅迫的加重，崖州硬皮豆種子萌發(fā)率和萌發(fā)速率呈降低的趨勢(shì)，當(dāng)PEG 滲透勢(shì)和NaCl 濃度分別達(dá)到- 1.2 MPa和400 mmol·L-1時(shí)，種子基本不會(huì)萌發(fā)；4)相比較最終萌發(fā)率，水分和鹽脅迫對(duì)崖州硬皮豆種子萌發(fā)速率的影響更為明顯；5)崖州硬皮豆種子適宜播種深度為1～2 cm。