龍馭云 湯欣欣 顧 瑩 楊舒婷 孫玉華 金培芹

江蘇省連云港市婦幼保健院 (222000)

稽留流產(chǎn)是一種妊娠早期發(fā)生的并發(fā)癥[1]。部分女性甚至?xí)l(fā)生多次稽留流產(chǎn)，嚴重影響女性的身心健康[2]。絨毛組織在細胞學(xué)上與受精卵及胚胎組織擁有相同的遺傳背景[3]，對絨毛組織進行核型分析能夠診斷胚胎核型。由于絨毛組織旺盛的分裂能力[4]，體外培養(yǎng)后能夠滿足核型分析所需要的細胞數(shù)目[5]。為從細胞遺傳學(xué)的角度探究稽留流產(chǎn)的病因以及臨床意義，本研究對稽留流產(chǎn)患者進行了核型及部分生化指標(biāo)分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2015年1月—2017年3月本院就診并確診的稽留流產(chǎn)患者98例(觀察組)。納入標(biāo)準(zhǔn)：停經(jīng)8周內(nèi)經(jīng)B超檢查有胎心搏動，之后再經(jīng)B超檢查胎心搏動消失；妊娠期沒有接受過藥物保胎治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：人工流產(chǎn)史、病毒感染史。選擇同期本院終止妊娠的早孕(對照組)。觀察組年齡(34.3±1.9)歲(25～45歲)，孕周(8.3±0.4)周(6～11周)。孕婦均簽署知情并同意書，本研究得到醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 實驗方法

兩組均采用負壓技術(shù)吸取絨毛組織[6]。絨毛組織用生理鹽水清洗過后，一部分組織用于免疫組化技術(shù)檢測人基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)、凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)表達；一部分組織應(yīng)用G顯帶技術(shù)進行核型分析。

1.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計細胞中染色體數(shù)目。使用Image-Pro Plus 6.0軟件，對免疫組化的表達及表達分級進行統(tǒng)計分析。RT-PCR的結(jié)果由儀器自動顯示。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組核型分析

觀察組核型分析98例，其中42例分析失??；分析成功56例中，45，XO 6例，單體-常1例，三體35例，嵌合7例，缺失重復(fù)6例，易位1例；對照組核型均為44+XX或44+XY。

2.2 整倍體核型分析

進一步分析整倍體核型與臨床診斷和生育史， 見表1。

2.3 非整倍體核型分析

非整倍體核型與臨床診斷及生育史，見表2。

2.4 絨毛組織MMP-9、TSP-1表達

絨毛組織中MMP-9陽性率對照組高于觀察組，而TSP-1表達水平低于觀察組(P<0.05)，見表3。

表1 不同胚胎停育整倍體核型分析

表2 不同胚胎情況非整倍體核型分析

表3 兩組絨毛組織中MMP-9、TSP-1表達對比(例)

3 討論

稽留流產(chǎn)是一種常見的妊娠早期自然流產(chǎn)類型[7]，最具標(biāo)志性的是稽留流產(chǎn)的死胎不會立刻排出體外，雖然不再繼續(xù)胚胎發(fā)育，但仍停留在母體子宮內(nèi)[8]。待孕婦產(chǎn)生流產(chǎn)樣癥狀1～2月后停止發(fā)育的胚胎從孕婦體內(nèi)排除[9]。人們對稽留流產(chǎn)的病因進行分析，找出了宮內(nèi)感染、免疫反應(yīng)、染色體異常等原因，其中染色體異常是眾多研究人員所認同[10]。

在本研究中，觀察組進行了98例核型分析，分析成功56例。對絨毛組織整倍體核型患者的一般資料進行臨床分析，患者均出現(xiàn)了胚胎停育現(xiàn)象；而絨毛組織非整倍體核型患者，除胚停外，還出現(xiàn)了無胚芽、未見胎心等。這是因為在早期卵裂過程中發(fā)生染色體分離異常，導(dǎo)致每個細胞內(nèi)染色體數(shù)目不再是44+XX或XY，是造成胚胎停育的重要原因[11]。染色體單體使得基因組無法進行有絲分裂，導(dǎo)致胚胎在早期發(fā)生流產(chǎn)。其他類型的染色體數(shù)目異常產(chǎn)生原因：自發(fā)突變；在配子形成過程中雙親的原始生殖細胞可能發(fā)生了異常減數(shù)分裂或有絲分裂；雙受精[12]。

一些生化指標(biāo)也能對稽留流產(chǎn)的診斷起到輔助作用。MMP-9表達過低會導(dǎo)致胚胎無法正常著床，以及著床后不能正常發(fā)育[13]。而TSP-1的高表達則會影響著床過程[14]。絨毛組織中的氧化應(yīng)激反應(yīng)失常也會導(dǎo)致胚胎停止發(fā)育[15]，最終引起稽留流產(chǎn)的發(fā)生。本研究中，對照組中的MMP-9陽性率高于觀察組，而TSP-1表達水平低于觀察組。映證了上述的研究觀點。

綜上所述，細胞遺傳學(xué)分析能夠?qū)袅鳟a(chǎn)進行病因診斷，MMP-9、TSP-1生化指標(biāo)可起到輔助診斷作用，由于這種檢測方法失敗率較高，還需不斷提高診斷技術(shù)水平，有望成為稽留流產(chǎn)的有效檢測指標(biāo)。