施克飛

江蘇省常州市中心血站溧陽分站，江蘇溧陽 213300

人類免疫缺陷病毒（HIV）是造成獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS）的主要病原體，具有傳染性，已經(jīng)受到全世界的關(guān)注[1]。我國目前的艾滋病疫情呈現(xiàn)總體低流行、地區(qū)高流行的狀態(tài)，多由高危人群擴(kuò)散至低危人群，感染人群多樣化。HIV的主要傳播途徑是血液傳播，我國衛(wèi)計(jì)委對血液制品潛在HIV風(fēng)險(xiǎn)也非常重視[2]。根據(jù)《獻(xiàn)血者健康檢查要求》和《血站質(zhì)量管理規(guī)范》中的要求，溧陽分站對血液樣本開展了嚴(yán)格的ELISA檢測，對于復(fù)查結(jié)果仍為1種或2種檢測試劑均為有反應(yīng)性，則將標(biāo)本送常州CDC進(jìn)行確診。該文對2012年1月—2015年12月的篩查結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取江蘇常州市中心血站溧陽分站32 811例標(biāo)本作為該次研究對象。該研究所選病例經(jīng)過倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者或家屬知情同意。

1.2 儀器和試劑

使用酶聯(lián)免疫吸附法對所有標(biāo)本篩查，使用人類免疫缺陷病毒抗原抗體診斷試劑盒（上海科華、北京萬泰、英科新創(chuàng)），檢測HIV-1型、HIV-2型抗體以及HIV的p24抗原。酶免檢測所使用儀器為E-STAR全自動(dòng)酶免儀。如果檢測結(jié)果有反應(yīng)性，則按照《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》的要求，用2種試劑進(jìn)行復(fù)試，若檢測結(jié)果為1種或2種檢測試劑均為有反應(yīng)性，則將標(biāo)本送常州CDC進(jìn)行確診。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

使用Pass Spring System穿越安全輸血標(biāo)準(zhǔn)化軟件、Liswell實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)，建立Excel數(shù)據(jù)庫，使用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析處理。

2 結(jié)果

2012年1—12月送檢標(biāo)本8 851例，抗-HIV陽性數(shù)7例、送檢CDC標(biāo)本數(shù)3例、確診2例，確診率為66.67%；2013年1—12月送檢標(biāo)本8 293例，抗-HIV陽性數(shù)8例、送檢CDC標(biāo)本數(shù)6例、確診3例，確診率為50.00%；2014年1—12月送檢標(biāo)本8 229例，抗-HIV陽性數(shù)5例、送檢CDC標(biāo)本1例，確診率為20.00%；2015年1—12月送檢標(biāo)本7 438例，抗-HIV陽性數(shù)4例、送檢CDC標(biāo)本4例、確診1例，確診率為25.00%，見表1。

表1 溧陽分站2012年1月—2015年12月數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

3 討論

近年來我國AIDS患者和HIV感染者數(shù)量增加，有部分地區(qū)已經(jīng)呈現(xiàn)HIV快速增長的趨勢。目前國內(nèi)主要采用ELISA法篩查HIV病毒[3]。衛(wèi)計(jì)委《獻(xiàn)血者健康檢查要求》中明確規(guī)定，不同級(jí)別采血機(jī)構(gòu)都需要采購不同廠家生產(chǎn)的試劑檢測。使用ELISA篩查獻(xiàn)血標(biāo)準(zhǔn)，可以提高的血液安全，過去的ELISA技術(shù)法有缺陷，靈敏度比較低，加上受病毒的亞型、變異、靜默感染和窗口期長等因素，這些都會(huì)影響血液安全。HIV窗口期樣本的漏檢對血液安全有很大的影響[4-5]?，F(xiàn)階段本血站使用的第4代ELISA試劑敏感性、特異性有顯著提高，篩查效果更好。當(dāng)機(jī)體感染后HIV后的1～2周，血液中就會(huì)出現(xiàn)p24抗原，通過檢測HIV1/2抗體和p24抗原，能夠?qū)z測的窗口期從過去的45 d縮短至16 d。核酸檢測主要是針對病毒核酸，ELISA檢測的是病毒產(chǎn)生的抗體和抗原。ELISA檢測有很高的特異性，但是仍然受很多影響，①樣本問題，由于血液樣品溶血和患者自身抗體的交叉反應(yīng)會(huì)干擾檢測結(jié)果；②操作問題，底物和洗液的配置；③試劑問題，不同的實(shí)際檢測能力也不同的[6]。核酸檢測結(jié)果比較準(zhǔn)確，但是也無法做到完全可靠，核酸檢測窗口期、病毒含量低、病毒核酸變異等問題，都會(huì)出現(xiàn)假陽性?！堆炯夹g(shù)操作規(guī)程》中對于血液檢測有明確的要求，在進(jìn)行核酸檢測后，使用血清檢測和核酸兩種方法各檢測1次[7]。若使用ELISA法檢測陽性的標(biāo)本不能再進(jìn)行核酸檢測，可直接判斷該項(xiàng)目檢測不合格。該站在進(jìn)行血液標(biāo)本篩查時(shí)，策略是2次ELISA法1次核酸檢測。結(jié)合該次研究結(jié)果，2012年1—12月送檢標(biāo)本8 851例，確診率為66.67%；2013年1—12月送檢標(biāo)本8 293例，確診率為50.00%；2014年1—12月送檢標(biāo)本8 229例，確診率為20.00%；2015年1—12月送檢標(biāo)本7 438例，確診率為2.005%?？梢姳狙窘?，通過ELISA法篩查檢測合并核酸檢測，篩查的HIV陽性患者的準(zhǔn)確率可靠，這與周玉芹[8]的研究中，2012年1—12月送檢標(biāo)本，確診率為65.0%，2013年1—12月送檢標(biāo)本確診率為51.0%；2014年1—12月送檢標(biāo)本確診率為22.0%；2015年1—12月送檢標(biāo)本確診率為26.3%的結(jié)果一致。

隨著近些年來臨床用血的需求量增加，血液的采集次數(shù)也不斷提高，也增加了安全供血中的風(fēng)險(xiǎn)控制難度，防范經(jīng)過血液傳播疾病的任務(wù)也更加艱巨。我國近幾年來出現(xiàn)因窗口期經(jīng)輸血感染的HIV的越來越多，部分高危患者借用獻(xiàn)血進(jìn)行體檢的行也經(jīng)常發(fā)生，這種行為不僅增加了血液風(fēng)險(xiǎn)，也增加了血液質(zhì)量監(jiān)管的難度，成為了受到社會(huì)關(guān)注的問題。該血站的工作人員在妥善處理血液后，告知獻(xiàn)血者可能出現(xiàn)的影響，同時(shí)聯(lián)系江蘇省血液中心核實(shí)獻(xiàn)血者的情況[9]。

ELISA是血站常用的篩查方法，對于檢測HBV、HCV、HIV1+2等有很好的特異性[10]。國外推薦檢測的方式是先使用1種ELISA試劑先進(jìn)行血液篩查，出現(xiàn)反應(yīng)性標(biāo)本在使用相同的試劑或者是更多的試劑復(fù)查，如果復(fù)查為陽性，保證實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性。近些年來有學(xué)者建議，如果初次檢驗(yàn)S/CO值非常高，不要重復(fù)檢驗(yàn)，可直接開展確證檢測[11]。ELISA多次檢測為陽性的樣本，可使用免疫熒光法和蛋白免疫印跡法進(jìn)一步確診，仍是診斷HIV-1感染的重要參考標(biāo)準(zhǔn)。不過不同采供血單位為了保證血液安全，盡可能降低輸血傳播疾病的風(fēng)險(xiǎn)，在初篩血液樣本時(shí)，都會(huì)采用雙試劑檢測，從而提高檢出率，降低風(fēng)險(xiǎn)，但是試劑耗費(fèi)量較大[12]。該站使用的試劑盒為上?？迫A、北京萬泰、英科新創(chuàng)，篩查呈反應(yīng)性的樣本再次使用原試劑和另外1種不同廠家的試劑再次檢查，這樣不僅可以節(jié)約人力、物力，還可以避免不必要的資源浪費(fèi)。

綜上所述，ELISA法可進(jìn)行無償獻(xiàn)血HIV的初檢，對于HIV抗體不確定的標(biāo)本可結(jié)合核酸結(jié)果進(jìn)行結(jié)果匯總。盡可能減少HIV窗口期感染樣本的影響。血站工作人員應(yīng)做好獻(xiàn)血者前健康咨詢，盡可能將HIV感染者隔離在獻(xiàn)血前，規(guī)范統(tǒng)一各地區(qū)血站初篩結(jié)果和規(guī)則，提高血液安全性。