榮 譽(yù)

（遼寧中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心 遼寧 沈陽 110032）

在動(dòng)物試驗(yàn)指標(biāo)確定中，當(dāng)面臨綜合性的特征時(shí)，應(yīng)該改變以往單一性的比較方法，通過多種比較方法的構(gòu)建，實(shí)現(xiàn)動(dòng)物試驗(yàn)指標(biāo)確定的有效性，有效提高檢測(cè)的整體質(zhì)量。在以往動(dòng)物試驗(yàn)中，人們通常會(huì)采用一元協(xié)方差分析方法，通過不同方法的使用以及處理效果的確定，提高試驗(yàn)分析以及處理的差異性，從而實(shí)現(xiàn)多種比較方案檢測(cè)的有效性，實(shí)現(xiàn)動(dòng)物檢測(cè)結(jié)果的整體價(jià)值，但是，若在單一指標(biāo)分析中，如果沒有考慮到各個(gè)指標(biāo)之間的問題，會(huì)形成不正確性的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。因此，在動(dòng)物試驗(yàn)中，為改變以往單一性的試驗(yàn)限制，應(yīng)該通過多重比較方法的使用及選擇，提高動(dòng)物試驗(yàn)的有效性，為動(dòng)物試驗(yàn)方法的確定提供參考。

1.多重比較方法

1.1 所謂多重比較法，通常運(yùn)用在變異數(shù)據(jù)分析之后，當(dāng)發(fā)現(xiàn)平均數(shù)存在顯著差異時(shí)，應(yīng)該通過試驗(yàn)水準(zhǔn)中檢視方法的確定，實(shí)現(xiàn)平均數(shù)間差異的分析。對(duì)于一項(xiàng)試驗(yàn)內(nèi)容，通過多種比較方法的使用，可以結(jié)合正確的、無效的假設(shè)內(nèi)容，進(jìn)行不正確數(shù)據(jù)以及假設(shè)的分析，有效提高數(shù)據(jù)分析、處理的有效性。而且，數(shù)據(jù)檢測(cè)以及多重比較方法運(yùn)用中，應(yīng)該結(jié)合動(dòng)物試驗(yàn)的檢測(cè)方法，進(jìn)行數(shù)據(jù)的處理，以提高動(dòng)物試驗(yàn)多重比較確定的有效性[1]。

1.2 多重比較方法原則。

在動(dòng)物試驗(yàn)檢測(cè)中，應(yīng)該結(jié)合多重比較的方法，進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)方案的確定。首先，在試驗(yàn)方案擬定中，應(yīng)該結(jié)合動(dòng)物試驗(yàn)的特點(diǎn)，進(jìn)行統(tǒng)一試驗(yàn)的整合，第一，在單因素試驗(yàn)方案中，應(yīng)該通過整個(gè)試驗(yàn)進(jìn)行一個(gè)試驗(yàn)因素不同水平的確定，保證單因素試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)的有效性。第二，多因素試驗(yàn)方案。結(jié)合多試驗(yàn)方案特點(diǎn)，應(yīng)該將同一試驗(yàn)中的兩個(gè)及兩個(gè)以上的試驗(yàn)因素進(jìn)行分析。其次，試驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本原則。第一，在試驗(yàn)代表性原則確定中，通過生物代表性的分析，應(yīng)該將研究對(duì)象的品種作為重點(diǎn)，通過代表性、環(huán)境性的分析，實(shí)現(xiàn)試驗(yàn)環(huán)境的的有效創(chuàng)設(shè)。第二，試驗(yàn)的正確性。在試驗(yàn)中應(yīng)該通過各項(xiàng)試驗(yàn)的分析，進(jìn)行非試驗(yàn)因素的低水平確定，有效避免誤差的出現(xiàn)，提高動(dòng)物試驗(yàn)檢測(cè)的正確性、準(zhǔn)確性。第三，試驗(yàn)的重復(fù)性。通過對(duì)重復(fù)性指標(biāo)的確定，應(yīng)該在相同條件下進(jìn)行同一試驗(yàn)的重復(fù)使用，通過重復(fù)試驗(yàn)保證動(dòng)物試驗(yàn)的測(cè)試的準(zhǔn)確性。

1.3 方差分析中的多種比較。

通道對(duì)方差分析技術(shù)的分析，應(yīng)該通過F 檢驗(yàn)討論組間編譯的分析，應(yīng)該在總變異作用下通過兩組以上平均差的顯著性檢驗(yàn)，得到整體結(jié)果。如果在檢測(cè)技術(shù)確定中F 檢驗(yàn)不顯著，以為著試驗(yàn)中存在著自變量對(duì)因變量沒有顯著影響的問題，因此檢驗(yàn)結(jié)束。若F 檢驗(yàn)結(jié)果顯著，應(yīng)該通過多組平均數(shù)的對(duì)比，確定專門分析技術(shù)，以實(shí)現(xiàn)方差分析多重比較[2]。

2.影響動(dòng)物試驗(yàn)多重比較的因素

2.1 溫度因素

在動(dòng)物試驗(yàn)中，常用的試驗(yàn)動(dòng)物為恒溫動(dòng)物，在一定范圍應(yīng)該保持體溫的穩(wěn)定性以及生理調(diào)節(jié)功能，當(dāng)動(dòng)物試驗(yàn)檢測(cè)中，出現(xiàn)溫度變化過急或是過快的問題，動(dòng)物會(huì)產(chǎn)生行為以及生理的不良反應(yīng)，無法實(shí)現(xiàn)動(dòng)物試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果的有效性。例如，在動(dòng)物試驗(yàn)檢測(cè)中，當(dāng)出現(xiàn)溫度過高的問題，會(huì)造成雌性動(dòng)物周期的紊亂，嚴(yán)重的會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物的抵抗力下降，造成動(dòng)物死亡。

2.2 濕度因素

結(jié)合動(dòng)物試驗(yàn)檢測(cè)方案，動(dòng)物體一般會(huì)通過皮膚蒸發(fā)進(jìn)行散熱，在濕度以及動(dòng)物溫度調(diào)節(jié)的狀況下，當(dāng)出現(xiàn)濕度過高以及濕度過低的現(xiàn)象，會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物皮膚蒸發(fā)紊亂，嚴(yán)重降低動(dòng)物的抵抗能力。而且，在高溫原病影響下，會(huì)影響動(dòng)物的健康，無法提高試驗(yàn)結(jié)果的有效性。

2.3 照度的影響因素

通過對(duì)動(dòng)物試驗(yàn)試驗(yàn)的分析，光照對(duì)動(dòng)物的生理活動(dòng)有著一定的調(diào)節(jié)作用，光對(duì)動(dòng)物的生殖會(huì)產(chǎn)生一定的影響。但是，在不同種類以及不同品系動(dòng)物敏感的狀況下，需要適當(dāng)?shù)墓庹者M(jìn)行調(diào)節(jié)，并在不破壞動(dòng)物生理功能影響的狀況下，調(diào)節(jié)動(dòng)物的周期，通常狀況下，在光照試驗(yàn)中，光照與動(dòng)物的距離需要控制在0.8～1.0m 的狀態(tài)，以有效提高動(dòng)物試驗(yàn)的穩(wěn)定性。

2.4 生物因素的影響

結(jié)合動(dòng)物試驗(yàn)狀況，生物因素主要是在動(dòng)物生存空間下，為生物對(duì)動(dòng)物會(huì)產(chǎn)生一定的影響，而且，在同種動(dòng)物之間、異種動(dòng)物之間存在著相互影響的問題。動(dòng)物試驗(yàn)中病原微生物會(huì)對(duì)動(dòng)物造成影響，嚴(yán)重的會(huì)出現(xiàn)動(dòng)物發(fā)病、死亡的現(xiàn)象。同時(shí)，在異種動(dòng)物之間存在著相互影響的因素，在這種狀況下，動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育、生長(zhǎng)繁殖會(huì)對(duì)動(dòng)物的試驗(yàn)結(jié)果造成影響。

3.淺析動(dòng)物試驗(yàn)中多重比較方法的選擇

3.1 LSD檢測(cè)方法

在LSD 檢測(cè)方法使用中，作為最早的多重比較方法，應(yīng)該通過LSD以及獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)方法的確定，在LSD 法最小顯著差異法分析中，公式如（1）

公式（1）中的t 作為簡(jiǎn)單的監(jiān)測(cè)技術(shù)，應(yīng)該通過對(duì)檢驗(yàn)水準(zhǔn)技術(shù)的校準(zhǔn)，實(shí)現(xiàn)對(duì)標(biāo)準(zhǔn)誤差計(jì)算的統(tǒng)一，充分展現(xiàn)樣本信息使用的有效性，保證標(biāo)準(zhǔn)誤差確定的科學(xué)性?？梢栽贚SD 使用中滿足試驗(yàn)的檢測(cè)需求，試驗(yàn)中將F 檢驗(yàn)作為重點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)合并方差的處理。由于LSD 法計(jì)算方法的簡(jiǎn)單性，應(yīng)該通過檢驗(yàn)功率以及技術(shù)使用方案的分析，進(jìn)行多種模擬試驗(yàn)方法的確定，充分展現(xiàn)LSD 檢測(cè)技術(shù)的有效性。但是，在LSD 檢測(cè)方法使用中，存在著一定的限制性問題，具體問題如下：第一，在該種技術(shù)檢測(cè)中通常涉及到比較均勻的數(shù)對(duì)；第二，在該種計(jì)算方法使用中存在著誤差概率較多的問題；第三，在技術(shù)使用中應(yīng)該將多重比較方法的使用作為重點(diǎn)。因此，在LSD 技術(shù)使用中存在著相對(duì)獨(dú)立的技術(shù)內(nèi)容，通過相鄰排序以及均數(shù)間的比較，實(shí)現(xiàn)多種技術(shù)試驗(yàn)的有效性。數(shù)據(jù)檢測(cè)以及多重比較方法運(yùn)用中，應(yīng)該結(jié)合動(dòng)物試驗(yàn)的檢測(cè)方法，進(jìn)行數(shù)據(jù)的處理，以提高動(dòng)物試驗(yàn)多重比較確定的有效性。在該種檢測(cè)方法使用中，Bonferroni 不等式確定中，由于該種方法相對(duì)保守，檢驗(yàn)結(jié)果存在著更小的檢驗(yàn)功效，與之相反的，在自由統(tǒng)計(jì)學(xué)分析中存在著拒絕無效假設(shè)的問題，因此，檢驗(yàn)技術(shù)的功效相對(duì)較高，Bonferroni 通常被運(yùn)用在比較多次的重復(fù)數(shù)據(jù)之中。在Waller Duncan檢驗(yàn)中，這種就還內(nèi)側(cè)方法與LSD 方法相似，應(yīng)該確定相似技術(shù)的使用，實(shí)現(xiàn)動(dòng)物檢測(cè)技術(shù)的有效性。

3.2 q檢驗(yàn)技術(shù)。

在多個(gè)平均數(shù)之間顯著差異就檢測(cè)中，應(yīng)該通過統(tǒng)一臨界值的確定，進(jìn)行最大以及最小平均數(shù)的差異性確定，在錯(cuò)誤概率中，q 的檢驗(yàn)針對(duì)不同均數(shù)單位，在Ⅰ型錯(cuò)誤發(fā)生后，主要是假陽性錯(cuò)誤，錯(cuò)誤發(fā)生的概率相對(duì)較大，因此，在q 檢驗(yàn)中，應(yīng)該針對(duì)不同的均數(shù)進(jìn)行數(shù)據(jù)控制方案的確定，在排序之后兩個(gè)平均數(shù)之間包括均數(shù)的個(gè)數(shù)，r 作為不同的臨界值，有效降低假陽性錯(cuò)誤的出現(xiàn)。在相鄰平均數(shù)比價(jià)中，當(dāng)q=t 時(shí)，檢測(cè)的結(jié)果相同，當(dāng)r ＞2時(shí)，q 的臨界值比t 的檢驗(yàn)值大，因此，在q 檢驗(yàn)以及t 檢驗(yàn)的過程中，應(yīng)該結(jié)合q 檢驗(yàn)方案的卻額定，記性臨界值的確定，提高動(dòng)物檢測(cè)的價(jià)值。在SNK 法使用中，，核心目標(biāo)是處理不通過均數(shù)的子集，這些子集內(nèi)部同質(zhì)，但是，在不同子集之間存在著差異性，因此，在SNK 檢測(cè)中，又被稱之為分層檢驗(yàn)，其公式如（1）。

通過不同檢測(cè)范圍的確定，應(yīng)該結(jié)合不同比哦啊花尊進(jìn)行顯著判定方案的確定。如，在4個(gè)平均數(shù)確定中，當(dāng)＞＞＞時(shí)，其臨界值比價(jià)結(jié)果為q1＞q2＞q3＞q4。在SNK 法使用中，應(yīng)該通過不同范圍r 均數(shù)差以及同臨界值比較的確定，實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的確定。在Tukey HSD 技術(shù)使用中，可以將錯(cuò)誤率控制在陰性范圍內(nèi)，但是數(shù)據(jù)檢測(cè)中存在著一定的錯(cuò)誤較低的問題，SNK 方法使用中，可以增加動(dòng)物試驗(yàn)檢測(cè)的有效性，充分保障數(shù)據(jù)檢測(cè)的 價(jià)值。在Tukey HSD 檢測(cè)中，其方法如（3），公式（3）中的不是所有的臨界值都在顯著水平上，因此，在數(shù)據(jù)檢測(cè)中應(yīng)該將檢測(cè)項(xiàng)目控制在合理范圍之中，實(shí)現(xiàn)動(dòng)物試驗(yàn)檢測(cè)的有效性。

3.3 二項(xiàng)分布變量的檢測(cè)技術(shù)。

在二項(xiàng)分布變量技術(shù)的運(yùn)用，結(jié)合比率或是百分?jǐn)?shù)形式進(jìn)行表示，在試驗(yàn)中，通過動(dòng)物試驗(yàn)檢測(cè)可以確定百分百率，通過這類計(jì)算資料的確定分析，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)二項(xiàng)分布變量的計(jì)算，起計(jì)算方法如（4），公式（4）中，檢驗(yàn)功效（1-β），顯著性水平為（a），效應(yīng)量為（d），結(jié)合二項(xiàng)分布變量的樣本，對(duì)數(shù)據(jù)計(jì)算結(jié)果進(jìn)行分析，計(jì)算結(jié)果如表一所示。

表1 特定和1-的C值表

結(jié)合應(yīng)用公式的計(jì)算方法，應(yīng)該通過公式計(jì)算方法，進(jìn)行公式估計(jì)樣本含量的設(shè)計(jì)，也就是說，在試驗(yàn)前應(yīng)該結(jié)合假設(shè)效應(yīng)記性增加處理，但是，試驗(yàn)結(jié)果顯著建撒后，而且，在離散型資料使用中，應(yīng)該按照連續(xù)性資料的確定，進(jìn)行連續(xù)校正問題的確定，實(shí)現(xiàn)對(duì)連續(xù)校正計(jì)算成本的確定。

4.連續(xù)性變量試驗(yàn)

（1）2組均數(shù)比較。

在動(dòng)物試驗(yàn)檢測(cè)中，為了計(jì)算連續(xù)性變量的試驗(yàn)樣本含量，應(yīng)該通過變量標(biāo)準(zhǔn)差、檢驗(yàn)功效以及顯著水平的分析，進(jìn)行計(jì)算方法的確定。在該種計(jì)算方法運(yùn)用中，所計(jì)算的結(jié)果相對(duì)可靠。在正態(tài)分布的計(jì)算狀況下不會(huì)影響對(duì)檢測(cè)結(jié)果的假設(shè)，但是，應(yīng)該注意極端偏態(tài)分布的問題，通過對(duì)變量方法的確定，進(jìn)行正態(tài)分布因素的確定，之后利用公式進(jìn)行樣本含量的計(jì)算。

（2）配對(duì)試驗(yàn)。

通過對(duì)配對(duì)試驗(yàn)的分析，在一組動(dòng)物處理前后之后，應(yīng)該通過某指標(biāo)測(cè)量變化的分析，進(jìn)行初始條件的兩兩配對(duì)，配對(duì)試驗(yàn)中的每組含量如（5）所示。

（3）單樣本試驗(yàn)

通過對(duì)試驗(yàn)?zāi)康牡姆治?，?yīng)該將檢測(cè)數(shù)據(jù)的確定作為重點(diǎn)，通過對(duì)檢測(cè)樣本含量的分析，進(jìn)行單樣本試驗(yàn)的確定，以實(shí)現(xiàn)動(dòng)物試驗(yàn)檢測(cè)技術(shù)的有效性，為動(dòng)物試驗(yàn)檢測(cè)方案的構(gòu)建提供支持。

5.其他多重比較方法。

在對(duì)照組以及試驗(yàn)組數(shù)據(jù)比較中，應(yīng)該選擇適宜性的檢驗(yàn)方法，例如，通過Dunnett’s 檢驗(yàn)中其檢測(cè)結(jié)果相對(duì)較高。結(jié)合動(dòng)物試驗(yàn)數(shù)據(jù)的檢測(cè)特定，通過Scheffe 檢驗(yàn)中，需要將臨界值大數(shù)據(jù)確定作為重點(diǎn)，通過非均衡性項(xiàng)目的設(shè)計(jì)，存在著檢驗(yàn)較低的問題，因此，在多種比較方法確定中，應(yīng)該結(jié)合多種動(dòng)物試驗(yàn)的檢驗(yàn)方案，提高數(shù)據(jù)檢測(cè)的有效性。

總而言之，在現(xiàn)階段動(dòng)物試驗(yàn)檢測(cè)中，為了提高動(dòng)物檢測(cè)結(jié)果的有效性，應(yīng)將動(dòng)物的檢測(cè)作為重點(diǎn)，認(rèn)識(shí)到影響動(dòng)物試驗(yàn)的影響因素，通過限制因素的分析，進(jìn)行試驗(yàn)方案的構(gòu)建，以保證動(dòng)物試驗(yàn)檢測(cè)的有效性，提高試驗(yàn)檢測(cè)的整體質(zhì)量。一般情況下，在動(dòng)物試驗(yàn)檢測(cè)中，應(yīng)該通過LSD 檢測(cè)方法、 q 檢驗(yàn)技術(shù)、二項(xiàng)分布變量檢測(cè)法等技術(shù)的綜合分析，合理選擇試驗(yàn)方案，通過對(duì)試驗(yàn)檢測(cè)方法的分析，進(jìn)行多種計(jì)算方法的確定，以提高動(dòng)物試驗(yàn)檢測(cè)的有效性，為動(dòng)物檢測(cè)技術(shù)方案的完善提供支持。