龔敏，盧金清，韓怡

湖北中醫(yī)藥大學(xué)/湖北省藥用植物研發(fā)中心，湖北 武漢 430065

荊芥為全草類中藥，別名香荊薺、假蘇等，且最早以“假蘇”載于《神農(nóng)本草經(jīng)》[1]，被列為中品。荊芥性微溫，味辛，歸肺、肝經(jīng)，有解表散風(fēng)、透疹消瘡之功效[2]。臨床常用于感冒、頭痛、麻疹、風(fēng)疹、瘡瘍等。荊芥除藥廠用作原料外，近年來還廣泛應(yīng)用于飼料、香料等加工行業(yè)，荊芥揮發(fā)油出口各國的數(shù)量逐漸增加，社會(huì)需求量不斷增大[3]。自宋代以來記載荊芥的炮制方法已達(dá)十余種，現(xiàn)代臨床上荊芥多以其生品、炒制品和炭品入藥。臨床研究表明，荊芥炒制后具有祛風(fēng)理血的作用，可用于婦人產(chǎn)后血暈。然而荊芥炒制品未被2015年版《中華人民共和國藥典》收載，因此有必要研究荊芥及其炮制品的物質(zhì)基礎(chǔ)。國內(nèi)外并無文獻(xiàn)報(bào)道荊芥及其炮制品炒荊芥的揮發(fā)性成分物質(zhì)基礎(chǔ)，所以本實(shí)驗(yàn)首次采用HS-SPME-GC-MS對荊芥及其炮制品炒荊芥的揮發(fā)性成分進(jìn)行提取和分析比較，探尋炒制對荊芥揮發(fā)性成分的組成和含量的影響，為荊芥的臨床應(yīng)用提供參考。

1 材料

1.1 儀器

手動(dòng)固相微萃取裝置(德國IKA公司)；65 μm PDMS/DVB萃取纖維頭(Supelco公司)；頂空瓶(15 mL)；Agilent 6890-5973型GC-MS聯(lián)用儀(Hewlett-Packard公司)；電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司，JY1002，d=0.01 g)。

1.2 藥材

荊芥藥材購于湖北強(qiáng)康中藥飲片有限公司(批號：170801)，經(jīng)湖北中醫(yī)藥大學(xué)生藥教研室楊紅兵教授鑒定為唇形科植物荊芥SchizonepetatenuifoliaBriq.的干燥地上部分。

2 方法

2.1 炒荊芥的制備

參照2015版《中華人民共和國藥典》四部0213炮制通則中的炮制方法：取荊芥生品適量，置炒制容器內(nèi)，用文火加熱，并不斷翻動(dòng)，使藥物表面呈微黃色或顏色加深，取出，放涼，陰干打粉，即得。

2.2 頂空固相微萃取條件

綜合考察確定頂空固相微萃取的最佳條件為：荊芥打粗粉，取0.6 g，置頂空瓶中，插入萃取纖維頭(65 μm PDMS/DVB)，在150 ℃下平衡10 min后，再壓縮手柄伸出萃取頭萃取15 min，取出，立即插入氣相色譜儀進(jìn)樣口(溫度230 ℃)解析3 min，不分流進(jìn)樣。炒荊芥的制備見2.1。

2.3 氣相色譜-質(zhì)譜條件

色譜柱：HP-5MS(30 m×0.25 mm，0.25 μm)；載氣：高純度He；流速：0.8 mL·min-1；進(jìn)樣口溫度：230 ℃；程序升溫：50 ℃以20 ℃·min-1升溫至100 ℃，再以8 ℃·min-1升溫至210 ℃。

質(zhì)譜條件：離子源EI源；離子源溫度230 ℃，電離電壓70 eV；四級桿溫度150 ℃；掃描質(zhì)量范圍m/z35～550。

3 結(jié)果

通過氣質(zhì)聯(lián)用儀分析，數(shù)據(jù)庫檢索確定各個(gè)組分。從荊芥生品中分離出30種成分，并鑒定出27種成分，占揮發(fā)性成分總量的96.35%；從炒荊芥中分離出32種成分，并鑒定出26種成分，占揮發(fā)性成分總量的89.22%。具體結(jié)果見圖1～2及表1。

圖1 HS-SPME-GC-MS分析荊芥生品揮發(fā)性成分總離子流圖

圖2 HS-SPME-GC-MS分析炒荊芥揮發(fā)性成分總離子流圖

4 討論

荊芥炒制后，結(jié)果表明，其揮發(fā)性成分的組成、含量較生品均發(fā)生了改變。荊芥生品中揮發(fā)性成分含量最高的為薄荷酮，占揮發(fā)性成分的48.57%，其次為噠嗪(5.46%)、檸檬烯(4.16%)、大根香葉烯(1.69%)等。炒荊芥中揮發(fā)性成分含量最高的為胡薄荷酮，占揮發(fā)性成分的36.24%，其次主要為異薄荷酮(26.57%)、噠嗪(6.92%)、薄荷醇(4.28%)、大根香葉烯(2.33%)等。與荊芥生品相比，炒荊芥中新增了14種成分，醇酯類成分組成個(gè)數(shù)增多，減少了15種成分，烯酮類成分組成個(gè)數(shù)減少。荊芥炮制前后的共有揮發(fā)性成分有12種，主要表現(xiàn)為酯類含量明顯減少，醇類含量基本不變，烯類含量保持不變或明顯增多。

表1 荊芥及其炮制品揮發(fā)性成分

續(xù)表1

注：—代表不出現(xiàn)該成分。

荊芥中所含的揮發(fā)性成分較為豐富，其中部分特有成分具有廣泛的藥理活性。如薄荷酮有抗病毒、抗炎、抑菌、利膽、促滲作用[4-6]，還有局部麻醉作用和止痛作用[7]；檸檬烯具有抑菌、抑制興奮、抗腫瘤、祛痰、止咳、平喘和溶解膽結(jié)石等功效[8-9]；月桂烯具有抗腫瘤、抗氧化、鎮(zhèn)痛和祛痰止咳作用[10-13]；薄荷烯酮具有麻醉、抗炎和鎮(zhèn)痛作用[14]；水楊酸甲酯具有驅(qū)蟲作用[15]，且可促進(jìn)局部的血液循環(huán)，起消腫、消炎、止癢和鎮(zhèn)痛作用[16]。然而炒荊芥中并未檢測到這些活性成分。故從揮發(fā)性成分的角度考慮，荊芥生品優(yōu)于炒荊芥，這也符合荊芥在臨床上多以生品入藥的用藥習(xí)慣。活性物質(zhì)的改變必然引起臨床療效和應(yīng)用的變化，荊芥生品重在解表散風(fēng)，炒制品重在祛風(fēng)理血。本研究對荊芥生品及其炒制品的揮發(fā)性成分進(jìn)行分析比較，為臨床合理用藥提供了一定參考。