帥振虹 楊卓欣

隨著我國(guó)“二胎”政策的全面放開(kāi)， 有妊娠需求的高齡婦女?dāng)?shù)量不斷增加。有研究表明， 35 歲以后女性生育能力逐年下降， ＞40 歲尤為明顯。細(xì)胞凋亡是受一系列基因控制的程序性細(xì)胞死亡， 機(jī)體通過(guò)卵巢顆粒細(xì)胞凋亡調(diào)控著卵泡的發(fā)育成熟和閉鎖。若顆粒細(xì)胞過(guò)度凋亡， 導(dǎo)致卵泡異常閉鎖， 可能影響卵母細(xì)胞的正常發(fā)育過(guò)程， 進(jìn)而引起卵母細(xì)胞質(zhì)量下降。因此， 如何通過(guò)降低顆粒細(xì)胞凋亡率來(lái)抑制卵泡異常閉鎖， 提高卵母細(xì)胞發(fā)育潛能， 對(duì)于治療高齡不孕具有十分重要的意義。本研究采用經(jīng)皮穴位電刺激(transcutaneous electric acupoint stimulation， TEAS)對(duì)高齡IVF-ET 患者進(jìn)行隨機(jī)臨床對(duì)照研究， 現(xiàn)具體報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料

選取2018 年3～9 月在本院接受IVF-ET 治療的60 例高齡女性患者作為研究對(duì)象, 按照隨機(jī)數(shù)字表法分為TEAS 組和對(duì)照組, 每組30 例。TEAS 組患者平均年齡(35.9±3.1)歲, 平均不孕年限(4.9±3.5)年；對(duì)照組平均年齡(36.1±2.6)歲, 平均不孕年限(5.0±3.2)年。兩組患者的年齡、不孕年限等一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 具有可比性。

1. 2 方法

兩組患者均采用短方案。①TEAS 組選穴：關(guān)元、天樞、腎俞、命門、腰陽(yáng)關(guān)、子宮、三陰交穴, 患者自促性腺激素(gonadotropin, Gn)啟動(dòng)日至HCG 日采用HANS 儀治療,設(shè)置電流強(qiáng)度為20～25 mA, 頻率為2 Hz, 3 次/周, 20 min/次。②對(duì)照組患者僅采用IVF-ET 方案治療, 不加用TEAS 干預(yù)治療。

1. 3 觀察指標(biāo)

采用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的d-UTP缺口末端標(biāo)記(TUNEL)染色法, 按照TUNEL 試劑盒說(shuō)明書操作, 用光學(xué)顯微鏡觀察卵巢顆粒細(xì)胞凋亡數(shù)：陽(yáng)性細(xì)胞的胞漿內(nèi)呈棕黃色顆粒, 陰性細(xì)胞呈藍(lán)色, 并比較其凋亡率。取卵后比較兩組患者的獲卵數(shù)、受精率、優(yōu)質(zhì)胚胎率、臨床妊娠率。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩組患者卵巢顆粒細(xì)胞凋亡率比較

TEAS 組患者卵巢顆粒細(xì)胞凋亡率為(13.67±2.14)%, 明顯低于對(duì)照組的(19.58±3.69)%, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組患者卵巢顆粒細(xì)胞凋亡率比較(±s, %)

表1 兩組患者卵巢顆粒細(xì)胞凋亡率比較(±s, %)

注：與對(duì)照組比較, aP＜0.05

組別 例數(shù) 卵巢顆粒細(xì)胞凋亡率TEAS 組 30 13.67±2.14a對(duì)照組 30 19.58±3.69 t 7.589 P 0.000

2. 2 兩組患者臨床結(jié)局比較

TEAS 組患者的獲卵數(shù)明顯多于對(duì)照組, 優(yōu)質(zhì)胚胎率及臨床妊娠率均明顯高于對(duì)照組, 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。兩組患者受精率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見(jiàn)表2。

表2 兩組患者臨床結(jié)局比較(±s, %)

表2 兩組患者臨床結(jié)局比較(±s, %)

注：與對(duì)照組比較, aP＜0.05

組別 例數(shù) 獲卵數(shù)(個(gè)) 受精率 優(yōu)質(zhì)胚胎率 臨床妊娠率TEAS 組 30 7.86±3.69a 71.43(5/7) 100.00(5/5)a 46.67(14/30)a對(duì)照組 30 5.64±3.72 66.67(4/6) 25.00(1/4) 20.00(6/30)

3 討論

女性隨著年齡增長(zhǎng)， 卵母細(xì)胞衰老進(jìn)程加速， 導(dǎo)致卵子質(zhì)量下降， 是高齡女性生育力顯著降低的關(guān)鍵［1-3］。觀察閉鎖卵泡的超微結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)， 顆粒細(xì)胞內(nèi)的凋亡小體數(shù)與卵母細(xì)胞質(zhì)量呈負(fù)相關(guān)［4］。表明顆粒細(xì)胞凋亡在選擇優(yōu)勢(shì)卵泡和閉鎖卵泡的過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。Lee 等［5］的研究報(bào)道， 觀察34 個(gè)IVF-ET 周期中的330 個(gè)卵母細(xì)胞發(fā)現(xiàn)， 妊娠組顆粒細(xì)胞凋亡率明顯低于未妊娠組。提示顆粒細(xì)胞凋亡的發(fā)生率可用于預(yù)測(cè)IVF-ET 結(jié)局。

中醫(yī)針刺在增加獲卵數(shù)、改善卵細(xì)胞質(zhì)量等方面有一定的優(yōu)勢(shì)。TEAS 由于其無(wú)創(chuàng)傷、疼痛小等優(yōu)點(diǎn)， 越來(lái)越受到臨床醫(yī)生和患者的熱愛(ài)［5-8］。TEAS 可以調(diào)節(jié)機(jī)體神經(jīng)-內(nèi)分泌系統(tǒng)和卵巢局部微環(huán)境， 釋放多種生物活性物質(zhì)， 產(chǎn)生一系列的生物學(xué)效應(yīng)， 從而促進(jìn)卵泡發(fā)育成熟、改善卵母細(xì)胞質(zhì)量。有報(bào)道顯示， TEAS 可以通過(guò)提高卵泡液中的干細(xì)胞因子水平， 抑制卵泡顆粒細(xì)胞凋亡， 提高卵母細(xì)胞發(fā)育潛能， 改善IVF-ET 結(jié)局［9-12］。

本研究采用TUNEL 法檢測(cè)卵巢顆粒細(xì)胞凋亡率的結(jié)果顯示， TEAS 組患者卵巢顆粒細(xì)胞凋亡率為(13.67±2.14)%，明顯低于對(duì)照組的(19.58±3.69)%， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。TEAS 組患者的獲卵數(shù)明顯多于對(duì)照組， 優(yōu)質(zhì)胚胎率及臨床妊娠率均明顯高于對(duì)照組， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。兩組患者受精率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。上述結(jié)果表明， 卵巢顆粒細(xì)胞過(guò)度凋亡可能通過(guò)調(diào)控卵泡異常閉鎖影響卵母細(xì)胞質(zhì)量、胚胎質(zhì)量及IVF-ET 妊娠結(jié)局。

綜上所述， TEAS 療法可能通過(guò)抑制卵巢顆粒細(xì)胞過(guò)度凋亡減少卵泡異常閉鎖， 保證卵母細(xì)胞正常發(fā)育成熟， 進(jìn)而改善卵母細(xì)胞發(fā)育潛能， 提高IVF-ET 治療結(jié)局。