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        MS-222對鳊魚麻醉?;钸\輸效果的研究

        2019-05-30 01:55:50丁亞濤汪之和王林林施文正
        水產(chǎn)科學(xué) 2019年3期
        關(guān)鍵詞:?;?/a>鳊魚魚體

        丁亞濤,汪之和,2,3,王林林,施文正,2

        (1.上海海洋大學(xué) 食品學(xué)院,上海 201306; 2.國家淡水水產(chǎn)品加工技術(shù)研發(fā)分中心(上海),上海 201306; 3.上海水產(chǎn)品加工及貯藏工程技術(shù)研究中心,上海 201306 )

        我國漁業(yè)資源豐富,品種繁多。2016年,我國水產(chǎn)品總產(chǎn)量為6.90×107t,同比增長3.01%[1]。由于我國地域遼闊,水產(chǎn)養(yǎng)殖量大,為滿足廣大消費者對不同地區(qū)鮮活水產(chǎn)品的需求,水產(chǎn)品?;钸\輸顯得十分重要。

        中國消費者長期以來喜食鮮活水產(chǎn)品,在水產(chǎn)品運輸中通常采用有水?;钸\輸,但效率較低,成本較高,有必要進一步改善加強。水產(chǎn)品?;畹哪康氖窃诮档瓦\輸成本的基礎(chǔ)上提高其存活率,通過物理或化學(xué)措施降低其新陳代謝,創(chuàng)造較適宜的生存環(huán)境,從而延長其存活時間,提高水產(chǎn)品價值。目前魚類運輸方式各種各樣,大部分運輸主要通過增加水中溶解氧水平、改變水溫、調(diào)整鹽度和麻醉等方式實現(xiàn)提高運輸量和存活率,延長魚類保活時間[2-3]。國內(nèi)外現(xiàn)已開發(fā)出的?;罘椒ㄖ饕袃羲ū;?、增氧?;?、低溫保活、麻醉?;睢⒈鶞?zé)o水?;畹龋煌;罘椒ǖ牟僮髟怼⑻攸c和適用對象不同[4-5]。其中麻醉?;钸\輸就是通過抑制神經(jīng)系統(tǒng)的敏感性,降低水產(chǎn)動物對外界環(huán)境的刺激反應(yīng),使其處于休眠的麻醉狀態(tài),新陳代謝速率和呼吸強度均有所降低,從而提高運輸存活率[6]。應(yīng)用于水產(chǎn)品?;钸\輸?shù)幕瘜W(xué)麻醉劑就有30多種,最常用的麻醉劑有MS-222(間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽)、丁香酚和二氧化碳等。MS-222具有易溶于水、見效快、復(fù)蘇時間短,且對處理過的水產(chǎn)品及人體接觸均無毒害作用等優(yōu)點,是目前唯一被美國食品藥物管理局批準(zhǔn)能用于食用魚的麻醉劑。缺點是MS-222溶液具有酸性,在麻醉?;顣r會對魚體產(chǎn)生影響[7-9]。丁香酚是一種經(jīng)常使用的植物提取物類麻醉劑,具有較強麻醉效果、廉價易得、溶解性好及對環(huán)境無危害等優(yōu)點而被廣泛應(yīng)用于活魚運輸[5],缺點是復(fù)蘇時間較長,具有揮發(fā)性,麻醉過程中藥效會逐漸下降。一定含量的CO2對魚類及其他水產(chǎn)動物具有麻醉效果,利用CO2作為麻醉劑,不僅可以提高活魚運輸效果,還能降低運輸成本,與其他麻醉劑相比,優(yōu)點在于不需要休藥期,經(jīng)CO2處理過的魚可以直接銷往市場[4],缺點是麻醉時間和復(fù)蘇時間相對較長,麻醉水溶液的CO2含量范圍很窄,最終的麻醉劑量很難控制,且只對部分魚有麻醉作用[10]。

        鳊魚(Parabramispekinensis)是我國養(yǎng)殖量比較大的品種之一,營養(yǎng)價值較高,含有豐富的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)、不飽和脂肪酸、維生素D等物質(zhì),此外,還含有大量的磷和煙酸[11]。筆者采用MS-222對鳊魚進行麻醉,研究鳊魚在不同質(zhì)量濃度MS-222麻醉液中的麻醉效果,包括進入不同麻醉過程和蘇醒過程的行為變化的時間和呼吸頻率的變化,并研究麻醉后鳊魚在不同水溫及魚水比中的存活率和保活過程中水質(zhì)指標(biāo)及魚體指標(biāo)的變化,以期為鳊魚的?;钸\輸提供參考數(shù)據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 試驗材料

        試驗鳊魚購于上海市古棕路農(nóng)工商,體長30~35 cm,體質(zhì)量500~600 g。

        1.2 試驗儀器與試劑

        5B-3N便攜式氨氮測定儀(上海連華科技有限公司)、ZC-10智能型超級恒溫水槽(寧波天恒儀器廠)、UV-1800PC紫外可見分管光度計(上海美譜達儀器有限公司)、Siemens KK26E12TI冰箱(青島海爾特種電器有限公司)、JPB-607型便攜式溶解氧測定儀(上海精密科學(xué)儀器有限公司)、FE20實驗室pH計[梅特勒—托利儀器(上海)有限公司]、車載速凍冰箱A50(佛山艾凱電器有限公司);MS-222(上海安譜實驗科技股份有限公司)。

        1.3 試驗方法

        1.3.1 不同質(zhì)量濃度MS-222對鳊魚麻醉效果的影響

        根據(jù)預(yù)試驗確定的6個質(zhì)量濃度梯度,分別為20、40、60、80、100、120 mg/L,將暫養(yǎng)1 d的鳊魚放入盛有以上不同質(zhì)量濃度的麻醉液中,觀察鳊魚的行為特征并記錄鳊魚進入不同麻醉階段的時間、蘇醒時間和復(fù)蘇率。

        在MS-222的作用下,鳊魚在麻醉和復(fù)蘇階段表現(xiàn)出一系列不同的行為變化,本試驗參考文獻[12-13]中的分期標(biāo)準(zhǔn),結(jié)合鳊魚的實際情況,將鳊魚的麻醉過程分為6個時期(表1),復(fù)蘇過程分為3個時期(表2)。

        復(fù)蘇率/%=n2/n1×100%

        式中,n1為試驗魚尾數(shù),n2為試驗后處于活體狀態(tài)的魚尾數(shù)。

        1.3.2 不同質(zhì)量濃度MS-222對鳊魚呼吸頻率影響

        將MS-222配制成0、20、40、60、80、100和120 mg/L 7個質(zhì)量濃度梯度,將鳊魚放入溶液開始計時,分別記錄鳊魚在60、120、180、240、300、360、420 s時間段內(nèi)的呼吸次數(shù)。呼吸頻率以1 min內(nèi)鳊魚鰓蓋張合次數(shù)來表達。

        1.3.3 鳊魚臨界溫度的測定

        采用梯度降溫的方式,當(dāng)水溫為10~20 ℃,降溫速率為3 ℃/h;水溫5~10 ℃,降溫速度2 ℃/h;水溫低于5 ℃,降溫速度1 ℃/h;觀察并記錄魚體呼吸規(guī)律,將魚體出現(xiàn)咧鰓現(xiàn)象(未死亡狀態(tài))的水溫作為其臨界溫度[14]。

        表1 麻醉程度分期及魚類行為特征

        表2 魚體復(fù)蘇過程分期及行為特征

        1.3.4 不同質(zhì)量濃度MS-222對鳊魚?;畲婊盥实挠绊?/p>

        選擇呼吸頻率一致的鳊魚作為試驗對象,在40、60、80、100 mg/L這4個質(zhì)量濃度梯度進行試驗,記錄鳊魚的存活率。

        1.3.5 不同水溫對鳊魚保活存活率的影響

        選擇呼吸頻率一致的鳊魚作為試驗對象,在2、7、15、20 ℃這4個溫度梯度進行試驗,記錄鳊魚的存活率。

        1.3.6 不同魚水比對鳊魚保活時間的影響

        在7 ℃和MS-222質(zhì)量濃度60 mg/L條件下,對照組和麻醉組分別選擇不同魚水比(2∶1、1∶1、1∶3、1∶5)進行試驗,記錄鳊魚?;顣r間。

        1.3.7 鳊魚?;钸^程中水體指標(biāo)的測定

        在?;钸^程中的不同時間段,用離心管分別從?;钕渲腥?5 mL水,用PB-607A便攜式溶解氧測定儀測定氧含量;用5B-3N便攜式氨氮測定儀測定氨氮含量;用FE20實驗室pH計測定pH。

        菌落總數(shù)的測定:在?;钸^程中的不同時間段,用離心管從?;钕渲腥? mL水,使用國標(biāo)GB 4789.2—2016方法進行測定。

        1.3.8 鳊魚保活過程中魚體指標(biāo)的測定

        麻醉組和對照組在?;钸^程中的不同時間段隨機采樣,進行指標(biāo)測定。

        肌肉中乳酸和糖原的測定:采用測試盒(南京建成生物工程研究所)測定。

        肌肉pH測定方法:準(zhǔn)確稱量2 g魚肉于燒杯中,加0.85%生理鹽水18 mL,均質(zhì)后靜置0.5 h,使用pH計測定。

        血清生化指標(biāo)的測定:自魚尾靜脈采血,血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶、葡萄糖、尿素、乳酸脫氫酶和肌酐采用試劑盒(南京建成生物工程研究所)測定。

        1.4 數(shù)據(jù)處理

        使用Microsoft Excel 2007和SPSS 19.0軟件進行分析,在單因素方差分析的基礎(chǔ)上采用Duncan多重比較,統(tǒng)計值為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差,P<0.05表示數(shù)據(jù)之間差異顯著;利用Origin 8.0軟件繪制相關(guān)圖表。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 不同MS-222質(zhì)量濃度下鳊魚的行為特征及復(fù)蘇率

        鳊魚在不同質(zhì)量濃度MS-222下進入不同麻醉程度的時間和復(fù)蘇時間及復(fù)蘇率見表3、表4。參考文獻[12]對有效質(zhì)量濃度標(biāo)準(zhǔn)的劃定,本試驗將有效質(zhì)量濃度定義為:3 min之內(nèi)鳊魚的麻醉程度達到Ⅳ期,在清水中5 min內(nèi)達到蘇醒程度Ⅲ期的質(zhì)量濃度。

        表3 鳊魚在不同質(zhì)量濃度MS-222麻醉液中進入不同麻醉程度的時間 s

        注:“—”表示試驗過程中沒有出現(xiàn)該列中所表示的麻醉狀態(tài);同列平均值間上標(biāo)字母不同者差異顯著(P<0.05).下同.

        表4 鳊魚在不同質(zhì)量濃度MS-222麻醉液麻醉后的復(fù)蘇情況

        由表3、表4可知,隨著MS-222質(zhì)量濃度的增大,鳊魚進入相同麻醉時期的時間縮短,而完全復(fù)蘇的時間延長。在不同質(zhì)量濃度麻醉下,鳊魚進入麻醉和復(fù)蘇的各個階段差異顯著。在較低的質(zhì)量濃度下(低于20 mg/L)魚體最終會維持在輕度麻醉期。質(zhì)量濃度為40 mg/L時,鳊魚達到麻醉第Ⅳ期時間約218 s,不能進入第Ⅵ期;在質(zhì)量濃度為100 mg/L和120 mg/L時,魚體復(fù)蘇時間長,復(fù)蘇后活力差,復(fù)蘇率分別為75%和50%,且在進入麻醉和復(fù)蘇各個階段的時間差異顯著。而當(dāng)MS-222質(zhì)量濃度為60 mg/L和80 mg/L時,魚體達到麻醉第Ⅳ期的時間小于180 s,復(fù)蘇率為100%,至復(fù)蘇第Ⅲ期的時間較長,可能由于達到深度麻醉和休克期,需要較長時間復(fù)蘇。

        2.2 不同質(zhì)量濃度MS-222中鳊魚呼吸頻率的變化

        呼吸頻率是反映鳊魚麻醉程度的重要指標(biāo)之一,鳊魚在不同質(zhì)量濃度的MS-222中呼吸頻率的變化見圖1。除在前60 s呼吸頻率略微先上升外,在整個麻醉過程中,呼吸頻率呈下降趨勢,且相同時間內(nèi),隨著MS-222質(zhì)量濃度的增加,呼吸頻率逐漸下降,與郭豐紅等[13]的研究結(jié)果相符。對照組呼吸頻率幾乎不變化,在低質(zhì)量濃度(20~40 mg/L)的MS-222中,鳊魚未出現(xiàn)咧鰓現(xiàn)象,在水中能游動,且隨著時間的延長其呼吸頻率不斷下降,直至慢慢靜止在水中;在MS-222質(zhì)量濃度60~80 mg/L時,隨著MS-222質(zhì)量濃度的升高,呼吸頻率下降速率逐漸加快,可見在此質(zhì)量濃度范圍內(nèi),產(chǎn)生的應(yīng)激反應(yīng)較?。欢贛S-222質(zhì)量濃度100~120 mg/L時,呼吸頻率在短時間內(nèi)直線下降,出現(xiàn)咧鰓現(xiàn)象,說明魚體在短時間產(chǎn)生了較大的應(yīng)激反應(yīng)。

        圖1 鳊魚在不同質(zhì)量濃度中各個時間段呼吸頻率的變化

        2.3 鳊魚低溫?;畹呐R界溫度

        隨著水溫的降低,鳊魚的呼吸頻率不斷下降,當(dāng)溫度降至10 ℃時,鳊魚基本上不活動,靜止在水中,溫度降至約5 ℃時,鳊魚逐漸平躺在水中,呼吸次數(shù)減緩,當(dāng)溫度降至2 ℃,鳊魚的呼吸極不規(guī)律,偶爾咧鰓,接近死亡,因此2 ℃可以被認為是鳊魚低溫?;畹呐R界溫度。

        2.4 不同質(zhì)量濃度MS-222對鳊魚?;畲婊盥实挠绊?/h3>

        不同麻醉劑質(zhì)量濃度對鳊魚?;畹拇婊盥视绊懸妶D2。隨著?;顣r間的延長,鳊魚的存活率下降,40 mg/L質(zhì)量濃度下鳊魚存活率16 h前無變化,16~24 h降低,保活24 h后鳊魚存活率降至50%,60 mg/L質(zhì)量濃度下鳊魚存活率24 h內(nèi)無變化,?;?4 h后存活率仍為90%,80 mg/L質(zhì)量濃度下鳊魚存活率12 h后下降,24 h后存活率降至10%,100 mg/L鳊魚存活率12 h全部死亡。

        2.5 不同溫度對鳊魚?;畹拇婊盥视绊?/h3>

        溫度對鳊魚保活率的影響見圖3、圖4。20 ℃麻醉組和對照組?;?2 h存活率分別為60%和40%,24 h后均全部死亡;15 ℃麻醉組和對照組保活12 h存活率分別為80%和60%,24 h存活率分別降至60%和20%,在7 ℃時麻醉組和對照組?;?2 h存活率為100%,24 h麻醉組和對照組存活率分別降至80%和60%,2 ℃麻醉組和對照組?;? h鳊魚出現(xiàn)死亡,24 h均全部死亡。

        圖2 不同質(zhì)量濃度MS-222對鳊魚?;畹拇婊盥视绊?/p>

        圖3 不同溫度對對照組鳊魚存活率的影響

        圖4 不同溫度對麻醉組鳊魚存活率的影響

        2.6 不同魚水比對鳊魚保活時間的影響

        鳊魚?;钸\輸中魚水比與存活時間的關(guān)系見圖5。鳊魚保活時間隨著魚水比的增加而延長,麻醉組在魚水比自2∶1降至1∶1時,?;顣r間延長9 h,比對照組延長2 h,自1∶3降至1∶5的保活時間延長5 h,比對照組延長1 h。在魚水比1∶5時,麻醉組?;顣r間比對照組延長7 h。

        圖5 麻醉組和對照組魚水比對鳊魚?;顣r間的影響

        2.7 鳊魚保活過程中水體指標(biāo)的變化

        2.7.1 氨氮的變化

        ?;铋_始前,?;钕鋬?nèi)水為經(jīng)過充分曝氣2 d的自來水,氨氮含量幾乎為0,隨著保活時間的延長,水中氨氮的含量先是快速上升,而后升速減緩,其中對照組?;?4 h氨氮質(zhì)量濃度升至4.3 mg/L,麻醉組?;?4 h氨氮質(zhì)量濃度升至3.05 mg/L(圖6)。

        圖6 鳊魚?;钸^程水質(zhì)氨氮濃度的變化

        2.7.2 溶解氧水平的變化

        溶解氧水平在保活中呈現(xiàn)下降的趨勢,對照組和麻醉組開始?;顣r的溶解氧水平均為6.8 mg/L,12 h后麻醉組和對照組溶解氧水平分別降至3.5 mg/L和1.8 mg/L,24 h后麻醉組和對照組溶解氧水平分別降至2.1 mg/L和0.9 mg/L(圖7)。

        2.7.3 pH和微生物的變化

        在保活過程中pH為6.9~7.8,略有上升(圖8);在?;钸^程中對照組和麻醉組水體中菌落總數(shù)上升速率均呈現(xiàn)先慢后快的現(xiàn)象,麻醉組略低于對照組;麻醉組和對照組保活24 h,菌落數(shù)量分別升至2.61 log(cfu/mL)和2.75 log(cfu/mL)(圖9)。

        圖7 鳊魚?;钸^程水質(zhì)溶氧量的變化

        圖8 鳊魚保活過程水質(zhì)pH的變化

        圖9 鳊魚?;钸^程水質(zhì)菌落總數(shù)的變化

        2.8 鳊魚?;钸^程中肌肉相關(guān)成分的變化

        糖原和乳酸兩者的趨勢呈負相關(guān)。糖原含量隨?;顣r間延長而下降,?;?4 h后麻醉組糖原含量降低了19.1%;乳酸含量隨?;顣r間延長而上升,麻醉組?;?4 h后乳酸含量上升了78.1%(圖10)。保活過程中麻醉組和對照組隨?;顣r間的延長魚體肌肉pH呈現(xiàn)下降趨勢,麻醉組?;?4 h,pH下降了0.21,下降趨勢低于對照組。

        圖10 ?;钸^程肌肉中乳酸、糖原、pH的變化

        2.9 鳊魚?;钸^程中血清生化指標(biāo)的變化

        魚體在?;钸^程血清生化指標(biāo)的變化見表5。麻醉組鳊魚?;?2 h和24 h之后, 乳酸脫氫酶活性分別上升了23.8%和102.2%,麻醉前后變化不顯著,保活12 h和24 h之后均顯著變化。在麻醉保活中,12 h內(nèi)血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性變化不顯著,24 h時則增長了4.4倍,但明顯低于對照組。麻醉初期血糖變化不明顯,?;?4 h后升至3.83 mmol/L,增幅達67.2%,但仍大大低于對照組(239%)的增幅。?;钸^程中尿素、肌酐都隨?;顣r間的增加而上升,麻醉24 h后,尿素增加了32.2%,肌酐上升了177.4%,但二者的增幅均低于對照組的增幅。

        表5 鳊魚麻醉運輸后血清生化指標(biāo)的變化

        注:同行平均值間上標(biāo)字母不同者差異顯著(P<0.05).

        3 討 論

        3.1 不同質(zhì)量濃度MS-222對鳊魚麻醉、復(fù)蘇過程的行為特征及呼吸頻率的影響

        MS-222質(zhì)量濃度低于20 mg/L時,鳊魚不能進入麻醉期;MS-222質(zhì)量濃度大于100 mg/L時,魚體麻醉后復(fù)蘇率降低。主要原因可能是MS-222進入魚體后主要聚集在其脾臟、肝臟中,質(zhì)量濃度過高,大劑量的麻醉劑會麻痹呼吸和舒縮中樞,導(dǎo)致魚體死亡[15]。隨著MS-222質(zhì)量濃度的升高,呼吸頻率下降速率逐漸加快,這一研究與MS-222麻醉鱖魚(Sinipercachuatsi)[15]、金魚(Carassiusauratus)[16]的結(jié)果一致。試驗發(fā)現(xiàn),在MS-222質(zhì)量濃度60~80 mg/L時,魚體產(chǎn)生的應(yīng)激反應(yīng)較小;而在MS-222質(zhì)量濃度為100~120 mg/L時,魚體在短時間產(chǎn)生了較大的應(yīng)激反應(yīng)。綜合考慮,MS-222麻醉鳊魚的有效質(zhì)量濃度應(yīng)選擇60~80 mg/L,這與MS-222麻醉褐牙鲆(Paralichthysolivaceus)[17](有效麻醉質(zhì)量濃度60 mg/L)的結(jié)果相似,與麻醉鱖魚[15](有效麻醉質(zhì)量濃度200~220 mg/L)和加州鱸魚(Micropterussalmoides)[18](有效麻醉質(zhì)量濃度10~20 mg/L)的結(jié)果相差較大。表明不同魚種之間MS-222麻醉效果存在一定差異。

        3.2 MS-222質(zhì)量濃度、水溫和魚水比對鳊魚存活率的影響

        試驗?;?4 h后,MS-222質(zhì)量濃度為60 mg/L時鳊魚的存活率高于其他質(zhì)量濃度。這可能由于低質(zhì)量濃度的MS-222對鳊魚的麻醉較淺,達不到深度麻醉;在高質(zhì)量濃度下,鳊魚進入深度麻醉時間過快,超過魚體的耐受值,對魚體產(chǎn)生一定毒害作用,導(dǎo)致魚體死亡[16]。

        溫度是影響魚類生理狀況的重要因素之一,魚類為變溫動物,其生理狀況受環(huán)境溫度的影響較大,有相應(yīng)的生存溫度帶和最佳生存溫度,當(dāng)超出生存溫度范圍時,機體會出現(xiàn)一系列的不良反應(yīng),導(dǎo)致機體免疫力低下甚至死亡[19]。20 ℃時麻醉組和對照組鳊魚?;?4 h后均全部死亡,這由于溫度過高魚體的新陳代謝速率較高,氧氣消耗量大[20],致使水中溶解氧水平過低,魚體缺氧而死亡;15 ℃麻醉組和對照組鳊魚保活24 h存活率較低,這可能由于麻醉條件下能降低魚體新陳代謝,減少了氧氣消耗,減緩魚體死亡;7 ℃時?;?4 h麻醉組和對照組存活率較好,可能由于在較低溫度下,魚體新陳代謝較低,同時能夠滿足魚體氧氣的消耗,說明該溫度下鳊魚皮膚呼吸和鰓呼吸結(jié)合效率最好;2 ℃麻醉組和對照組保活6 h鳊魚出現(xiàn)死亡,24 h均全部死亡,這可能由于在該臨界溫度下,魚體本身需要提供能量來應(yīng)對外界低溫,呼吸頻率下降,無法滿足魚體用氧而致其死亡,說明鳊魚不適合臨界溫度保活。從各溫度段考察,在7 ℃條件下麻醉鳊魚的保活時間較長、存活率較高。

        在水產(chǎn)品保活運輸中,降低魚水比是保活運輸需要考慮的重點之一[21],由試驗結(jié)果可知,麻醉組對鳊魚?;钣兄e極影響,在各個時間階段的?;顣r間均高于對照組,所以綜合考慮選擇魚水比1∶3麻醉條件進行?;钸\輸,符合?;钸\輸經(jīng)濟利益最大化。

        3.3 ?;钸^程中水體指標(biāo)的變化對鳊魚存活率的影響

        氨氮是一種神經(jīng)毒性物質(zhì),如果在水中的含量過高,魚體血漿中的氨排出量就會相應(yīng)減少,從而導(dǎo)致血漿中氨含量升高,引起毒性反應(yīng)[22]。高含量的氨氮會對魚體造成傷害,多數(shù)魚類的養(yǎng)殖氨氮水平應(yīng)低于2.79 mg/L[23],其中對照組和麻醉組保活24 h分別比標(biāo)準(zhǔn)高出54.1%和9.3%。由此可知,氨氮含量的升高會影響鳊魚?;顣r間的延長。另一方面,麻醉能降低魚體代謝產(chǎn)生氨氮,減緩水質(zhì)惡化,更利于鳊魚的存活。在試驗過程中觀察到,保活開始前,水清澈無味,而?;?4 h后水微發(fā)黃,變得渾濁。

        溶解氧對于魚類等水生生物的生存至關(guān)重要,多數(shù)魚類在溶解氧水平低于3~4 mg/L時就難于生存[24],由試驗結(jié)果可見,?;?2 h后麻醉組溶解氧水平是同一時間對照組溶解氧水平的1.9倍,在這一時間之后對照組鳊魚出現(xiàn)死亡,麻醉組鳊魚存活率為100%,這可能由于麻醉減少了鳊魚對溶解氧的消耗,延長了?;顣r間。

        綜上可知,氨氮含量的上升和溶解氧水平的下降是導(dǎo)致鳊魚死亡的重要原因。

        在?;钸^程中pH變化為6.9~7.8,略有上升,與淡水魚水體pH 6.6~8.5基本一致[25],所以水質(zhì)pH的變化對鳊魚影響不大。菌落總數(shù)是評價水質(zhì)污染程度的重要指標(biāo)[26],在漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)中要求大腸桿菌(Escherichiacoli)密度低于5個/mL[25]。在?;钸^程中對照組和麻醉組?;?4 h菌落數(shù)量麻醉組略低,水質(zhì)中細菌總數(shù)增加,會引起耗氧量增加,也會導(dǎo)致水質(zhì)渾濁度增加,從而影響魚體?;顣r間。

        3.4 麻醉?;顚~肌肉相關(guān)成分和血清生化指標(biāo)的影響

        當(dāng)魚體處于饑餓狀態(tài),血液中的葡萄糖不能滿足魚體的消耗,魚類利用肝糖原的能力差,主要分解肌糖原;乳酸與糖原兩者之間的變化存在密不可分的關(guān)系,在肌肉、血液和肝臟3種組織中乳酸、糖原和葡萄糖的含量水平有著相應(yīng)的關(guān)系[27]。試驗發(fā)現(xiàn),麻醉組糖原下降速率和乳酸上升速率均小于對照組,原因可能是由于麻醉組鳊魚新陳代謝低于對照組,當(dāng)魚體處于饑餓狀態(tài),血液中的葡萄糖不能滿足魚體的消耗,魚類會分解肌糖原,在缺氧條件下進行無氧代謝,糖原分解產(chǎn)生大量乳酸[27]。試驗發(fā)現(xiàn),?;?4 h,麻醉組魚體肌肉pH呈現(xiàn)下降趨勢,低于對照組。這可能是由于鳊魚肌肉中糖原在無氧呼吸產(chǎn)生能量的同時生成了乳酸,乳酸在肌肉中不斷積累,引起肌肉pH的變化;麻醉組代謝較低,乳酸積累少,故pH降幅低于對照組的降幅[28]。

        麻醉能夠緩解魚體在?;钸^程中的應(yīng)激反應(yīng)。其中,乳酸脫氫酶是糖代謝中催化丙酮酸轉(zhuǎn)化成乳酸的酶,無氧酵解、心肌梗死、肝臟疾病、肌肉損傷等均會導(dǎo)致乳酸脫氫酶的升高[29],麻醉組鳊魚?;?2 h和24 h之后,乳酸脫氫酶活性均顯著變化,可能是魚體無氧呼吸導(dǎo)致肝臟、心肌受損,乳酸脫氫酶活性上升,這也是魚體在?;钸^程中死亡的原因之一。此外,麻醉組乳酸脫氫酶的活性均低于對照組,說明麻醉可以減少魚體肝臟和心肌的受損。谷草轉(zhuǎn)氨酶是肝臟中連接糖、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)代謝的重要酶,正常情況下血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性很低而且相對穩(wěn)定,當(dāng)肝臟、心肌受到損傷時血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性會升高[30-31],在麻醉?;钪?,麻醉前后和保活12 h內(nèi)谷草轉(zhuǎn)氨酶活性變化不顯著,24 h時顯著變化,但變化趨勢明顯低于對照組,說明?;钸^程中,魚體心肌、肝臟受到一定程度的影響,但麻醉能在一定程度上減少鳊魚心肌、肝臟受到的損傷。

        血糖除受胰島素和腎上腺素的控制外,還受機體的各種因素調(diào)節(jié)。因此,機體血糖含量處于一種動態(tài)平衡狀態(tài),很容易發(fā)生變化[32]。麻醉初期血糖變化不明顯,?;?4 h顯著變化,但變化趨勢均低于對照組。這與麻醉條件下減緩了糖原的分解有關(guān)。另外,在無氧條件下發(fā)生酵解產(chǎn)生乳酸,乳酸大部分會進入血液,血液中乳酸量增加會對血紅蛋白運輸氧的能力產(chǎn)生影響,造成血液氧結(jié)合量減少[33],從而導(dǎo)致魚體供氧量減少,這可能是影響魚體存活的重要因素之一。

        尿素、肌酐含量的變化能夠反映腎功能的代謝情況,尿素也是維持血液滲透壓的主要成分[34],腎臟機能發(fā)生障礙,血尿素和肌酐的含量會升高[32],?;钸^程中尿素、肌酐均隨?;顣r間的增加而上升,麻醉24 h后,尿素和肌酐顯著變化,但二者的增幅均低于對照組,說明在整個保活過程中腎功能受到一定程度的損傷,這也是造成魚體出現(xiàn)死亡的原因之一。綜合以上指標(biāo)可見,麻醉組?;钚Ч糜趯φ战M,這與麻醉?;畹拇婊盥瘦^高是一致的。

        4 結(jié) 論

        試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),麻醉液質(zhì)量濃度為60~80 mg/L時,魚體達到麻醉第Ⅳ期時間均小于200 s,復(fù)蘇時間相對較短,復(fù)蘇率為100%。此時應(yīng)激反應(yīng)相對較小,為鳊魚?;钣行樽碣|(zhì)量濃度。7 ℃水溫、魚水比1∶3時?;顣r間最長,魚體存活率最高,水質(zhì)指標(biāo)結(jié)果表明,隨著保活時間的延長,氨氮含量、微生物總量、pH均呈上升趨勢,而溶解氧水平則下降,這是導(dǎo)致鳊魚保活時間縮短和存活率下降的外部原因,麻醉組?;钚Ч黠@好于對照組,說明麻醉能夠減緩鳊魚氨氮的代謝、減緩水質(zhì)的惡化、延長鳊魚的?;?。魚體指標(biāo)結(jié)果表明,隨著保活時間的增加,麻醉?;罱M肌肉中糖原、pH下降,乳酸含量上升。血清指標(biāo)中乳酸脫氫酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、血糖、尿素、肌酐均有顯著增加,從而影響到鳊魚的生理機能,但其變化幅度均小于對照組。由此可見,使用MS-222對鳊魚進行麻醉保活能夠減緩鳊魚的應(yīng)激反應(yīng),降低在?;钸^程中魚體受到的損傷,延長?;顣r間,提高存活率。

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