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        食用菌菌種的制作與保存

        2019-05-22 09:32:46喬紅順
        農(nóng)民致富之友 2019年9期
        關鍵詞:母種恒溫箱原種

        喬紅順

        食用菌菌種的質(zhì)量對食用菌生產(chǎn)至關重要,菌種的好壞、菌種的保存、直接影響到食用菌的產(chǎn)品質(zhì)量和產(chǎn)量、效益和成敗,所以我們要制作優(yōu)良的食用菌菌種,更要有優(yōu)良的菌種保存方法,以保存菌種的生活力和優(yōu)良性狀,確保菌種純種、無污染。

        一、菌種制作 食用菌菌種分三種即母種(一級種)、原種(二級種)、栽培種(三級種)

        1.首先制作母種(一級種)

        1.1菌種采集 選擇健壯無病蟲害的食用菌子實體。經(jīng)表面消毒后,放在無菌的厚紙上,使子實體菌褶向下,在通風條件下經(jīng)過12--24h,等子實體放出孢子后,將紙折疊起來風干,放入塑料袋中,里面放幾粒干硅膠,封好口,放入2--4℃冰箱中,可以保存起來長期備用。

        1.2母種培養(yǎng)基制作 配方:馬鈴薯200g、瓊脂20g、葡萄糖20g、純凈水1000ml。先把馬鈴薯切成大約1 cm大的小方塊,放入1000ml純凈水中煮30min,過濾后加入瓊脂、0.2-0.3%的磷酸二氫鉀、再加入20g葡萄糖,溶解后分別裝入試管,每個試管裝量1/5-1/4,用棉塞封好試管口,外加塑料膜扎緊,放入壓力滅菌鍋1.3㎏/cm滅菌30min,待溫度降至60℃將試管擺成30-35度傾斜面,冷卻后觀察幾天,無受到雜菌污染即可接種,孢子液用滅菌的自來水將孢子稀釋,在無菌操作環(huán)境下將孢子懸浮液移到試管瓊脂斜面上,在25℃下培養(yǎng),很容易萌發(fā)生長成菌絲,然后用石蠟封口置于4-5℃恒溫箱中可保存6個月。

        2.制作原種(二級種)原種培養(yǎng)基制作

        將木屑78%、麥麩20%、糖1%、石膏1%加入水拌勻(100kg料加125kg水),培養(yǎng)基原料拌勻后拿試紙測ph值,ph值在6-7為宜,然后裝入大口的罐頭瓶至瓶肩部,將培養(yǎng)料壓平壓緊,抹干凈瓶的口培養(yǎng)料,拿完好無破損的塑料薄膜扎緊瓶口,放入壓力滅菌鍋1.4-1.5㎏/cm滅菌1.5-2h,冷卻至25℃即可進行無菌接種,用接種針從母種試管斜面上挑取少量菌絲體接入瓶中,接種后在25℃恒溫箱中培養(yǎng)30d菌絲可長滿,即可作為原種(二級種)。

        3.制作栽培種(三級種)

        栽培種就是將原種擴大繁殖,栽培種培養(yǎng)基制作和原種培養(yǎng)基制作一樣,裝瓶方法一樣,但是因為栽培種菌種數(shù)量遠遠大于原種數(shù)量,生產(chǎn)上栽培種滅菌需要利用室外專門的常壓滅菌室滅菌,即蓋一個兩米見方的滅菌室,里面支一口大鐵鍋注滿水,鍋上放木板,將裝入瓶中的培養(yǎng)基整整齊齊碼在木板上方,點火加熱至100℃,保持10-12h,待自然冷卻至不燙手轉(zhuǎn)入室內(nèi),到培養(yǎng)基降溫至25℃即可進行無菌接種。一瓶750ml的原種可以接70-75瓶左右的栽培種,接種后在25℃恒溫環(huán)境中培養(yǎng)30天菌絲長滿,即可作為栽培種(三級種)。原種和栽培種在培養(yǎng)菌絲期間每3d要檢查一次,以去除被雜菌污染的菌種并做無害化處理。

        二、食用菌菌種的保存方法

        食用菌菌種保存的原理是利用低溫、干燥、缺氧、饑餓等手段來降低菌絲體的新陳代謝作用,以保持菌種在生理、形態(tài)、遺傳上的穩(wěn)定性。食用菌菌種保存的方法有很多,但對于中小規(guī)模的食用菌生產(chǎn)者來說,一些簡單的土辦法經(jīng)濟實惠,效果也不錯,這里主要介紹4種常用的食用菌母種保存方法:

        1.斜面低溫保存母種法

        這是最普遍最簡單的一種保存方法,也是在食用菌的生產(chǎn)中最常用的菌種保存方法。菌種在斜面培養(yǎng)基上成熟后,放到恒溫箱中5℃保存,每隔7個月移植轉(zhuǎn)管一次,在菌種的保存過程中要保證瓊脂濕度適宜,此方法適宜90%以上的食用菌菌種的保存,但不宜保存草菇菌種,因為草菇是高溫型菌種,要在10-12℃保存,4-6℃低溫容易引起菌絲體死亡。

        斜面低溫保存母種法保存時間有限,需要經(jīng)常轉(zhuǎn)管移植,以補充菌絲體的營養(yǎng)、水分。這種保存方法雖然簡單易行,但缺點是對菌絲體創(chuàng)傷多,對人力消耗大,在食用菌大規(guī)模生產(chǎn)中還是要把此方法和其他方法結合起來,互相補充,減少轉(zhuǎn)接次數(shù)。

        2.石蠟封口保存母種法

        把蠟紙裁成7cm見方,放入高度酒精中浸泡2-3min,點燃酒精燈,將母種試管管口在酒精燈上烤一圈,用浸泡好的蠟紙扎緊試管口,將蠟紙完全浸入融化的石蠟液體中,使蠟紙緊緊貼在試管壁上,等石蠟凝固后檢查不漏氣,放到恒溫箱中5℃保存。

        3.玻璃紙封口保存母種法

        用明膠15g、硫酸銅2g、美藍指示劑2滴溶于100ml熱水中,配制成封口劑,將培養(yǎng)好的母種試管口朝下蘸上封口劑,貼上消毒好的玻璃紙。放到恒溫箱中5℃保存,此法可保存菌種一年以上。

        4.菌絲體液體保存法

        用馬鈴薯200g、葡萄糖20g、水1000ml配置好營養(yǎng)液,取菌絲塊放入營養(yǎng)液中,有菌絲的一面朝上,接種好后在適宜的溫度下培養(yǎng),放到恒溫箱中5℃保存,此方法菌種成活率高,保存時間長,一般33個月成活率為91.9%、42個月88.9%。

        5.麥粒保存法

        首先選無病蟲害的小麥,在20℃的水里浸泡5h,使麥粒的含水量在25%,取出涼干麥粒表面水分,裝入試管,每個試管只能裝1/3,然后用高壓鍋在壓力120kg/cm下保持40min。將試管從高壓鍋中取出搖散麥粒,接入一滴菌絲懸浮液并搖一搖,使菌絲懸浮液均勻地沾滿麥粒,放在溫度25℃環(huán)境中培養(yǎng),待大多數(shù)麥粒出現(xiàn)菌絲即可拿出,放在5℃恒溫箱中保存。此方法可保存母種一年半以上。

        食用菌菌種接種要嚴格執(zhí)行無菌操作規(guī)程。放在恒溫箱里的菌種不可過分擁擠。溫度要控制好,不可過高或者過低,溫度過低培養(yǎng)基結冰脫水,菌絲容易衰老死亡,溫度過高會加快細胞新陳代謝,達不到長期保藏的目的。移植轉(zhuǎn)管前要使保藏的菌種置于適宜溫度下活化,才能進行。菌種培養(yǎng)時間不可過長,以免降低菌絲體活力,保存時環(huán)境濕度不宜過高,以防霉菌通過棉塞進入試管內(nèi),污染菌種。

        菌種保存要有標簽,標簽必須規(guī)范、清晰,字跡清晰可見,標簽上應標明菌種的名稱、菌種的代數(shù)、接種的時間等。一級種、二級種、三級種要分別保存。菌種還需專人保存,嚴格防止混淆,菌種保存過程中要防止不相關人員進入保存室,防至菌種污染。

        (作者單位:041600洪洞縣農(nóng)業(yè)行政綜合執(zhí)法大隊)

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