高曉娟 李攀 楊志偉

（1寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院銀川醫(yī)院 750001 2寧夏醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 寧夏銀川 750001）

梅毒(syphilis)是由梅毒螺旋體(treponema pallidum)引起的慢性感染，其傳染源是梅毒患者，梅毒螺旋體經(jīng)過(guò)破損的皮膚黏膜，通過(guò)性接觸、胎傳及輸血等主要傳播途徑進(jìn)入人體后，可通過(guò)淋巴系統(tǒng)和血液系統(tǒng)播散至全身各個(gè)器官。如果不進(jìn)行治療，這種疾病會(huì)在數(shù)年內(nèi)經(jīng)過(guò)一系列臨床階段發(fā)展，并導(dǎo)致不可逆轉(zhuǎn)的神經(jīng)、心血管等全身多個(gè)組織器官的損害[1]。梅毒的診斷不僅依靠臨床表現(xiàn)，冶游史，更需要實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果的支持，隨著入院后對(duì)傳染病原體檢查的普及，隱性梅毒感染者通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)檢查出，很多梅毒患者是體檢中得知自己感染梅毒螺旋體，在此之前無(wú)臨床癥狀，或因?yàn)橛蚕吗岬淖杂?，及二期梅毒的皮膚損害，以為是皮疹等，未引起重視，此時(shí)實(shí)驗(yàn)室結(jié)果顯得尤為重要，這也對(duì)實(shí)驗(yàn)室診斷方法敏感性、特異度有更高的要求，積極研究炎性細(xì)胞因子IL-17與梅毒感染過(guò)程中的變化，探討其是否可作為實(shí)驗(yàn)室診斷梅毒的一種檢測(cè)方法。

1 資料與方法

1.1 資料收集 本實(shí)驗(yàn)的梅毒患者組選自2018年11月～2019年7月就診于寧夏醫(yī)科大學(xué)銀川醫(yī)院皮膚性病門(mén)診的患者，診斷均符合梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)（ws273-2018）早期梅毒組（小于兩年）24例，晚期梅毒組（大于兩年）30例，收集健康體檢者30例作為對(duì)照組。研究對(duì)象排除標(biāo)準(zhǔn)：HIV陽(yáng)性感染，全身炎癥史，自身免疫性疾病史，其他潛在的急性或慢性疾病史，接受抗炎藥物治療的患者，免疫功能低下的患者，使用抗生素或免疫抑制劑的患者；本研究通過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)審核。

1.2 方法 收集入選梅毒組及正常對(duì)照組人群5mL靜脈血于促凝管中，室溫靜置10min，待凝固后，3000rpm/min，離心15min，吸取部分血清檢測(cè)TRUST滴度，試劑為上海榮盛有限公司生產(chǎn)，并記錄檢測(cè)結(jié)果；用羅氏電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)梅毒螺旋體特異性抗體，COI值＞1.00確診為梅毒患者；檢測(cè)HIV抗體,排除HIV感染者；吸取1mL血清于帶有螺旋帽蓋的EP管中，標(biāo)注序號(hào)后凍存于-80℃冰箱，待所有樣本收集結(jié)束后，用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)IL-17的血清含量，試劑盒廠家為達(dá)科為試劑有限公司。所有操作均按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法 運(yùn)用SPSS25.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)早晚期梅毒血清中的IL-17做Kruskal-Wallis差異性統(tǒng)計(jì)分析，并將IL-17與log2TRUST滴度做斯皮爾曼的相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 IL-17梅毒早期血清濃度為5.822±4.363pg/ml，晚期為6.901±3.776pg/ml，正常對(duì)照組為 3.827±4.616pg/ml，早期梅毒組和晚期梅毒組均較正常對(duì)照組顯著升高，差異顯著，P分別為0.041和0.000，均＜0.05；早期梅毒組和晚期梅毒組比較，差異不顯著，P=0.157＞0.05（圖 1）。

2.2 早期梅毒組，滴度為1:4一例，1:8三例，1:16五例，1:32八例，1:64六例，1:128一例；晚期梅毒組：滴度為1:1八例，1:2為十例，1:4八例，1:8四例；正常對(duì)照組TRUST滴度均為陰性（表1）。

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2.3 IL-17與log2TRUST滴度的相關(guān)性分析結(jié)果：

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3 討論

梅毒（syphilis）是由梅毒螺旋體感染引起的一種性傳播疾病。它一直困擾著患者和醫(yī)生的是其千變?nèi)f化的臨床表現(xiàn)，嚴(yán)重的晚期損害，還有它的診斷困境，這也造成了臨床上一定的漏診和誤診[2-3]。由于是性傳播疾病，誤診易引起被檢測(cè)者的心理焦慮和家庭矛盾，提供準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)室診斷，對(duì)梅毒的控制和預(yù)后有積極作用，并能減少醫(yī)患矛盾。

Th17細(xì)胞是CD4+T輔助細(xì)胞的一個(gè)亞群，具有產(chǎn)生細(xì)胞因子IL-17的特征[4-5]。IL-17作為一種促炎細(xì)胞因子，在組織損傷的誘導(dǎo)和發(fā)展中起著關(guān)鍵作用，在梅毒感染早期觸發(fā)炎癥細(xì)胞的增殖和募集，協(xié)調(diào)和精確控制T細(xì)胞反應(yīng)可以促進(jìn)病原體的根除，減少梅毒螺旋體的傳播，從而保護(hù)宿主免受感染[6]。定量RT-PCR顯示梅毒皮損中的INF-mRNA較健康皮膚強(qiáng)于正常皮膚,顯示出強(qiáng)烈的“TH17”信號(hào)，如IL-23p19、IL-17和IL-22的mRNA水平均有升高所證明[7]，同時(shí)證實(shí)梅毒皮損中的INF-γ和IL-17均來(lái)源于CD8+T細(xì)胞，抗梅毒免疫反應(yīng)由INF-γ/IL-17雙陽(yáng)性T細(xì)胞介導(dǎo)，與本研究中的結(jié)果一致，早期梅毒血清中IL-17的含量既有升高，參與機(jī)體清除病原體的過(guò)程。本研究中，IL-17在梅毒晚期患者血清中較早期梅毒略有降低，可能是INF-γ刺激的血漿細(xì)胞表達(dá)B7-H1（PD-L1），從而抑制T細(xì)胞功能，再加上INF-γ水平的升高，可能會(huì)造成免疫抑制環(huán)境，導(dǎo)致病原體清除率降低。梅毒螺旋體感染造成機(jī)體的晚期損害，多是由淋巴細(xì)胞、大顆粒細(xì)胞和漿細(xì)胞組成的細(xì)胞內(nèi)浸潤(rùn)，伴隨著嚴(yán)重程度不同的血管病變等組織病理學(xué)原因，造成各組織器官功能障礙。IL-17在梅毒感染階段的血清表達(dá)水平高于正常對(duì)照組，說(shuō)明IL-17有參與梅毒感染機(jī)體的過(guò)程，但能否作為檢測(cè)指標(biāo)還需要更多研究結(jié)果的支持。

甲苯胺紅不加熱血清素試驗(yàn)（TRUST）作為篩查梅毒感染者的非特異性抗體試驗(yàn)，檢測(cè)的是梅毒螺旋體破壞機(jī)體組織后，釋放磷脂類物質(zhì)，操作方便，常用于梅毒治療效果的檢測(cè)。在本研究中，其滴度高低變化與血清中IL-17水平的高低無(wú)相關(guān)性，可能由于TRUST滴度影響因素較多，如患者自身的免疫功能，年齡等，且IL-17不是造成組織損傷的主要參與因子，故兩者無(wú)相關(guān)性。