王可 童晶晶 云悅

摘? ?要：酶標板是酶聯(lián)免疫反應試驗的一個重要載體工具，主要起到承載被測液體的作用，隨著酶標儀功能的研發(fā)和推廣，酶標板也廣泛應用于生命科學研究、化學合成、食品/藥品成分分析等領域。但是當酶標板進行多孔、多板、多項目的試驗操作時，過程相當繁復且講究，所以需要有效的配套設備予以輔助。本文概述了目前酶標板輔助裝置及配件的研究現(xiàn)狀，總結了其在使用操作過程中的突出問題，分析了幾項研究所涉及方法和裝置的特點及優(yōu)勢，并對其發(fā)展予以展望。

關鍵詞：酶標板? 輔助裝置? 酶聯(lián)免疫吸附試驗

隨著酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測技術的廣泛應用，如何快速準確地滴加檢測樣品是提高試驗效率的關鍵步驟[1]。酶標板（ELISA PLATE）作為酶聯(lián)免疫反應試驗的一個重要載體工具，主要起到承載被測液體的作用。對于多個項目、多個版塊同時進行的酶聯(lián)免疫試驗是一項勞動密集型工作，操作過程非常繁瑣而且容易出錯[2]。目前，酶標板的功能開發(fā)主要側重于降低檢測過程中各成分之間的相互影響及減少檢測物質活性的喪失，也有少數(shù)研究報道了為避免因人為操作而引起誤差而設計的酶標板輔助裝置及試驗方法。

1? 酶標板概述

酶標板系列產品多選用光學透明純聚苯乙稀制造，采用特殊工藝而成，酶標板類型主要根據(jù)酶標儀進行選擇，從構造上可分為可拆卸和不可拆卸，有6孔、12孔、24孔、48孔、96孔之分，對于吸附試驗可分為高結合力酶標板、中結合力酶標板和氨基化酶標板。在細胞試驗中，酶標板需進行伽瑪射線滅菌處理，可以使細胞達到最佳吸附狀態(tài)，能促進原生代細胞：如神經細胞、傳代細胞和腫瘤細胞等動物與人體細胞的生長和繁殖[3]。同時，隨著酶標儀功能的研發(fā)和推廣，酶標板也可應用于低紫外區(qū)的DNA、RNA定量及純度分析和蛋白定量，酶活、酶動力學檢測，酶聯(lián)免疫測定，細胞毒性分析，細胞凋亡檢測，報告基因檢測及G蛋白偶聯(lián)受體分析（GPCR）等試驗的檢測[4]。目前，酶標板已被食品工業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生、生物制藥、農產品加工、衛(wèi)生防疫等領域廣泛應用。

但是，對于多個項目、多個版塊同時進行，酶標板的操作是整個試驗過程中工作量最為巨大的一部分，所以，研究者們對酶標板的使用進行了優(yōu)化，設計了多種關于酶標板的輔助操作裝置，以期為試驗操作提供有效、便捷的方法和技術，保證試驗數(shù)據(jù)的真實可靠。

2? 酶標板外部的輔助操作裝置

酶標板在使用時，常常需要對酶標板進行一個外部條件的控制，此時，只有利用合適的酶標板輔助操作裝置才能有效地控制酶標板內部反應的有序進行。

2.1 加樣輔助操作裝置

ELISA試驗的開展往往涉及大量的樣品數(shù)量，但是傳統(tǒng)的加樣方式，不僅速度慢，而且加樣的準確率也較低，故通過相關試驗人員的研究，得到高效率的加樣輔助操作裝置是十分有利于試驗的順利開展。蘇志春[5]等發(fā)明了一種新型酶標板加液感應器，其主要部件為板體、板條，所有板條均勻布滿板孔并與指示板上指示燈相連，當加入的液體液位到達指示元件位置后，指示燈發(fā)出電平信號，方便試驗人員進行液體滴加情況的實時監(jiān)測。王可等[6]提供了一種新型酶標板輔助操作裝置，依靠光學原理增強了酶標板的視覺效果，避免了試驗操作中的漏滴錯滴現(xiàn)象，確保了多孔同時加樣的準確性。

2.2 孵育輔助操作裝置

藍翊文等[7]將孵育箱設置了頂蓋，同時在放置層設置檔口和彈簧，使各酶標板之間互相獨立，互不干擾，有效地控制了操作過程中的偶然因素。王永峰[8]在孵育裝置中使酶標板的空心孵育腔底部增加加熱片，使其具有導熱振蕩功能，能夠使酶標板在孵育過程中反應液得到充分的混合均勻;同時還安裝了計時器和滑動蓋板，以便使其在避光條件下準確的反應。

2.3 洗板輔助操作裝置

洗板操作在酶標板使用過程中必不可少，是否有效去除殘留物質會直接影響底物顯色及讀板等結果的顯示。侯杰[9]在酶標板的清洗裝置是通過安裝有主機箱、清洗臺等的一側均勻的間隔安裝清洗管和回液管，便于裝置設置單行清洗、跳行清洗和板洗等的清洗方式，增加了裝置清洗方式，便于裝置的使用，并使酶標板可以重復多次使用。朱艷等[10]酶標板自動洗板裝置通過三種不同的清洗液的交替使用，采用控制器控制和對四通閥門的控制實現(xiàn)沖洗方式的自動切換，以便調整沖洗速度，使洗板模式多樣化，洗板的效果更明顯。

3? 酶標板內部的輔助操作裝置

酶標板外部的輔助操作裝置只能有限地控制試驗的外部條件的變化，而在實際操作中，樣品與底物的反應往往處于酶標板的內部，所以，應該設法使酶標板內部的樣品和底物反應更加充分。袁振宏等[11]通過采用彈性膜的反應孔底面，并設置拉伸板，使酶標板的功能兼具平底和V型底的酶標板的優(yōu)點，從而檢測效果也大大提高。何韶衡[12]在傳統(tǒng)酶標板的基礎上，在酶標板孔內設置了一個空隙，使反應時的接觸面積大大增加。將酶標板孔內部的形狀重新設計，得到半球狀的底部和漏斗型的中部以及凸出壁的上部，使得反應物之間的接觸機會增加，交叉污染的機會減少。

4? 結語

酶標板的輔助操作裝置在設計上總結了試驗過程中的問題和經驗，設計理念逐漸趨向于專業(yè)化、產品化發(fā)展。但多數(shù)研究及專利在產品轉化方面存在不足，某些工作只是停留于表面，沒有真正落實到產品研發(fā)。相信隨著生化技術領域的不斷發(fā)展，酶標板相關配套裝置的研發(fā)及市場應用前景也將更為明朗。

參考文獻

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[3] 曾俊，張丹桂，王革非，等.酶標儀參數(shù)及性能檢測[J].汕頭大學醫(yī)學院學報，2008，21（3）：176-177.

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[6] 王可，朱妮娜，武小暉，等.酶標板輔助操作裝置[P].中國專利：CN207472893U，2018-06-08.

[7] 藍翊文，趙夢露，林顯玉，等.一種酶標板孵育架[P].中國專利：CN207992226U，2018-10-19.

[8] 王永峰.一種酶標板孵育檢測器[P].中國專利：CN208156011U，2018-11-27.

[9] 侯杰.一種酶標板清洗裝置[P].中國專利：CN207971145U，2018-10-16.

[10]朱艷，李永霞，代艷艷，等.一種酶標板自動洗板裝置[P]. 中國專利：CN206997192U，2018-02-13.

[11]袁振宏，張宇，何敏超，等.一種多功能酶標板[P].中國專利：CN204666633U，2015-09-23.

[12]何韶衡.一種自由組裝的酶標板[P].中國專利：CN106198960A，2016-12-07.