李 偉

（南陽(yáng)農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)校動(dòng)物科學(xué)系，河南南陽(yáng) 473000）

隨著我國(guó)畜牧經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，蛋雞養(yǎng)殖數(shù)量越來(lái)越多，已經(jīng)形成規(guī)模化、集約化的養(yǎng)殖模式，在蛋雞養(yǎng)殖過(guò)程中，各種抗生素不合理的使用不僅導(dǎo)致了耐藥性致病菌大量繁殖，還造成蛋、肉等畜產(chǎn)品中大量的藥物殘留，對(duì)人們的身體健康存在著潛在的威脅，同時(shí)蛋雞的糞便和污水，造成嚴(yán)重的二次環(huán)境污染，影響人類(lèi)的生活和生存（吳東，2015）。微生物制劑益生元、合生元、益生菌，具有無(wú)毒作用、無(wú)殘留、無(wú)污染、無(wú)耐藥性、低成本等優(yōu)點(diǎn)，其中益生菌被廣泛應(yīng)用畜禽養(yǎng)殖中 （金升藻等，2015；韓玲等，2005）。飼用微生物制劑是由畜禽體內(nèi)正常微生物以及生長(zhǎng)因子通過(guò)生物發(fā)酵工藝制成的一種具調(diào)節(jié)保持腸道微生物平衡、提高動(dòng)物生產(chǎn)性能和飼料轉(zhuǎn)化率、增強(qiáng)畜禽機(jī)體免疫功能的復(fù)合微生物制劑（胡昌艷等，2016；程遠(yuǎn)等，2014）。許多研究證明復(fù)合微生物制劑可改善蛋雞的產(chǎn)蛋性能，提高產(chǎn)蛋率、產(chǎn)蛋量和平均蛋質(zhì)量，降低料蛋比（王啟軍等，2015）。復(fù)合微生物制劑對(duì)提高蛋雞生產(chǎn)性能的報(bào)道比較多，但是對(duì)蛋雞免疫機(jī)能報(bào)道比較少。因此，本試驗(yàn)以復(fù)合微生物制劑為研究對(duì)象，研究其對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能和免疫機(jī)能的影響，為復(fù)合微生物制劑在蛋雞養(yǎng)殖過(guò)程中的應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要試劑與儀器 復(fù)合微生物制劑主要包括枯草芽孢桿菌、乳酸桿菌、乳酸、檸檬酸等，枯草芽孢桿菌和乳酸桿菌≥100萬(wàn)cfu/g，由廣州廣牧生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)；禽用免疫球蛋IgG、IgM、IgA ELISA Kit試劑盒購(gòu)于伊萊瑞特生物科技有限公司；900-1型隔水式恒溫培養(yǎng)箱由上海一恒科技儀器有限公司生產(chǎn)；普通離心機(jī)由北京諾亞威儀器儀表有限公司生產(chǎn)，全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀由德國(guó)eppendorp公司生產(chǎn)；采血管、采血針、EP管等常規(guī)的試劑及儀器由本實(shí)驗(yàn)室提供。

1.2 日糧配制 參照 NRC（1998）和《NY/T 33—2004雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》中蛋雞的營(yíng)養(yǎng)需要配制基礎(chǔ)日糧，在配制的過(guò)程中不添加任何微生物制劑（表 1）。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物與飼養(yǎng)管理 采用單因素設(shè)計(jì)試驗(yàn)，選用37周齡產(chǎn)蛋雞360只隨機(jī)分為4組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30只，1組為對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)2、3、4組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.5%、1.0%、1.5%復(fù)合微生物制劑，預(yù)試驗(yàn)7 d，試驗(yàn)期28 d。每個(gè)試驗(yàn)組的每個(gè)重復(fù)單獨(dú)給料，自由飲水。按照常規(guī)的飼養(yǎng)管理方式進(jìn)行飼養(yǎng)管理，試驗(yàn)雞采用上、中、下3層全階梯籠養(yǎng)，每籠3只雞，每天光照l(shuí)7 h。按照免疫程序進(jìn)行免疫。1.4 指標(biāo)測(cè)定及方法

1.4.1 生產(chǎn)性能測(cè)定 在試驗(yàn)期間每日15：00撿蛋稱(chēng)重，記錄每組雞的產(chǎn)蛋數(shù)量、蛋重、投料量及剩料量，試驗(yàn)結(jié)束測(cè)定生產(chǎn)性能指標(biāo)。

產(chǎn)蛋率/%=產(chǎn)蛋數(shù)／蛋雞數(shù)量×100%；

平均蛋重/g=總產(chǎn)蛋重（g）／總產(chǎn)蛋數(shù)（枚）；

日均采食量/g=（投料量-回收料量）／總雞數(shù)；

料蛋比=日采食量（g）/日平均蛋重（g）；

商品蛋合格率/%=合格蛋數(shù)/總產(chǎn)蛋數(shù)×100。

1.4.2 免疫指標(biāo)測(cè)定 在試驗(yàn)后的1、14、28 d，每個(gè)試驗(yàn)組隨機(jī)抽取15只試驗(yàn)雞，用采血針翅下采血2 mL，離心分離血清，-20℃保存。按照試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定血清中免疫球蛋IgG、IgM、IgA含量。

1.5 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)結(jié)果用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”來(lái)表示，用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 19.0對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較與分析，用P＜0.05表示差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)合微生物制劑對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響由表2可知，在試驗(yàn)期間，2組、3組、4組的產(chǎn)蛋率均高于1組，其中3組和4組與1組相比分別提高4.13%、4.09% （P＜0.05），2組與1組相比差異不顯著（P＞0.05），2組、3組和4組相比差異不顯著（P ＞ 0.05）；2組、3組、4組的平均蛋重均高于1組，其中，3組和4組與1組相比分別提高8.11%、8.08% （P＜0.05），2組與1組相比差異不顯著（P＞0.05）；2組、3組和4組相比差異不顯著（P＞0.05）；2組、3組、4組的料蛋比均低于1組，2組與1組相比差異不顯著 （P＞0.05），2組、3組和4組相比差異不顯著（P＞0.05）。3組和4組與1組相比降低 12.45%、11.20%（P ＜ 0.05）。 2組、3組、4組商品合格率和日均采食量均高于1組，但差異不顯著（P＞0.05）。

表2 復(fù)合微生物制劑對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

2.2 復(fù)合微生物制劑對(duì)蛋雞免疫指標(biāo)的影響由表3可知，在試驗(yàn)后的1 d，2組、3組、4組血清中IgG均高于1組，差異性不顯著（P＞0.05），在試驗(yàn)后的 14、28 d，2組、3組、4組血清中 IgG 均高于 1組，3組和4組與1組相比分別提高33.28% 、31.42% 、19.51% 、18.47% （P ＜ 0.05），1組和2組之間差異性不顯著（P＞0.05）， 2組、3組、4組之間差異性不顯著（P＞0.05）；在試驗(yàn)后的 1、14、28 d，2 組、3 組、4 組血清中的 IgM 含量均高于1組，但差異性不顯著（P＞0.05）；在試驗(yàn)后的1 d，2組、3組、4組血清中IgG含量均高于1組，差異性不顯著（P>0.05），在試驗(yàn)后的 14、28 d，2組、3組、4組血清中 IgA含量均高于 1組，3組和 4組與 1組相比分別提高 40.32%、38.71%、36.11%、34.72%（P ＜0.05），1組和 2組之間差異性不顯著 （P>0.05），2組、3組、4組之間差異性不顯著（P>0.05）。

表3 復(fù)合微生物制劑對(duì)蛋雞血清中IgG、IgM、IgA含量的影響mg/mL

3 討論

3.1 飼料中添加復(fù)合微生物制劑對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響 復(fù)合微生物制劑由多種益生菌通過(guò)發(fā)酵工藝加工而成，該制劑適應(yīng)多種條件和宿主，具有提高動(dòng)物生產(chǎn)性能和飼料轉(zhuǎn)化率，增強(qiáng)畜禽機(jī)體免疫功能，改善養(yǎng)殖環(huán)境，減少污染等優(yōu)點(diǎn)，常用的微生物菌類(lèi)主要有乳酸菌類(lèi)、芽孢桿菌類(lèi)和酵母類(lèi)，其中乳酸菌類(lèi)和芽孢桿菌類(lèi)用的比較多（胡昌艷等，2016；程遠(yuǎn)等，2014）。相關(guān)研究表明在飼料中添加益生菌等復(fù)合微生物制劑可提高畜禽的生產(chǎn)性能（姜軍坡等，2017；王琳等，2015）。本試驗(yàn)研究表明，1.0%和1.5%添加組蛋雞的產(chǎn)蛋率和平均蛋重分別較對(duì)照組提高4.13%、4.09%、8.11%、8.08% （P＜0.05），料蛋比分別較對(duì)照組降低 12.45%、11.20%（P ＜ 0.05），0.5%、1.0%和 1.5%添加組的商品合格率和日均采食量均高于1組（P＞0.05）。胡昌艷等（2016）研究表明在海蘭褐蛋雞的基礎(chǔ)日糧中添加一定量的復(fù)合微生物制劑可以顯著提高產(chǎn)蛋率和平均蛋重，降低蛋重比。王啟軍等（2015）報(bào)道微生物制劑可以提高蛋雞的生產(chǎn)性能。復(fù)合微生物制劑通過(guò)調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道內(nèi)微生物平衡，可促進(jìn)胃腸道內(nèi)正常菌群生長(zhǎng)與繁殖，抑制病原致病菌群生長(zhǎng)繁殖，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，提高動(dòng)物機(jī)體對(duì)飼料養(yǎng)分的吸收率，同時(shí)也可改善產(chǎn)蛋雞的生殖道環(huán)境，從而提高蛋雞的生產(chǎn)性能。

3.2 飼料中添加復(fù)合微生物制劑對(duì)蛋雞免疫機(jī)能的影響 免疫球蛋白是誘導(dǎo)動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生體液免疫應(yīng)答主要物質(zhì)，免疫蛋白主要包括IgG、IgM、IgA，這些免疫在動(dòng)物體液免疫中發(fā)揮非常重要的作用（王曉珊，2015）。免疫球蛋白IgG主要由脾臟中的漿細(xì)胞產(chǎn)生，在抵抗感染中起著重要作用，IgM在動(dòng)物機(jī)體免疫中出現(xiàn)的最早，是一種高效能的抗體，具有很強(qiáng)的殺菌功能。IgA主要由腸系膜淋巴結(jié)組織中的漿細(xì)胞分泌產(chǎn)生，具有多種抗體活性，主要參與黏膜免疫，并能與相應(yīng)病原微生物結(jié)合，組織病原體黏附到細(xì)胞表面，在局部抗感染中發(fā)揮重要作用（張召興，2017）。因此，血清中的免疫蛋白IgG、IgM、IgA含量在動(dòng)物機(jī)體免疫中起著重要作用。也是評(píng)價(jià)動(dòng)物免疫機(jī)能重要指標(biāo)。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，1.0%和1.5%添加組蛋雞血清中IgG的含量分別較對(duì)照組提高33.28%、31.42%、19.51%、18.47%（P＜0.05），血清中 IgA 含量分別較對(duì)照組提高 40.32%、38.71%、36.11%、34.72%（P＜0.05）。證實(shí)復(fù)合微生物制劑可以提高血清中IgG和IgA含量，因而提高機(jī)體的免疫機(jī)能。胡興義等（2017）報(bào)道在仔豬飼糧中添加干酪乳酸菌、釀酒酵母菌和枯草芽孢桿菌復(fù)合益生菌制劑可顯著增加仔豬空腸黏膜SIgA含量。李云峰等（2011）研究發(fā)現(xiàn)，在仔豬的飼料中添加一定量的枯草芽孢桿菌微生物制劑可顯著提高仔豬腸道黏膜SIgA含量。

4 結(jié)論

在基礎(chǔ)飼料中添加復(fù)合微生物制劑，可以顯著提蛋雞的生產(chǎn)性能和免疫功能，并且以1.0%添加量比較合適。