李 歡

(鳳城市動物疫病預(yù)防控制中心,遼寧鳳城 118100)

兔巴氏桿菌病是多殺性巴氏桿菌引起的各種兔病的總稱，其臨床癥狀主要有以下幾種：全身敗血癥、傳染性鼻炎、地方流行性肺炎、中耳炎、結(jié)膜炎、子宮積膿、睪丸炎和膿腫。該病傳播快，各種年齡的兔均可發(fā)生，但以幼齡或體質(zhì)瘦弱的兔更易感染。

1 細(xì)菌分離和鑒定

1.1 實驗材料

1.1.1 病料來源

無菌條件下，采集病死兔心、血、脾、肝及體腔積液。

1.1.2 培養(yǎng)基及試劑

培養(yǎng)基、化學(xué)試劑及微量發(fā)酵管等。

1.1.3 試驗動物

4月齡試驗兔5只。

1.1.4 藥敏紙片

藥敏紙片由上海市伊華有限公司生產(chǎn)。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查

采取病變組織，將被檢病料做涂片或觸片，待自然干燥后，用火焰固定，革蘭氏染色和瑞士染色，觀察結(jié)果。

1.2.2 細(xì)菌分離的培養(yǎng)

無菌操作，將被檢病料接種于血瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基，于37℃培養(yǎng)24h，觀察結(jié)果。

1.2.3 純化培養(yǎng)

挑取血瓊脂平板上的單個典型菌落接種于血瓊脂平板上進行純化，獲得單個典型菌落。挑取單菌落涂片、染色、鏡檢，如符合巴氏桿菌特性，接種馬丁肉湯增菌。

1.2.4 生化試驗

將馬丁肉湯純培養(yǎng)菌液分別接種葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇、蔗糖、氧化酶、接觸酶、吲哚、脲酶、鳥氨酸脫羧酶生化試驗管，37℃培養(yǎng)7d，每天觀察記錄。

1.2.5 動物接種試驗

挑選健康兔5只，其中試驗兔3只，對照兔2只。取馬丁肉湯純培養(yǎng)菌液給試驗兔頸部皮下各注射1ml。對照兔不接種，隔離飼養(yǎng)。

1.2.6 藥敏試驗

將馬丁肉湯純培養(yǎng)菌液均勻涂布馬丁瓊脂平板，貼上藥敏紙片，置37℃恒溫箱培養(yǎng)24h，觀察結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查結(jié)果

無菌采集病死兔肝、脾、心包液、胸腔液、心血涂片，進行瑞氏染色，見典型的兩極著色的短桿菌。革蘭氏染色為陰性。

2.2 細(xì)菌分離培養(yǎng)結(jié)果

無菌取病死兔心血、肝、脾等組織病料直接涂布在血瓊脂培養(yǎng)基上，經(jīng)37℃培養(yǎng)24h，均見到細(xì)小、濕潤、圓形、微隆起的露珠狀菌落。革蘭氏染色后鏡檢，均為革蘭氏陰性球桿菌。在麥康凱培養(yǎng)基上不生長。

2.3 生化實驗結(jié)果

生化實驗結(jié)果為分解葡萄糖、甘露醇、蔗糖，不分解乳糖、麥芽糖，氧化酶、接觸酶、吲哚、鳥氨酸脫羧酶試驗結(jié)果為陽性，脲酶試驗結(jié)果為陰性。

2.4 動物接種實驗結(jié)果

3只試驗兔食欲稍有減少，臨診癥狀不明顯，突然死亡，鼻孔稍有血跡；病理剖檢變化同病死兔，并從肝、脾、心包液等組織中回收到同一細(xì)菌。對照兔健活。

2.5 藥敏實驗結(jié)果

結(jié)果表示此次分離菌株對氟苯尼考、阿奇霉素、強力霉素、丁胺卡那霉素、卡那霉素高度敏感，對頭孢噻肟、菌必治、四環(huán)素、慶大霉素中度敏感，對氨芐西林、鏈霉素、環(huán)丙沙星、新霉素低度敏感。

3 討論

（1）根據(jù)臨床癥狀、病理解剖、實驗室檢驗和動物接種一系列的試驗，綜合診斷該病為多殺性巴氏桿菌引起的兔地方流行性肺炎。該批兔可能因為運輸過程中所用兔籠被巴氏桿菌污染，也可能是運輸過程中兔體抵抗力下降而導(dǎo)致本病發(fā)生。

（2）家兔鼻黏膜及扁桃體帶有巴氏桿菌，當(dāng)各種應(yīng)激因素造成兔體抵抗力降低時，引起機體發(fā)病，甚至流行。故平時注意加強飼養(yǎng)管理，增強兔體的抵抗力。

（3）對患病兔群可采用中藥“三黃湯”或西藥氟苯尼考、阿奇霉素、強力霉素、丁胺卡那霉素、卡那霉素等，也可在飼料中拌入0.2%的諾氟沙星或2%的土霉素原粉，連用3～5d。建場時兔場與養(yǎng)雞場、養(yǎng)豬場分開，防止巴氏桿菌感染兔。對病兔污染的兔舍用0.3%過氧乙酸徹底消毒，器械用具用0.3%來蘇爾消毒，兔籠用火焰消毒。除了采用消毒、隔離、藥物預(yù)防等綜合預(yù)防措施外，每年還要用巴氏桿菌滅活苗定期預(yù)防接種3～4次。

4 結(jié)論

（1）本次試驗經(jīng)病原分離鑒定確定為兔地方性流行性肺炎。

（2）根據(jù)藥敏實驗結(jié)果，建議發(fā)病兔場使用氟苯尼考等敏感的藥物，疫病得到控制。分離菌株對許多抗生素產(chǎn)生嚴(yán)重的耐藥性，故治療兔巴氏桿菌病時，需嚴(yán)格篩選敏感藥物。