◎ 楊 光，趙 平，郭瑩瑩,丁松喬，王哲明，張 媛，李興霖，宋連寶

（1.黑龍江省質(zhì)量監(jiān)督檢測研究院，黑龍江 哈爾濱 150028；

2.國家農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化監(jiān)測與研究中心（黑龍江），黑龍江 哈爾濱 150028））

全世界都在倡導(dǎo)母乳喂養(yǎng)，但在嬰兒不能食用母乳或母乳不能滿足其生長需求的情況下，嬰幼兒配方乳粉是其必須選擇的營養(yǎng)來源。嬰幼兒配方乳粉的質(zhì)量好壞與嬰幼兒的健康和生長發(fā)育息息相關(guān)。近年來，致病微生物引起的嬰幼兒疾病有阪崎腸桿菌引起的新生兒腦膜炎、小腸結(jié)腸炎和茵血癥，患兒死亡率高達(dá)50%。此外，沙門氏菌感染會(huì)對免疫力較低的嬰幼兒等有嚴(yán)重影響，甚至導(dǎo)致其死亡[1-2]。

目前，GB 10765-2010《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 嬰兒配方食品》中關(guān)于致病菌的限制僅限于沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和阪崎腸桿菌?；诠ぷ鞣e累，除這3項(xiàng)致病菌外，嬰幼兒配方乳粉中還存在其他種類的條件致病菌[1-2]。本文主要對嬰幼兒配方乳粉中的細(xì)菌進(jìn)行篩選與鑒定，對進(jìn)一步的監(jiān)管提供有價(jià)值的數(shù)據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

不同廠家生產(chǎn)的不同批次的嬰幼兒配方乳粉（600批次），一次性無菌平皿，一次性無菌吸管，無菌均質(zhì)袋，一次性無菌接種環(huán)，一次性無菌涂布棒。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與培養(yǎng)基

革蘭氏染色液，平板計(jì)數(shù)瓊脂，結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂，BGLB肉湯，緩沖蛋白凍水，四硫磺酸鈉煌綠增菌液基礎(chǔ)（TTB），亞硒酸鹽胱氨酸增菌液（SC），沙門氏菌顯色培養(yǎng)基，阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基，亞硫酸鉍瓊脂（BS），Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)，凍干血漿，李氏增菌肉湯（LB，LB），李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基平板，PALCAM瓊脂平板，甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂（MYP），改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯（mLST），三糖鐵瓊脂，營養(yǎng)瓊脂（NA），0.1%煌綠溶液，碘液，50%卵黃液，多粘菌素B，亞碲酸鉀卵黃增菌液，萬古霉素（Vm），萘啶酮酸，吖啶黃素，頭孢他啶。

實(shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基的配制與滅菌，均按培養(yǎng)基的配制說明，試驗(yàn)用水為GB/T 6682-2008所規(guī)定的一級水。所用培養(yǎng)基與試劑均按GB 4789.28-2013的要求進(jìn)行驗(yàn)證且符合要求[6]。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

高壓蒸汽滅菌器，潔凈工作臺(tái)，生物安全柜，重力稀釋儀，電子天平，恒溫水浴振蕩器，拍擊式均質(zhì)器，生化培養(yǎng)箱，菌落計(jì)數(shù)儀，光學(xué)顯微鏡及成像系統(tǒng)，全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)系統(tǒng)。

所用儀器均為經(jīng)過計(jì)量部門檢定校準(zhǔn)的儀器，并按時(shí)進(jìn)行維護(hù)與期間核查。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 嬰幼兒乳粉中微生物污染情況[3-5]

2.1.1 菌落總數(shù)檢驗(yàn)[7]

2.1.1.1 樣品的準(zhǔn)備與接種培養(yǎng)

把樣品充分搖晃混勻，無菌操作稱取25 g置無菌均質(zhì)袋中加入225 mL無菌磷酸鹽緩沖液，用拍擊式均質(zhì)器拍打2 min，制成1∶10的樣品勻液。

用無菌吸管吸取樣品勻液1 mL，加入無菌平皿內(nèi)，做兩平行。同時(shí)吸取1 mL稀釋液，做空白對照。及時(shí)將15 mL的冷卻至46 ℃菌落計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基傾注平皿，轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使其混合均勻。36 ℃倒置培養(yǎng)48 h。

2.1.1.2 菌落計(jì)數(shù)

用菌落計(jì)數(shù)器記錄各平皿上的菌落總數(shù)，以CFU·g-1表示。具體計(jì)數(shù)與計(jì)算方法參照GB 4789.2-2016中的規(guī)定。結(jié)果以CFU·g-1計(jì)。

2.1.2 大腸菌群的檢驗(yàn)[8]

2.1.2.1 樣品的準(zhǔn)備與接種培養(yǎng)

把樣品充分搖晃混勻，無菌操作稱取25 g置無菌均質(zhì)袋中加入225 mL無菌磷酸鹽緩沖液，用拍擊式均質(zhì)器拍打2 min，制成1∶10的樣品勻液。

用無菌吸管吸取樣品勻液1 mL，加入無菌平皿內(nèi)，做兩平行。同時(shí)吸取1 mL稀釋液，做空白對照。

及時(shí)將15 mL的冷卻至46 ℃的VRBA培養(yǎng)基傾注平皿，轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使其混合均勻，待凝固后，再加5 mL VRBA覆蓋平板表層。36 ℃倒置培養(yǎng)24 h。

2.1.2.2 菌落的選擇與證實(shí)試驗(yàn)

選取菌落數(shù)在15～150 CFU之間的平板，計(jì)數(shù)平板上的典型可疑菌落。典型菌落為紫紅色，菌落周圍有紅色的膽鹽沉淀環(huán)，菌落直徑為0.5 mm或更大。

從VRBA平板上選取不同類型的典型可疑菌落，分別移種于BGLB肉湯管內(nèi)，36 ℃培養(yǎng)48 h，觀察產(chǎn)氣情況。產(chǎn)氣者為大腸菌群陽性。

2.1.2.3 結(jié)果計(jì)數(shù)

經(jīng)證實(shí)為大腸菌群陽性者，按GB 4789.3-2016規(guī)定進(jìn)行計(jì)數(shù)，結(jié)果以CFU·g-1計(jì)。

2.1.3 沙門氏菌檢驗(yàn)[9]

2.1.3.1 增菌

把樣品充分搖晃混勻，無菌操作稱取25 g置于盛有225 mL的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打2 min，36 ℃培養(yǎng) 8 h。

輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)過的樣品混合物，移取1 mL，轉(zhuǎn)接于10 mL TTB管中，于42 ℃培養(yǎng)24 h，另移取1 mL，轉(zhuǎn)接于10 mL SC管中，于36 ℃培養(yǎng)24 h。

2.1.3.2 分離

用一次性無菌接種環(huán)取增菌液一環(huán)，劃線接種于BS瓊脂平板與沙門氏菌顯色平板，分別于36 ℃培養(yǎng)48 h與24 h，觀察結(jié)果。沙門氏菌在BS瓊脂平板上菌落形態(tài)為黑色有金屬光澤、棕褐色或灰色，菌落周圍培養(yǎng)基可呈黑色或棕色；有些菌株形成灰綠色的菌落，周圍培養(yǎng)基不變；在沙門氏菌顯色平板上呈紫色菌落。

2.1.3.3 鑒定

自選擇性瓊脂平板上選擇典型可疑菌落，接種營養(yǎng)瓊脂（NA）平板，36 ℃培養(yǎng)24 h。選擇單菌落進(jìn)行革蘭氏染色確定菌株的革蘭氏陰性或陽性，選擇GN鑒定卡或GP鑒定卡，利用全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。

2.1.4 金黃色葡萄球菌定量檢驗(yàn)[10]

2.1.4.1 樣品的準(zhǔn)備與接種培養(yǎng)

把樣品充分搖晃混勻，無菌操作稱取25 g置無菌均質(zhì)袋中加入225 mL無菌磷酸鹽緩沖液，用拍擊式均質(zhì)器拍打2 min，制成1∶10的樣品勻液。

吸取1 mL樣品勻液，以0.3 mL、0.3 mL、0.4 mL接種量分別加入三塊Baird-Parker平板，然后用無菌涂布棒涂布整個(gè)平板，注意不要觸及平板邊緣，靜止10 min后，倒置36 ℃培養(yǎng)48 h，觀察結(jié)果。

2.1.4.2 菌落計(jì)數(shù)與確認(rèn)

金黃色葡萄球菌在Baird-Parker平板上呈圓形，表面光滑、凸起、濕潤、菌落直徑為2～3 mm，顏色呈灰色至黑色，有光澤，常有淺色的邊緣，周圍有不透明的沉淀環(huán)，其外常有一清晰帶。當(dāng)用接種針觸及菌落時(shí)具有黃油樣黏稠感。

選擇有典型的金黃色葡萄球菌菌落的平板，且3個(gè)平板所有菌落數(shù)合計(jì)在20～200 CFU之間的平板，計(jì)數(shù)典型菌落數(shù)。

從典型菌落中選取5個(gè)可疑菌落進(jìn)行血漿凝固酶試驗(yàn)，確定是否為金黃色葡萄球菌，并按GB 4789.10-2016規(guī)定計(jì)算結(jié)果。結(jié)果以CFU·g-1計(jì)。

2.1.5 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)[11]

2.1.5.1 增菌

把樣品充分搖晃混勻，無菌操作稱取100 g置含有900 mL已滅菌的緩沖蛋白胨水中，使其充分溶解，36 ℃培養(yǎng) 18 h。

移取1 mL轉(zhuǎn)種于10 mL的mLST-Vm肉湯中，44 ℃培養(yǎng) 24 h。

2.1.5.2 分離培養(yǎng)

搖勻mLST-Vm肉湯培養(yǎng)物，分別取培養(yǎng)物1環(huán)劃線接種于兩塊阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基平板上，36 ℃培養(yǎng)24 h，觀察結(jié)果。

2.1.5.3 鑒定

選取阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基平板上的典型可疑菌落，劃線接種于NA平板，36 ℃培養(yǎng)24 h，用全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。

2.1.5.4 結(jié)果表述

綜合菌落形態(tài)與生化鑒定結(jié)果，以100 g樣品中檢出或未檢出阪崎腸桿菌計(jì)。

2.1.6 單核細(xì)胞增生李斯特是菌檢驗(yàn)[12]

2.1.6.1 增菌

把樣品充分搖晃混勻，無菌操作稱取25 g置于含有225 mL的LB1增菌液的均質(zhì)袋中，拍擊式均質(zhì)器拍擊2 min，30 ℃培養(yǎng)24 h，移取0.1 mL,轉(zhuǎn)種于10 mL LB2增菌液內(nèi)，30 ℃培養(yǎng)24 h。

2.1.6.2 分離

取LB2增菌液劃線接種于李斯特顯色平板和PALCAM瓊脂平板，36 ℃培養(yǎng)48 h，觀察結(jié)果。典型菌落在PALCAM瓊脂平板上為小的圓形灰綠色菌落，周圍有棕黑色水解圈，有些菌落有黑色凹陷；在李斯特顯色平板上為藍(lán)綠色菌落，周圍有一不透明白色暈圈。

2.1.6.3 鑒定

選取平板上的典型可疑菌落，劃線接種于NA平板，36 ℃培養(yǎng)24 h，用全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。

2.1.6.4 結(jié)果表述

綜合菌落形態(tài)與生化鑒定結(jié)果，以25 g樣品中檢出或未檢出單核細(xì)胞增生李斯特氏菌計(jì)。

2.1.7 蠟樣芽孢桿菌的檢驗(yàn)[13]

2.1.7.1 樣品的準(zhǔn)備與接種培養(yǎng)

把樣品充分搖晃混勻，無菌操作稱取25 g置于盛有225 mL無菌磷酸鹽緩沖液的均質(zhì)袋中，拍擊式均質(zhì)器拍打2 min制成1∶10的樣品勻液。

以0.3、0.3、0.4 mL的接種量分別移至3塊MYP瓊脂平板中，用無菌涂布棒涂布整個(gè)平板，注意不要觸及平板邊緣，靜止10 min后，倒置30 ℃培養(yǎng)48 h，觀察結(jié)果。典型菌落為微粉紅色，周圍有白色至淡粉紅色沉淀環(huán)。

2.1.7.2 鑒定

選取平板上的典型可疑菌落，用全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)與根狀生長試驗(yàn)和蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶試驗(yàn)進(jìn)行鑒定。

2.1.7.2.1 全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)

選取平板上的典型可疑菌落，接種NA平板36 ℃培養(yǎng)24 h，選取單菌落進(jìn)行鑒定。

2.1.7.2.2 根狀生長試驗(yàn)

挑取單個(gè)典型可疑菌落按間隔2～3 cm劃平行直線接種于干燥1 d的NA平板上,30 ℃培養(yǎng)48 h，觀察結(jié)果。蠟樣芽孢桿菌呈粗糙山谷狀生長特征，蕈狀芽孢桿菌呈根狀生長特征。

2.1.7.2.3 蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶試驗(yàn)

挑取純培養(yǎng)的單個(gè)典型可疑菌落接種于硫酸錳營養(yǎng)瓊脂平板上，30 ℃培養(yǎng)24 h，并于室溫放置3 d，挑取培養(yǎng)物少許于載玻片上，滴加蒸餾水混勻并涂成薄膜。經(jīng)自然干燥，微火固定后，加甲醇作用30 s后傾去，再通過火焰干燥，于載玻片上滴滿0.5%堿性復(fù)紅，放火焰上加熱持續(xù)1 min，移去火焰，再更換染色液再次加溫染色30 s，傾去染液用潔凈自來水徹底清洗、晾干后鏡檢。觀察有無游離芽胞（淺紅色）和染成深紅色的菱形蛋白結(jié)晶體。除蘇云金芽胞桿菌外，其他芽胞桿菌不產(chǎn)生蛋白結(jié)晶體。

2.1.7.3 結(jié)果計(jì)算

選擇已鑒定確認(rèn)為蠟樣芽孢桿菌的平板，且3個(gè)平板上所有菌落總數(shù)合計(jì)在20～200 CFU，計(jì)數(shù)典型菌落，按GB 4789.14-2014規(guī)定計(jì)算結(jié)果，結(jié)果以CFU·g-1計(jì)。

2.2 不同形態(tài)微生物的分離純化與鑒定

在以上不同微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)中，不同種類的選擇培養(yǎng)基上生長多種不同類型的典型可疑菌落。將可疑菌落進(jìn)行分離純化，接種于NA平板，36 ℃培養(yǎng)24 h，革蘭氏染色鑒定其形態(tài)特征后，用全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)行生化鑒定。

3 結(jié)果與分析

3.1 嬰幼兒配方乳粉微生物污染情況

經(jīng)過對600批次不同品牌的嬰幼兒配方乳粉中菌落總數(shù)的檢驗(yàn)，結(jié)果菌落總數(shù)大多集中在10～100 CFU·g-1的數(shù)量，占總檢驗(yàn)數(shù)量的42.67%；＜10 CFU·g-1的樣品數(shù)量占37.0%，100～1 000 CFU·g-1的樣品數(shù)量占17.67%，1000～10 000 CFU·g-1的樣品數(shù)量占2.0%，而＞100 000 CFU·g-1的樣品數(shù)量僅占0.67%，說明產(chǎn)自的嬰幼兒配方乳粉的微生物污染能夠很好的控制在GB 10765規(guī)定的微生物污染限量指標(biāo)內(nèi)。存在微生物污染風(fēng)險(xiǎn)的樣品依然存在，占檢驗(yàn)樣品總量的3%，生產(chǎn)廠家應(yīng)分析問題找出污染原因，堅(jiān)決杜絕微生物污染風(fēng)險(xiǎn)的存在。結(jié)果見表1。

表1 菌落總數(shù)檢驗(yàn)結(jié)果與分布情況表

3.2 嬰幼兒配方乳粉大腸菌群污染情況

對600批次不同品牌的嬰幼兒配方乳粉進(jìn)行大腸菌群的檢驗(yàn)，結(jié)果600批次樣品均未有大腸菌群的生長，VRBA平板上沒有菌落的生長。說明各生產(chǎn)廠家有效的控制了大腸菌群的污染，能夠讓消費(fèi)者放心購買。結(jié)果見表2。

表2 菌落總數(shù)、大腸菌群、蠟樣芽胞桿菌檢驗(yàn)結(jié)果及分布情況表

3.3 嬰幼兒配方乳粉沙門氏菌污染情況

對600批次不同品牌的嬰幼兒配方乳粉中沙門氏菌進(jìn)行檢驗(yàn)，結(jié)果600批次的樣品經(jīng)增菌、分離、鑒定等實(shí)驗(yàn)均為檢出沙門氏菌，檢出率為0%，但在檢驗(yàn)過程中個(gè)別品牌樣品的沙門氏顯色平板與BS平板上有可疑菌落生長，經(jīng)全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)鑒定非沙門氏菌。說明樣品在生產(chǎn)運(yùn)輸過程中還是受到了一定程度的污染，需嚴(yán)格控制。要分析污染原因，生產(chǎn)無潛在風(fēng)險(xiǎn)的家長放心的嬰幼兒配方乳粉。結(jié)果見表3。

表3 沙門氏菌、阪崎腸桿菌、單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)結(jié)果及分布情況表

3.4 嬰幼兒配方乳粉金黃色葡萄球菌污染情況

經(jīng)過對600批次不同品牌的嬰幼兒配方乳粉中金黃色葡萄球菌的檢驗(yàn)，結(jié)果600批次樣品中金黃色葡萄球菌的檢出率為0%，樣品中金黃色葡萄球菌均為＜10 CFU·g-1。有個(gè)別品牌的樣品在Baird-Parker平板上生長可疑菌落，但經(jīng)鑒定非金黃色葡萄球菌，為其他陽性球菌。可能為生產(chǎn)加工環(huán)節(jié)造成的污染，也會(huì)存在潛在風(fēng)險(xiǎn)，生產(chǎn)廠家需進(jìn)一步排查原因，解決潛在的風(fēng)險(xiǎn)。結(jié)果見表2。

3.5 嬰幼兒配方乳粉阪崎腸桿菌污染情況

對600批次不同品牌的嬰幼兒配方乳粉進(jìn)行阪崎腸桿菌檢驗(yàn)，經(jīng)增菌、分離、鑒定等實(shí)驗(yàn)，結(jié)果有兩個(gè)品牌的14個(gè)批次的樣品檢出了阪崎腸桿菌，檢出率為2.33%，且此兩種品牌的檢出樣品均為2014年以前生產(chǎn)的樣品，此后均為檢出。未檢出阪崎腸桿菌的個(gè)別品牌樣品在增菌、分離后阪崎腸桿菌顯色平板上有可疑菌落生長，全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)鑒定非阪崎腸桿菌，為其他腸桿菌科細(xì)菌。說明某些生產(chǎn)廠家的樣品純在著較大的風(fēng)險(xiǎn)，檢出的應(yīng)立即召回、銷毀，并要求分析污染原因，控制污染源，堅(jiān)決杜絕不合格產(chǎn)品流向市場。未檢出而有可疑菌落生長的產(chǎn)品，生產(chǎn)廠家同樣要找出污染原因，包括生產(chǎn)環(huán)節(jié)與運(yùn)輸環(huán)節(jié)，人員、設(shè)備等均要排查。力爭生產(chǎn)百姓放心健康的合格產(chǎn)品。結(jié)果見表3。

3.6 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌污染情況

600批次的不同品牌嬰幼兒配方乳粉經(jīng)增菌、分離、鑒定等實(shí)驗(yàn)，結(jié)果樣品中均為檢出單核細(xì)胞增生李斯特氏菌。個(gè)別品牌的某些樣品在檢驗(yàn)過程中的李斯特顯色平板與PALCAM平板上有可疑菌落生長，但經(jīng)全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)鑒定均非單核細(xì)胞增生李斯特氏菌，而是其他李斯特氏菌。雖然未檢出單核細(xì)胞增生李斯特氏菌，但是依然存在著有機(jī)會(huì)危害嬰幼兒身體健康的細(xì)菌，需要加以關(guān)注，找出污染原因，消滅污染源生產(chǎn)放心產(chǎn)品。結(jié)果見表3。

3.7 蠟樣芽孢桿菌污染情況

對600批次不同品牌嬰幼兒配方乳粉進(jìn)行檢驗(yàn)，結(jié)果在少數(shù)MYP平板上有可疑菌落生長，但經(jīng)全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)與根生長試驗(yàn)和蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶試驗(yàn)鑒定，結(jié)果均非蠟樣芽孢桿菌，而是其他芽孢桿菌。說明這些品牌的有些產(chǎn)品依然受到芽孢桿菌的污染，依然會(huì)給嬰幼兒的健康帶來危害，需要引起生產(chǎn)廠家的注意，排查污染環(huán)節(jié)，生產(chǎn)無污染的嬰幼兒配方乳粉。結(jié)果見表3。

3.8 不同形態(tài)微生物的分離純化與鑒定

在對600批次不同品牌嬰幼兒配方乳粉進(jìn)行微生物污染進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)，在其致病菌的檢驗(yàn)過程中，在不同的選擇性培養(yǎng)基平板上分離到了很多株典型的可疑菌落，雖非致病性目標(biāo)菌株，但可能為條件致病菌。對各菌株進(jìn)行分離、純化、鑒定，得出所分離得到的非目標(biāo)菌的信息，得到了嬰幼兒配方乳粉中細(xì)菌菌相的構(gòu)成及分布。結(jié)果共分離得到266株細(xì)菌，并對266株細(xì)菌進(jìn)行分離、純化、革蘭氏染色，利用全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)與其他鑒定手段進(jìn)行鑒定，共鑒定出31種細(xì)菌，其中嬰幼兒配方乳粉沙門氏菌檢驗(yàn)過程中選擇性培養(yǎng)基平板上的可疑菌落較多，且經(jīng)鑒定后均為非沙門氏菌，其中泛菌屬的檢出率高，且很多其他菌株為機(jī)會(huì)致病菌，必須得到關(guān)注。結(jié)果見表4。

表4 可疑菌落生化鑒定結(jié)果表

4 總結(jié)

嬰幼兒配方乳粉的生產(chǎn)工藝較為復(fù)雜，殺菌、濃縮工序容易出現(xiàn)質(zhì)量問題，殺菌不徹底造成細(xì)菌總數(shù)過高，導(dǎo)致最終產(chǎn)品微生物超標(biāo)；設(shè)備清洗不徹底、設(shè)備故障等，均容易導(dǎo)致產(chǎn)品大腸菌群和雜質(zhì)超標(biāo)。并且嬰幼兒配方乳粉中營養(yǎng)成分豐富，極其利于微生物的生長繁殖。一旦出現(xiàn)上述質(zhì)量問題，將對嬰幼兒的生長發(fā)育及身心健康造成不利影響。而大多數(shù)情況下，安全監(jiān)管者在嬰幼兒配方乳粉的生物安全監(jiān)測方面處于相對被動(dòng)的局面。

本項(xiàng)目主要對黑龍600批次不同品牌的嬰幼兒配方乳粉的微生物污染情況進(jìn)行分析，包括菌落總數(shù)、大腸菌群、致病菌的檢驗(yàn)，在菌落總數(shù)的檢驗(yàn)過程中得出各品牌的嬰幼兒配方乳粉的菌落總數(shù)控制的較好，僅有0.67%的樣品不合格，2.0%的樣品存在不合格的風(fēng)險(xiǎn)。大腸菌群的檢驗(yàn)結(jié)果顯示所有檢驗(yàn)樣品均為受到大腸菌群的污染。在致病菌的檢驗(yàn)過程中，在分離時(shí)選擇性平板上有可疑菌落生長，但只有阪崎腸桿菌檢出，說明對阪崎腸桿菌的污染控制不到位，需要查明污染原因，并堅(jiān)決杜絕此類產(chǎn)品的出現(xiàn)。

沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、單核細(xì)胞增生李斯特氏菌、蠟樣芽孢桿菌均為未檢出，但也存在選擇性平板上有可疑菌落生長的情況，對可疑菌落進(jìn)行分離、純化、利用全自動(dòng)生化鑒定系統(tǒng)對分離得到的細(xì)菌進(jìn)行鑒定，最終共鑒定出31種細(xì)菌，得到了該批嬰幼兒乳粉中細(xì)菌菌相的構(gòu)成及分布。

本實(shí)驗(yàn)通過系統(tǒng)地對嬰幼兒配方乳粉中的微生物進(jìn)行富集培養(yǎng)，菌種分離，菌種鑒定，再對菌種鑒定結(jié)果進(jìn)行分析統(tǒng)計(jì)，全面了解了嬰幼兒配方乳粉中的菌落分布與構(gòu)成，對嬰幼兒配方乳粉的質(zhì)量監(jiān)督與監(jiān)測和企業(yè)的自行監(jiān)督具有指導(dǎo)意義，并為檢測標(biāo)準(zhǔn)的制定提供有力的參考，更為改變監(jiān)管的被動(dòng)局面提供充分的理論依據(jù)。