2019年7月10日,Journal of Experimental Botany雜志在線發(fā)表了華中農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝植物生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室別之龍教授團(tuán)隊(duì)和澳大利亞塔斯馬尼亞大學(xué)Sergey Shabala教授團(tuán)隊(duì)合作的題為“Tissuespecific respiratory burst oxidase homologue-dependent H2O2signaling to the plasma membrane H+-ATPase confers potassium uptake and salinity tolerance in Cucurbitaceae”的研究論文,該文解析了南瓜耐鹽性強(qiáng)于黃瓜的重要分子生理機(jī)制,主要原因在于南瓜根尖RBOHD在鹽脅迫下產(chǎn)生H2O2信號(hào),通過質(zhì)膜H+-ATPase調(diào)控鉀吸收,進(jìn)而影響南瓜根尖細(xì)胞活力和耐鹽性,而黃瓜鉀吸收受到的調(diào)控則不明顯。
該研究利用細(xì)胞活力染色、非損傷離子選擇性微電極(MIFE)、鉀含量測定、H2O2熒光成像等技術(shù),發(fā)現(xiàn)南瓜耐鹽性強(qiáng)于黃瓜,而且南瓜根尖具有較高的鉀吸收速率、鉀含量和H2O2水平。轉(zhuǎn)錄組研究發(fā)現(xiàn)南瓜根尖85%的差異基因顯著上調(diào),黃瓜只有52%的差異基因顯著上調(diào)。鹽脅迫下南瓜NADPH氧化酶、14-3-3蛋白、質(zhì)膜H+-ATPase及鉀轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因RBOHD、GRF12、AHA1和HAK5顯著上調(diào)表達(dá),黃瓜中則無明顯變化。利用NADPH氧化酶抑制劑DPI對(duì)材料根系進(jìn)行預(yù)處理,結(jié)果發(fā)現(xiàn)添加抑制劑DPI后南瓜根系H2O2形成受阻,GRF12、AHA1、HAK5表達(dá)、質(zhì)膜H+-ATPase活性和鉀吸收速率顯著下降,外源H2O2處理則結(jié)果相反。進(jìn)一步使用CRISPR/Cas9基因編輯和擬南芥轉(zhuǎn)基因手段,驗(yàn)證了南瓜RBOHD產(chǎn)生的H2O2信號(hào),通過質(zhì)膜H+-ATPase調(diào)控鉀吸收和耐鹽性的分子生理機(jī)制。