滕士階，劉小林，徐承來，趙長新，賈 嶸，王 琨，王珍霞

(1.連云港市第二人民醫(yī)院檢驗科，江蘇 連云港 222002；2.長春市中心醫(yī)院干部病房，吉林 長春 130031)

隨著科學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，高新技術(shù)的應(yīng)用，血液分析儀器應(yīng)運而生且越來越先進、功能越來越強大。

臨床對實驗室檢驗質(zhì)量及時效性的要求越來越高，而實驗室則對檢驗儀器的標(biāo)本處理能力和分析效率要求更高，并要求設(shè)備能實現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)化遠程診斷及數(shù)據(jù)傳輸功能的高度自動化、數(shù)字化、智能化。我院新引進一款Sysmex公司新推出的集血液、體液檢測功能為一體的高端智能型全自動血液分析系統(tǒng)XT-4000i。該系統(tǒng)是一種全新理念的臨床血液常規(guī)檢驗和臨床研究功能完美結(jié)合的多功能智能化血液分析系統(tǒng)?，F(xiàn)將臨床應(yīng)用及質(zhì)量控制情況報告如下。

1 檢測原理

1.1白細胞(WBC)分析：XT-4000i血液分析系統(tǒng)采用專用WBC/BAS0和WBC、DIFF檢測通道，激光流式細胞原理結(jié)合細胞化學(xué)熒光染色技術(shù)，對血液細胞或顆粒進行逐個分析和分選，智能系統(tǒng)將激光獲得的熒光信號、散射光信號繪制成WBC/BAS0、WBC/DIFF 2個散點圖，通過分析系統(tǒng)(A.C.A.S)進行結(jié)果分析，從而獲得準(zhǔn)確、可靠的檢測結(jié)果。

1.2網(wǎng)織紅細胞(RET)檢測：采用了2種熒光染色液POLYMETHINE和0XAZINE進行DNA和RNA染色。經(jīng)激光、流式原理檢測，得到RET散點圖，經(jīng)分析處理獲得準(zhǔn)確結(jié)果。

1.3紅細胞/血小板(RBC/PLl、)檢測：采用雙鞘流法結(jié)合電阻抗原理對RBC/PLI進行檢測，利用浮動界標(biāo)技術(shù)進行直方圖解析。雙鞘流(前鞘流和后鞘流)技術(shù)使流經(jīng)檢測系統(tǒng)的RBC/PLT保證逐個通過，徹底避免細胞并列通過、側(cè)向通過、細胞回流重復(fù)通過等帶來的檢測誤差，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1.4血紅蛋白(HGB)檢測：采用SLS-HGB無氰化物方法，在保證結(jié)果準(zhǔn)確、可靠的前提下，更有利于操作人員和周圍環(huán)境的保護，且無需增加廢液處理設(shè)備。

1.5各種體液樣本的檢測：該系統(tǒng)設(shè)置了專用于各種體液樣本的檢測模式，極大地提高了體液樣本檢測的速度、精度和準(zhǔn)確度。通過對熒光染色后的細胞進行計數(shù)，可得到體液樣本中的白細胞數(shù)(BF-WBC)、單個核細胞數(shù)(MNC)、多個核細胞數(shù)(PMNC)、紅細胞數(shù)(BF-RBC)等。

2 技術(shù)特點

2.1采用了半導(dǎo)體激光流式細胞技術(shù)：結(jié)合熒光染色技術(shù)，使細胞分析的準(zhǔn)確度和靈敏度有了極大的提高，結(jié)果更準(zhǔn)確可靠。

2.2采用電阻抗和核酸熒光染色雙方法學(xué)進行血小板檢測，該技術(shù)的應(yīng)用使低值血小板的檢測結(jié)果更準(zhǔn)確。

2.3用核酸熒光染色和專用幼稚細胞檢測通道及特種試劑染色，使外周血中的幼稚細胞檢測靈敏度高達1%，極大地提高了早期白血病的檢測率。

2.4該系統(tǒng)具有強大的網(wǎng)絡(luò)功能及完善的數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)。該儀器采用Windows XP操作系統(tǒng)及實時在線網(wǎng)絡(luò)質(zhì)控系統(tǒng)SNCS，可與實驗室及醫(yī)院的局域網(wǎng)、國際互聯(lián)網(wǎng)相連接，能提供遠程技術(shù)服務(wù)、在線實時質(zhì)控等功能的軟件支持，為實驗室的標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè)提供強力支持。

2.5有最寬的線性范圍：系統(tǒng)檢測細胞的線性范圍為0～440×109/L：血小板的線性范圍為0～5 000×109/L，是目前所有血液分析儀中最寬的線性范圍。

2.6具有最多的網(wǎng)織紅細胞檢測參數(shù)：XT-4000i血液分析系統(tǒng)除能進行網(wǎng)織紅細胞的計數(shù)及對網(wǎng)織紅細胞進行成熟度的分類外，還能檢測網(wǎng)織紅細胞的血紅蛋白含量.為臨床診療提供極大方便。

2.7具有多通道高精度檢測功能：XT-4000i血液分析系統(tǒng)具有單獨的WBC/BAS0、DIFF、RBC/PLT、HGB、RET檢測通道和專用試劑，使分析精度達到前所未有的高度。

2.8能提供全新的血液學(xué)分析參數(shù)：XT-4000i血液分析系統(tǒng)能提供：IG、IRF、網(wǎng)織紅細胞血紅蛋白含量(RET-HE)等定量參數(shù)的功能，是其他血液分析儀所不具備的，為臨床診療提供非常有用的信息。

2.9XT-4000i血液分析系統(tǒng)：具有多功能Laboman Easv-Access中文數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)，內(nèi)設(shè)推片篩選軟件，在血液分析過程中進行推片篩選，使異常標(biāo)本篩選標(biāo)準(zhǔn)化，極大地提高了分析質(zhì)量，從而有效規(guī)避了醫(yī)療風(fēng)險。

3 臨床應(yīng)用與質(zhì)量控制

我院引進的Sysmex XT-4000i型多功能全自動血細胞分析儀從采購到應(yīng)用的每一個環(huán)節(jié)均進行更加嚴(yán)格的管理[1]，正式投入使用，根據(jù)《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[2]和國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(ICSH)制定的評價指南文件[3]，結(jié)合我科2015年參加衛(wèi)生部、江蘇省臨檢中心室間質(zhì)評情況對XT-4000i血細胞分析儀性能分析評價如下。

3.1材料與儀器：XT-4000i型血細胞分析儀(日本希森美康株式會社)，CD-1800型血細胞分析儀(美國雅培公司，江蘇省臨檢中心血細胞分析參比儀器)；Olympus CX31顯微鏡；25μl微量加樣器(上海光正醫(yī)療儀器有限公司)；靜脈采血針、真空采血管(成都普什醫(yī)藥塑料包裝有限責(zé)任公司)；LDZ4-0.8型低速自動平衡微型離心機(北京醫(yī)用離心機廠)。XT-4000i所用試劑均為原裝試劑，由日本希森美康株式會社提供，校準(zhǔn)品(SCS-1000)批號為22900525，稀釋液(EPK)批號為G0530，嗜堿細胞溶血劑(FB)批號為R0025，白細胞分類溶血劑(FFD)批號為R0034，血紅蛋白溶血劑(SLS)批號為A0036,染色液(FFS)批號為A0008，采用希森美康配套高、中、低值室內(nèi)質(zhì)控品；CD-1800采用雅培CELL-DYN 22校準(zhǔn)品，批號為CD3106，雅培配套高、中、低值室內(nèi)質(zhì)控品，稀釋液批號為1591212，清洗液批號為1698012，溶血素批號為0185112，均為原裝試劑。

3.2標(biāo)本采集：用含乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝劑的真空采血管采集患者標(biāo)本至真空管標(biāo)定刻度。實驗在2 h內(nèi)完成。

3.3方法

3.3.2批間精密度檢測：用中值質(zhì)控品連續(xù)測試20天，計算出WBC、RBC、HGB、MCV、PLT的均值、標(biāo)準(zhǔn)差及變異系數(shù)。

3.3.3線性：標(biāo)本以3 000 r/min離心，將血漿與血細胞分開；取血漿作為稀釋液，血細胞作為100%血液，分別做10%、20%、40%、60%、80%、100%稀釋，每個濃度的標(biāo)本測定4次取平均值，計算WBC、RBC、HGB、PLT實測值、期望值線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)，用電子表格以預(yù)期值為橫坐標(biāo)，以測定值為縱坐標(biāo)繪制出線性圖。

3.3.4攜帶污染率：選取1份高值標(biāo)本，連續(xù)測定2次(A、B)，隨后立即進行3次本底計數(shù)(C、D、E)，計算WBC、RBC、HGB、PLT的攜帶污染率，攜帶污染率=[(C-E)/(B-E)]×100% 。

3.3.5結(jié)果對比：每天隨機選取1份新鮮血，同時用XT-4000i與CD-1800兩臺儀器測定WBC、RBC、HGB、MCV、PLT，每份測定1次，記錄結(jié)果。偏倚=(XT-4000i檢測結(jié)果-CD-1800檢測結(jié)果)/ CD-1800檢測結(jié)果×100% 。每月比對結(jié)果以Excel進行繪圖,參比儀器(CD-1800)結(jié)果為橫坐標(biāo)，XT-4000i結(jié)果為縱坐標(biāo)。

3.4統(tǒng)計學(xué)方法：采用直線相關(guān)和回歸分析。

3.5結(jié)果

3.5.1精密度：XT-4000i各項目精密度的變異系數(shù)(CV)均在規(guī)定允許范圍內(nèi)(XT-4000i規(guī)定血液分析精密度：WBC≤3.0%，RBC≤1.5%，HGB≤1.5%，MCV≤1.5%，PLT≤4.0%；體液分析精密度：WBC-BF≤30.0%，RBC-BF≤40.0%),結(jié)果見表1～3。

項目例數(shù)x±sCV(%)WBC-BF20742.6±102.313.78RBC-BF2052.9±10.519.85

3.5.2線性：XT-4000i檢測標(biāo)本具有良好的線性，各稀釋度的檢測結(jié)果與期望值之間密切相關(guān)(r均>0.999)，見表4。

表2XT-4000i血液分析批內(nèi)精密度檢測結(jié)果(n=20)

項目高值x±s CV中值x±s CV低值x±s CVWBC23.92±0.321.347.59±0.150.662.72±0.051.84RBC5.86±0.061.024.91±0.061.222.93±0.031.02HGB170±1.831.08139.7±1.891.3578.4±0.791.14MCV93.32±0.560.6085.2±0.70.8271.6±0.550.77PLT521±8.581.65236.5±5.762.4468.8±1.762.56

表3XT-4000i血液分析批間精密度檢測結(jié)果

項目例數(shù)x±sCV(%)WBC207.15±0.162.24RBC204.33±0.051.15HGB20127.9±1.421.11MCV2089.5±0.820.92PLT20210.7±6.12.90

表4XT-4000i的線性檢測結(jié)果

項目稀釋度(%) 100 80 60 40 20 10 r值直線回歸方程WBC(×109/L)實測值26.8821.2315.8810.455.332.730.999 8^Y=0.997 3X-0.108 8期望值26.8821.5016.1310.755.382.69RBC(×1012/L)實測值4.863.842.831.840.880.480.999 7^Y=1.007 7X-0.07 6期望值4.863.892.921.940.970.49HGB(g/L)實測值146.8118.086.356.531.016.30.999 5^Y=0.99X+0.728 3期望值146.8117.488.158.729.414.7PLT(×109/L)實測值452.3361.8271.4180.990.545.20.999 5^Y=0.990 6X-2.218 2期望值452.3360.4270.3180.290.145.1

3.5.3攜帶污染率：XT-4000i檢測WBC、RBC、HGB、PLT的攜帶污染均<1% ，見表5。

表5XT-4000i檢測WBC、RBC、HGB、PLT的攜帶污染率

參數(shù)ABCDE攜帶污染率(%)WBC26.426.80.2000.75RBC6.236.190.020.0100.32HGB1881901100.53PLT4664456240.45

3.5.4XT-4000i與CD-1800檢測結(jié)果對比：XT-4000i與CD-1800的檢測結(jié)果相關(guān)性好，偏倚小。其平均偏倚WBC為2.87%，RBC為1.92%，HGB為1.38%，PLT為7.46%，MCV為1.12%，見表6。

表6XT-4000i與CD-1800對比結(jié)果

項目平均偏倚(%)r直線回歸方程WBC2.870.998 6^Y=1.011 4X+0.051 1RBC1.920.985 0^Y=1.023 2X-0.001 2HGB1.380.998 5^Y=0.992 0X+1.944 6PLT7.460.998 1^Y=0.994 0X-4.638 9MCV1.120.992 9^Y=1.001 3X+0.944 4

3.5.5我室室內(nèi)質(zhì)控及參加衛(wèi)計委臨檢中心及江蘇省臨檢中心全血室間質(zhì)評情況：從我室2015年上半年室內(nèi)質(zhì)控情況看：WBC、RBC、HGB、PLT、MCV的平均CV%分別是2.09、1.23、1.25、3.43、1.39，平均偏倚< 1/4 CLIA′88 TEa；我室參加2015年上半年衛(wèi)計委臨檢中心及江蘇省臨檢中心全血室間(WBC、RBC、HGB、Hct、PLT 、MCV)質(zhì)評成績看：平均偏倚< 1/4 CLIA′88 TEa，全部為優(yōu)秀的合格成績，見表7。從室內(nèi)質(zhì)控及室間質(zhì)評情況看，檢驗結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，有質(zhì)量保證。

表72015年我室參加衛(wèi)計委、江蘇省臨檢中心全血室間質(zhì)評情況

項目衛(wèi)計委臨檢中心批號 21 22 23 24 25 平均偏倚(%)江蘇省臨檢中心批號 01 02 03 04 05 平均偏倚(%)WBC靶值16.53.29.55.68.12.966.546.527.6815.6我室結(jié)果16.83.39.55.88.32.906.406.407.4015.0偏倚(%)1.823.120.003.572.472.19-2.02-2.41-1.84-3.65-3.85-2.29RBC靶值4.392.684.605.052.172.513.503.494.285.05我室結(jié)果4.342.664.575.002.162.503.463.394.274.95偏倚(%)-1.14-0.75-0.65-0.99-0.46-0.79-0.40-1.14-2.87-0.23-1.98-1.12Hb靶值106651381515368.896.195.9118.6150.8我室結(jié)果109651371505468.094.094.0118.0148.0偏倚(%)2.830.00-0.72-0.661.890.68-1.16-2.19-1.98-0.51-1.86-1.54Plt靶值20511423013941690.2146.7147.2224.9424.5我室結(jié)果21011523914042695.0150.0146.0235.0400.0偏倚(%)2.440.883.910.722.402.075.322.25-0.824.49-5.771.09MCV靶值74.079.386.586.778.090.684.984.590.593.2我室結(jié)果73.781.285.885.680.191.085.086.091.097.1偏倚(%)-0.412.40-0.81-1.272.690.520.440.111.780.554.181.41

注：衛(wèi)計委臨檢中心批號：201521-201525；江蘇省臨檢中心批號：151001-151005

4 討論

血細胞分析儀是目前臨床血液一般檢查最常用的檢測儀器，檢測結(jié)果對臨床診斷、治療具有十分重要的意義。

XT-4000i全自動血液分析系統(tǒng)由于其智能化程度高、功能強大、檢測速度快、測量指標(biāo)多、數(shù)據(jù)采集量大以及具有強大的網(wǎng)絡(luò)功能及完善的數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)，可與實驗室及醫(yī)院的局域網(wǎng)、國際互聯(lián)網(wǎng)相連接，能提供遠程技術(shù)服務(wù)、在線實時質(zhì)控等功能的軟件支持，可為實驗室的標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè)提供強力支持等，是目前血液分析儀器中性能較好的一款。該儀器臨床使用，為臨床血液學(xué)、體液學(xué)分析檢驗帶來質(zhì)的改變，也為臨床實驗室自動化、信息化建設(shè)帶來新的革命，對臨床醫(yī)學(xué)的發(fā)展起到積極的促進作用。該儀器對環(huán)境條件要求高，對溫度、濕度、靜電及空氣清潔度敏感，需要做好防護工作，按規(guī)定的時間和程序進行每天、每周及每月的保養(yǎng)、維護，確保儀器性能狀態(tài)良好。

新儀器安裝或每次維修后，必須在使用前對由儀器、試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品共同組成的檢測系統(tǒng)進行充分和正確的應(yīng)用評價及性能驗證[4]。ICSH已公布了對血細胞分析儀的評價方案，這一規(guī)定對了解儀器性能和發(fā)現(xiàn)質(zhì)量問題有重要的意義。XT-4000i是由Sysmex公司推出的多功能全自動血細胞分析儀，具有靈活的5種檢測模式，可滿足臨床不同的檢測要求。XT-4000i除了可進行血液常規(guī)分析，還可為臨床提供有核紅細胞(NRBC)、幼稚型網(wǎng)織紅細胞(IRF)、光學(xué)法血小板(PLT-0)等參數(shù)，尤其值得一提的是該儀器可對體液樣本進行自動化分析，結(jié)果與手工法比較具有較高的相關(guān)性[5]，實現(xiàn)了體液標(biāo)本細胞計數(shù)、分類的自動化和標(biāo)準(zhǔn)化，并有效解決了體液標(biāo)本的實驗室生物安全問題。

本文對XT-4000i參考《全國臨床檢驗操作規(guī)程》和ICSH制定的評價方案，并結(jié)合江蘇省臨床檢驗中心對血細胞分析儀性能評價的要求，對WBC、RBC、HGB、MCV、PLT 五個項目進行臨床應(yīng)用檢測和質(zhì)量控制評價。精密度評價是其他方法學(xué)評價的基礎(chǔ)，可分為批內(nèi)精密度、批間精密度和總精密度，均以變異系數(shù)(CV )表示，按江蘇省臨床檢驗中心對血細胞分析儀性能評價的要求筆者進行了批內(nèi)精密度和批間精密度檢測，檢測高、中、低值新鮮靜脈血的批內(nèi)精密度變異系數(shù)(CV)均在允許范圍內(nèi)；體液樣本檢測WBC-BF、RBC-BF的批內(nèi)精密度變異系數(shù)(CV)分別為13.78%、19.85%，遠低于廠家規(guī)定的30.0%、40.0%；檢測中值質(zhì)控品的WBC、RBC、HGB、MCV、PLT批間精密度變異系數(shù)(CV)分別為2.24%、1.15%、1.11%、0.92%、2.90%，也均在允許范圍內(nèi)。線性范圍評價又稱稀釋效應(yīng)，用于評價血細胞分析儀的測定值與稀釋倍數(shù)是否呈比例關(guān)系并觀察覆蓋濃度范圍的結(jié)果是否一致，本文數(shù)據(jù)表明XT-4000i檢測WBC、RBC、HGB、PLT(r均>0.999)的線性良好。攜帶污染率是了解前一高值樣本對其后低值樣本測定結(jié)果影響程度的指標(biāo)，XT-4000i攜帶污染率均<1% ，符合規(guī)定允許范圍。同一實驗室同時擁有兩臺以上儀器時，要保證相同標(biāo)本同一項目結(jié)果及正常參考范圍的一致性，很有必要進行方法學(xué)比對，以保證同一實驗室測定結(jié)果的一致性。這是質(zhì)量控制的重要組成部分。我室兩臺儀器的檢測結(jié)果比對偏倚較小，結(jié)果具有良好的相關(guān)性。XT-4000i智能型全自動血液分析系統(tǒng)的智能化程度高、功能強大、操作程序多，操作時須按提示認真進行，避免程序紊亂，保證儀器正常運行[3]。XT-4000i智能型全自動血液分析系統(tǒng)能夠?qū)Ψ治鰳颖局械脑技毎?、幼稚細胞和異型淋巴細胞等進行提示，提高了工作效率，但當(dāng)遇到可疑或病理情況下，人工顯微鏡復(fù)查仍然很重要。

從我室2015年上半年室內(nèi)質(zhì)控情況看：WBC、RBC、HGB、PLT的平均CV%分別是2.09、1.23、1.25、3.43，平均偏倚<1/4 CLIA′88 TEa。我室參加2015年上半年衛(wèi)生部臨檢中心及江蘇省臨檢中心全血室間(WBC、RBC、HGB、Hct、PLT 、MCV)質(zhì)評成績看：平均偏倚<1/4 CLIA′88 TEa，全部為優(yōu)秀的合格成績。從室內(nèi)質(zhì)控及室間質(zhì)評情況看，檢驗結(jié)果得到了充分的質(zhì)量保證。

綜上所述，通過對XT-4000i的臨床應(yīng)用、室內(nèi)質(zhì)量控制及參加國家、省室間質(zhì)評結(jié)果看：該儀器的精密度高、線性范圍廣、攜帶污染率低,與已知性能的血細胞分析儀(CD-1800)偏倚小，結(jié)果具有良好的相關(guān)性。該儀器同時具有操作簡便、提供參數(shù)多、靈敏度高、易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點，可確保檢驗質(zhì)量,能夠滿足臨床需要，其100個標(biāo)本/小時的檢測速度也基本可滿足醫(yī)院的需求。對于儀器報出的原始、幼稚細胞及異型淋巴細胞要引起重視[6]，需進行人工顯微鏡下計數(shù)、分類，以確保結(jié)果的準(zhǔn)確無誤[7]。