吳碧濤，蔣文強(qiáng)，向禮芳（.綿陽(yáng)市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川6000；.重慶市公共衛(wèi)生醫(yī)療救治中心急診科 400036）

眾所周知，脂溶性維生素D可通過(guò)調(diào)節(jié)鈣磷代謝影響肌肉骨骼系統(tǒng)的發(fā)育，其缺乏可導(dǎo)致兒童佝僂病及成人軟骨癥、骨質(zhì)疏松等[1]。隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)維生素D還具有廣泛的骨骼外效應(yīng)，其缺乏與免疫性疾病、感染性疾病、代謝性疾病、心血管疾病、皮膚病、神經(jīng)精神疾病、生殖系統(tǒng)疾病、腫瘤等密切相關(guān)[2-3]。因此，越來(lái)越多的學(xué)科開(kāi)始關(guān)注維生素D的營(yíng)養(yǎng)狀況。25-羥基維生素D[25-（OH）D]被認(rèn)為是評(píng)價(jià)維生素D營(yíng)養(yǎng)狀況的最佳指標(biāo)[4-5]。因而準(zhǔn)確檢測(cè)25-（OH）D水平的需求也就越來(lái)越大。不同地區(qū)因地域、環(huán)境、飲食結(jié)構(gòu)等因素不同維生素D水平差異也較大[6]?；谝陨弦蛩兀狙芯恐荚诜治鼍d陽(yáng)地區(qū)0～6歲兒童血清25-（OH）D2+D3水平，為維生素D缺乏性佝僂病及維生素D缺乏性相關(guān)疾病的研究和治療提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年5—8月來(lái)綿陽(yáng)市中心醫(yī)院兒童保健科體檢的1 002例0～6歲兒童為研究對(duì)象。排除可能引起維生素D缺乏病史的患兒。根據(jù)性別不同分為男性兒童組和女性兒童組，根據(jù)年齡不同分為0～1、＞1～3、＞3～6 歲組。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 所有兒童均于清晨采集空腹靜脈血，待血液凝固后離心分離800 μL血清于eppendorf管，并立即加入5 μL保護(hù)劑，4℃保存，3 d內(nèi)完成檢測(cè)。

1.2.2 檢測(cè)方法 采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）法檢測(cè)血清 25-（OH）D2及 25-（OH）D3。API3200 串聯(lián)質(zhì)譜儀購(gòu)自美國(guó)AB SCIEX公司，Shimadzu系列液相色譜儀購(gòu)自日本島津公司，檢測(cè)試劑購(gòu)自濟(jì)南英盛生物技術(shù)有限公司。嚴(yán)格按儀器操作指南及試劑說(shuō)明書操作。

1.2.3 判斷標(biāo)準(zhǔn) 參照國(guó)內(nèi)外多數(shù)文獻(xiàn)采用的通用判斷標(biāo)準(zhǔn)[7]：血清25-（OH）D＜20 ng/mL為缺乏，20～30 ng/mL為不足，＞30～100 ng/mL 為適宜，＞100～150 ng/mL 為過(guò)量，＞150 ng/mL為維生素D中毒。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以表示，經(jīng)方差齊性檢驗(yàn)后，2組資料間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，3組資料間比較采用單因素方差分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 綿陽(yáng)市1 002例 0～6歲兒童血清25-（OH）D2+D3水平總體分布 血清 25-（OH）D2+D3水平為（25.71±11.85）ng/mL，水平最低為2.58ng/mL，最高為90.84ng/mL，未發(fā)現(xiàn)維生素D過(guò)量及中毒者。缺乏者共370例，占比36.93%；不足者 346例，占比 34.53%；適宜者僅占28.54%。見(jiàn)表1。

表1 綿陽(yáng)市1 002例0～6歲兒童血清25-（OH）D2+D3水平總體分布

2.2 不同性別兒童血清25-（OH）D2+D3水平比較1 002例 0～6歲兒童中，男性兒童 557例，血清 25-（OH）D2+D3水平為（25.58±11.61）ng/mL；女性兒童 445 例，血清25-（OH）D2+D3水平為（25.86±12.16）ng/mL。2 組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表2。

表2 不同性別兒童血清25-（OH）D2+D3水平分布

2.3 不同年齡組兒童血清25-（OH）D2+D3水平比較0～1組兒童血清25-（OH）D2+D3水平為（26.57±12.09）ng/mL，＞1～3 組兒童血清 25-（OH）D2+D3水平為（25.29±11.61）ng/mL，＞3～6 組兒童血清 25-（OH）D2+D3水平為（23.16±10.89）ng/mL，其中僅大于3～6歲組與0～1歲組血清25-（OH）D2+D3水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.01）。見(jiàn)表3。

表3 不同年齡段兒童血清25-（OH）D2+D3水平分布

3 討 論

作為人體必需的營(yíng)養(yǎng)元素之一，維生素D具有廣泛的骨骼系統(tǒng)和非骨骼系統(tǒng)效應(yīng)。其適宜的濃度對(duì)維持機(jī)體多個(gè)系統(tǒng)的正常發(fā)育非常重要，尤其是對(duì)于兒童的健康及體格發(fā)育。研究發(fā)現(xiàn)，維生素D缺乏已成為全球性的營(yíng)養(yǎng)問(wèn)題。據(jù)估計(jì)，全世界約有10億人處于維生素D缺乏或不足水平[7]。人體內(nèi)維生素D主要以25-（OH）D2（麥角鈣化醇）與25-（OH）D3（膽鈣化醇）2種形式存在，前者來(lái)自于植物性食物及外來(lái)補(bǔ)充劑，后者主要來(lái)自于動(dòng)物性膳食及紫外線照射皮膚合成。血清25-（OH）D因其性質(zhì)穩(wěn)定、半衰期長(zhǎng)、血清濃度高，被用作評(píng)價(jià)維生素D營(yíng)養(yǎng)狀況的客觀指標(biāo)[4]。有研究表明，不同的檢測(cè)方法可能導(dǎo)致維生素D檢測(cè)結(jié)果之間存在較大的差異[8]。因其準(zhǔn)確度高，特異性強(qiáng)，可以有效區(qū)分25-（OH）D2與25-（OH）D3，甚至能區(qū)分3-epi 25羥基維生素D3[3-epi 25（OH）D3]，液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）法被認(rèn)為是檢測(cè) 25（OH）D 的“金標(biāo)準(zhǔn)”[9-11]。

本研究發(fā)現(xiàn)，綿陽(yáng)地區(qū)0～6歲兒童血清維生素D缺乏仍非常普遍，其血清25-（OH）D2+D3水平為（25.71±11.85）ng/mL，人群中適宜率僅占28.54%。男性與女性兒童血清25-（OH）D2+D3水平比較差異并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），這與郝新忠等[12]的報(bào)道結(jié)果一致，而與陳珊珊等[13]的報(bào)道結(jié)果不一致。這可能與樣本數(shù)多少、檢測(cè)方法不一致等因素有關(guān)。隨年齡增長(zhǎng)，兒童血清維生素D水平逐漸降低的趨勢(shì)與很多研究一致[14-15]，其中大于3～6歲組與0～1歲組比較，其血清維生素D水平降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。導(dǎo)致這一現(xiàn)象的原因可能與下列因素有關(guān)：0～1歲組嬰幼兒以母乳或配方奶為主，乳、奶制品含維生素D相對(duì)高，且根據(jù)喂養(yǎng)指南，3歲以下嬰幼兒均常規(guī)補(bǔ)充魚肝油等維生素D制劑，再者1歲以下嬰幼兒做兒童保健頻率高，能經(jīng)常從醫(yī)生處獲取關(guān)于維生素D補(bǔ)充重要性的相關(guān)知識(shí)，故而家長(zhǎng)重視度高；而處于3～6歲組的兒童，隨年齡增長(zhǎng)，機(jī)體對(duì)維生素D的需求增加，而兒童每天奶制品的獲取情況良莠不齊，加之偏食、家長(zhǎng)重視不夠等原因，很容易導(dǎo)致血清維生素D缺乏或不足，后一點(diǎn)從大于3～6歲組來(lái)院常規(guī)體檢人數(shù)與0～1歲組比明顯下降也可以佐證。

綜上所述，綿陽(yáng)地區(qū)0～6歲兒童血清維生素D營(yíng)養(yǎng)狀況較差，應(yīng)加強(qiáng)血清25-（OH）D2+D3水平的檢測(cè)，尤其是對(duì)3～6歲兒童應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充，為臨床維生素D缺乏性佝僂病及維生素D缺乏性相關(guān)疾病的研究和治療提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。當(dāng)然，因樣本數(shù)相對(duì)較少，結(jié)果可能存在一定偏倚。今后尚需進(jìn)一步大樣本研究觀察，同時(shí)會(huì)考慮季節(jié)等因素對(duì)血清維生素D水平的影響。