李 明，賴金川，鄭 偉，譚 剛，楊秀云，趙小渝，程 標(biāo)

(1.四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院東院心內(nèi)科，四川 成都 610101；2.四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院老年心血管內(nèi)科，四川 成都 610072)

冠心病是嚴(yán)重危害生命健康的疾病之一，其冠脈病變程度影響著患者預(yù)后。對(duì)于老年冠心病患者，往往動(dòng)脈粥樣硬化程度重，累及多支冠脈血管，且冠脈狹窄程度也相對(duì)較重，預(yù)后也較差。內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells，EPCs)是一種能分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞，有研究發(fā)現(xiàn)[1，2]血液中的EPCs具有參與內(nèi)皮組織修復(fù)和血管新生的能力，并且有助于損傷血管的再內(nèi)皮化進(jìn)程。本研究以CD34+作為EPCs表面標(biāo)志，來探討老年冠心病患者冠脈病變程度與CD34+水平相關(guān)性及其臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料選擇2015年4～11月在四川省人民醫(yī)院心內(nèi)科就診并行冠脈造影的老年患者127例，年齡61～72歲[(66.4±3.3)歲]。依據(jù)冠脈造影結(jié)果，分為冠心病組91例和正常對(duì)照組36例。冠心病診斷標(biāo)準(zhǔn)為：冠脈造影至少一支冠狀動(dòng)脈或其主要分支狹窄程度≥50%。其中冠心病組男57例，女34例，年齡(66.39±3.71)歲；正常對(duì)照組男19例，女17例，年齡(65.58±2.95)歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重肝腎疾病、器質(zhì)性心臟病、感染性疾病、嚴(yán)重外周血管疾病、結(jié)締組織疾病、腫瘤、貧血以及2周內(nèi)服用激素藥物者。

1.2方法

1.2.1冠狀動(dòng)脈病變不同類型及結(jié)合 SYNTAX 積分、Gensini積分分組：①根據(jù)冠狀動(dòng)脈造影結(jié)果按ACC/AHA冠狀動(dòng)脈病變形態(tài)劃分標(biāo)準(zhǔn)分為A、B、C三種病變類型[3]。②采用SYNTAX 積分系統(tǒng)將冠狀動(dòng)脈病變劃分為三組，總分83分，0～22分為低危組，23～33分為中危組，≥33分為高危組[4]。③根據(jù)冠狀動(dòng)脈造影結(jié)果計(jì)算冠狀動(dòng)脈病變Gensini積分：每支血管狹窄≤25%為1分，25%～49%為2分，50%～74%為4分，75%～89%為8分，90%～99%為16分，100%為32分。不同節(jié)段冠狀動(dòng)脈評(píng)分系數(shù)：前降支第1、2對(duì)角支、右冠近、中、遠(yuǎn)段及后降支、左室后支各記1.0分，前降支近段記2.5分，中段記1.5分，遠(yuǎn)段記1.0分，左主干記5.0分，回旋支開口記3.5分，回旋支近段記2.5分。將各段系數(shù)乘以與之相對(duì)應(yīng)的狹窄程度記分，再將各狹窄段總積分相加，最終得到冠狀動(dòng)脈Gensini總積分，Gensini積分越高，冠狀動(dòng)脈病變?cè)街豙5]。

1.2.2觀察指標(biāo) 所有患者清晨空腹檢測(cè)總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、血尿酸(UA)等生化指標(biāo)，采用貝克曼公司生產(chǎn)S600型全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)。

1.2.3CD34+檢測(cè) 冠狀動(dòng)脈造影時(shí)取外周血約2 ml在4 h內(nèi)送我院中心實(shí)驗(yàn)室，由不知曉造影結(jié)果的同一名技師負(fù)責(zé)CD34+標(biāo)本檢測(cè)。流式細(xì)胞儀(CYTOMICS FC500)由BECTON DICKINSON公司生產(chǎn)。①吸取CD34單克隆抗體5 μl加入加樣管底部。②吸取EDTA抗凝管中全血25 μl加入加樣管底部與CD34單抗混勻。③加樣管放入“電熱恒溫培養(yǎng)箱”25 ℃下孵育20分鐘。④吸取溶血?jiǎng)〢液300 μl/B液133 μl加入加樣管中與全血混勻，以溶解全血中的紅細(xì)胞，常溫下放置5分鐘后上流式細(xì)胞儀檢測(cè)。⑤流式細(xì)胞儀自動(dòng)計(jì)數(shù)、分析10000個(gè)細(xì)胞，之后自動(dòng)計(jì)算出CD34+所占百分率。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組間比較先進(jìn)行正態(tài)分布檢驗(yàn)，若服從正態(tài)分布采用t檢驗(yàn)，若不服從正態(tài)分布采用非參數(shù)檢驗(yàn)；多組間比較采用單因素方差分析；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。以P< 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1冠心病組和對(duì)照組臨床資料及CD34+水平比較冠心病組和對(duì)照組在性別、年齡、吸煙史、高血壓史、TC、TG、HDL-C、UA之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P> 0.05)；冠心病組血清LDL-C水平高于對(duì)照組(P< 0.05)，CD34+百分率低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P< 0.05)，見表1。

表1 冠心病組與對(duì)照組臨床資料及CD34+水平比較

2.2不同冠狀動(dòng)脈病變分型組間CD34+比較CD34+百分率在C型病變組低于A型病變組，兩組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P< 0.05)；C型病變組和B型病變組、A型病變組和B型病變組之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P> 0.05)，見表2。

2.3不同SYNTAX積分組間CD34+比較在SYNTAX積分中，高危組CD34+百分率低于低危組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P< 0.05)；而中危組與低危組、高危組與中危組之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P> 0.05)，見表2。

2.4不同冠狀動(dòng)脈Gensini積分組間CD34+比較在Gensini積分分組中，高分組CD34+百分率低于低分組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P< 0.05)；而中分組與低分組、高分組與中分組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P> 0.05)，見表2。

表2 CD34+在A、B、C型冠脈病變分型、SYNTAX積分及Gensini積分各組間比較

2.5冠心病患者Gensini積分與CD34+相關(guān)性分析冠心病患者血清CD34+百分率與冠脈Gensini積分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.378，P< 0.01)。

3 討論

冠狀動(dòng)脈粥樣硬化目前認(rèn)為是冠心病發(fā)生、發(fā)展的重要因素，而內(nèi)皮功能障礙則是動(dòng)脈粥樣硬化的起始和關(guān)鍵環(huán)節(jié)[6～8]。外周血CD34+細(xì)胞作為EPCs的表面標(biāo)志是一群具有游走特性，并且能增殖、分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞，可歸巢于血管損傷或血管新生部位，并在該區(qū)域增殖、分化為內(nèi)皮細(xì)胞，當(dāng)血管內(nèi)皮損傷后各種趨化因素促使外周血CD34+細(xì)胞動(dòng)員、遷移到受損血管部位，參與血管內(nèi)皮損傷后的修復(fù)、再生及血管新生[6，9，10]。文獻(xiàn)報(bào)道在冠心病患者中EPCs數(shù)量、功能皆明顯下降[11，12]，也有研究報(bào)道隨著年齡增加動(dòng)脈粥樣硬化程度加重，EPCs數(shù)量、功能也進(jìn)一步降低[13]。本研究發(fā)現(xiàn)在老年冠心病患者中CD34+百分率較正常對(duì)照組明顯降低，考慮與年齡增加EPCs生成減少及冠心病多種危險(xiǎn)因素持續(xù)損傷血管內(nèi)皮并削弱EPCs功能從而導(dǎo)致外周血EPCs數(shù)量進(jìn)一步減少，而EPCs數(shù)量減少及功能障礙則影響了血管內(nèi)皮修復(fù)及血管新生，從而加重了冠狀動(dòng)脈病變。本研究同時(shí)結(jié)合ACC/AHA冠狀動(dòng)脈病變A、B、C形態(tài)分型、SYNTAX評(píng)分、Gensini 積分來比較分析各組冠心病患者CD34+水平，發(fā)現(xiàn)隨著冠狀動(dòng)脈病變狹窄程度加重、累及冠狀動(dòng)脈支數(shù)增多，CD34+水平下降更為顯著，并且通過相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)CD34+百分率水平與Gensini 積分呈負(fù)相關(guān)。由此提示EPCs數(shù)量減少以及功能降低與冠心病的發(fā)病以及冠狀動(dòng)脈病變狹窄嚴(yán)重程度、累及冠狀動(dòng)脈支數(shù)具有一定相關(guān)性，而檢測(cè)外周血CD34+百分率水平在一定程度上可作為預(yù)判斷冠狀動(dòng)脈病變程度的一種新的檢測(cè)指標(biāo)。

綜上所述，在老年冠心病患者冠狀動(dòng)脈病變嚴(yán)重程度評(píng)估中，檢測(cè)外周血CD34+百分率水平可在一定程度上反映冠狀動(dòng)脈病變狹窄嚴(yán)重程度。但由于本研究入選樣本例數(shù)較少，需要更大樣本量加以證實(shí)。