張 志，康京麗，李曉成

（中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東青島 266032）

非洲豬瘟（African swine fever，ASF）是由非洲豬瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，發(fā)病時(shí)間短，病死率高達(dá)90%～100%。ASF是對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害最為嚴(yán)重的疫病，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）列為法定報(bào)告疫病，被我國(guó)列為一類(lèi)傳染病[1-2]。2018年8月3日，沈陽(yáng)市沈北新區(qū)某豬場(chǎng)證實(shí)發(fā)生ASF疫情[3]。這是我國(guó)首次發(fā)生ASF。此次疫情引起了國(guó)內(nèi)外高度關(guān)注。如何正確認(rèn)識(shí)ASFV病原學(xué)特征和流行規(guī)律成為當(dāng)務(wù)之急。本文結(jié)合國(guó)內(nèi)外ASF研究進(jìn)展，闡述了ASFV病原學(xué)特征、流行病學(xué)特征、診斷要點(diǎn)，分析了國(guó)內(nèi)需要特別關(guān)注的幾種傳染源，以期為采取有效措施，防范、控制和清除ASF提供參考。

1 全球ASF流行概況

全球ASF流行大體可以分為三個(gè)階段[4]。

第一階段，主要在非洲大陸暴發(fā)和流行。1921年，非洲肯尼亞最早報(bào)道ASF發(fā)生，隨后非洲南部、中部和東部先后發(fā)生ASF疫情，至今非洲中南部仍是非洲豬瘟的主要疫區(qū)。

第二階段， ASF傳出非洲大陸進(jìn)入歐洲和南美洲。1957年ASF首次傳出非洲大陸，在葡萄牙的里斯本地區(qū)發(fā)生。隨后西班牙、法國(guó)、意大利、荷蘭等西歐國(guó)家陸續(xù)發(fā)生ASF疫情。通過(guò)撲殺等措施，到20世紀(jì)90年代，除意大利撒丁島外，歐洲基本清除了ASF。1971年南美洲的古巴首次報(bào)道ASF，隨后巴西、多米尼加等國(guó)也報(bào)道有ASF疫情發(fā)生。

第三階段，ASF傳入東歐和俄羅斯。2007年ASF經(jīng)輪船泔水長(zhǎng)距離傳播至東歐的格魯吉亞，繼而傳播到阿塞拜疆、亞美尼亞、波蘭、立陶宛、白俄羅斯、俄羅斯等，至今仍在局部暴發(fā)和流行（圖1）。2018年以來(lái)，中東歐國(guó)家通報(bào)發(fā)生的ASF疫情就有2 710起。2017年俄羅斯通報(bào)發(fā)生160起ASF疫情[5]，其中俄羅斯遠(yuǎn)東地區(qū)發(fā)生疫情的伊爾庫(kù)茨克州還是重要的商貿(mào)樞紐，與我國(guó)的交通貿(mào)易非常頻繁，對(duì)我國(guó)形成了極大威脅。

圖1 目前全球非洲豬瘟疫區(qū)分布

2 ASFV特有的病原學(xué)特征

2.1 存活時(shí)間長(zhǎng)，抵抗力強(qiáng)

ASFV屬于雙鏈DNA病毒目非洲豬瘟病毒科非洲豬瘟病毒屬。該屬目前僅有一個(gè)ASFV病毒種。ASFV的基因組為單分子線(xiàn)狀DNA，長(zhǎng)度約170～190 kb[1]。ASFV個(gè)體較大，直徑可達(dá)200 nm，表面為二十面體結(jié)構(gòu)和一層含類(lèi)脂的囊膜，因此高溫和一些破壞囊膜的消毒劑均可有效殺滅ASFV。但是由于其復(fù)雜的分子結(jié)構(gòu)，ASFV對(duì)消毒劑的抵抗力較其他的囊膜病毒稍強(qiáng)，特別是在一些豬肉制品或血液中存活時(shí)間更長(zhǎng)。據(jù)報(bào)道，ASFV在干腌火腿中的感染性可持續(xù)140 d，在帕爾馬火腿中的感染性可持續(xù)300～399 d[6]，在血液、糞便和組織中存活時(shí)間長(zhǎng)達(dá)半年，在生肉或者未完全煮熟的豬肉制品中存活時(shí)間長(zhǎng)達(dá)3個(gè)月[7]。這就導(dǎo)致ASFV一旦傳入，往往在疫源地長(zhǎng)期存在，造成二次或次級(jí)感染。

2.2 基因組龐大，易變異

ASFV基因組龐大，且差異較大。有的毒株致病性很強(qiáng)（E75），有的則較弱（細(xì)胞適應(yīng)毒BA71V）[8]。研究發(fā)現(xiàn)，在ASFV基因組的保守區(qū)，不同毒株的左端48 kb和右端22 kb存在較大差異，這可能是ASFV毒力存在差異較大的主要原因。與痘病毒和虹彩病毒類(lèi)似，ASFV也屬于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)增殖的病毒。到目前為止，已經(jīng)測(cè)定至少11株ASFV的全基因組序列，分析其結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，ASFV基因組至少含有151～167個(gè)ORFs，至少110個(gè)ORFs在11株ASFV中都高度保守[8]。在ASFV的包裝和侵染過(guò)程，至少有pp220、pp62、p72、p54、p30、CD2V、p10、p14.5、p17等50種蛋白參與[9]。其中pp220分子質(zhì)量為281.5 ku，在病毒感染過(guò)程中屬于晚期表達(dá)蛋白，由基因CP2475L編碼，在S273R酶的作用下裂解為p150、p37、p14和p34等成熟的病毒蛋白；pp62的分子質(zhì)量為60.5 ku，由基因CP530R編碼，在S273R酶的作用下裂解為p35和p15等成熟的病毒蛋白；p150、p37、p14、p34、p35和p15等蛋白在病毒衣殼的組裝過(guò)程中起關(guān)鍵作用[10]。P72的相對(duì)分子質(zhì)量為73.2 ku，由基因B46L（VP72）編碼，是病毒的主要結(jié)構(gòu)蛋白和核心抗原蛋白，是病毒二十面體的主要成分。目前很多檢測(cè)ASFV的PCR、熒光PCR方法等都是基于VP72基因建立的[10-12]。研究顯示，ASFV的基因組變異非常頻繁，根據(jù)編碼p72基因的C端序列可以將ASFV至少分為24個(gè)基因型[13]，進(jìn)一步根據(jù)p54和PB602L基因的中央可變區(qū)（CVR）序列， ASFV的分型數(shù)量會(huì)更多。

3 ASFV主要感染源與傳播途徑

ASFV宿主是家豬和野豬，主要通過(guò)間接和直接接觸傳播。發(fā)病豬、隱性感染豬及其排泄物和污染物以及軟蜱等媒介吸血昆蟲(chóng)都是ASFV的傳染源[14]，這也是ASF不易清除的主要原因。

3.1 軟蜱

在非洲，野豬-軟蜱-野豬形成的“森林循環(huán)”比較常見(jiàn)。一些疣豬ASF感染率較高，軟蜱叮咬后，病毒可長(zhǎng)期在軟蜱體內(nèi)存活，再通過(guò)叮咬野豬進(jìn)入下一個(gè)循環(huán)，從而導(dǎo)致“森林循環(huán)”長(zhǎng)期穩(wěn)定存在[15]。

3.2 野豬

野豬與家豬的接觸是ASFV的另一個(gè)重要的傳染源。野豬在野外適應(yīng)性很強(qiáng)，喜歡高密度群居生活，導(dǎo)致野豬之間很容易通過(guò)直接接觸傳播本病。有些野豬還經(jīng)常出沒(méi)于農(nóng)戶(hù)田舍周?chē)c家豬接觸密切。一旦ASFV在野豬中定殖，則會(huì)形成一個(gè)移動(dòng)傳染源，加上野豬活動(dòng)性隱蔽，活動(dòng)范圍大，短期內(nèi)很難清除。

3.3 餐余垃圾及非生物媒介

帶毒的餐余垃圾是一個(gè)很重要的感染源。巴西、葡萄牙等首次暴發(fā)的ASF疫情都是有交通工具攜帶的餐余垃圾喂豬引起的。此外，一些污染的衣服、鞋子、車(chē)輛、設(shè)備等非生物媒介也可以傳播ASFV[16]。

4 ASFV監(jiān)測(cè)與滅源

由于ASFV在外界環(huán)境中存活時(shí)間長(zhǎng)，對(duì)普通消毒劑抵抗力強(qiáng)，病毒基因型多，易變異，無(wú)有效疫苗預(yù)防，因此ASF在沈陽(yáng)市的暴發(fā)，對(duì)我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)是一種巨大威脅?？紤]到ASFV的潛伏期長(zhǎng)達(dá)15 d，再加上現(xiàn)代發(fā)達(dá)的物流業(yè)，15 d的時(shí)間足以讓處于潛伏期內(nèi)的豬到達(dá)國(guó)內(nèi)所有地區(qū)，造成疫情大面積擴(kuò)散和傳播。另外，ASFV的傳播方式多樣，當(dāng)前尚無(wú)有效疫苗，因此國(guó)內(nèi)防控本病的最主要措施就是監(jiān)測(cè)和滅源。

4.1 監(jiān)測(cè)要點(diǎn)

4.1.1 臨床檢查 ASF根據(jù)臨床表現(xiàn)可以分為最急性、急性、亞急性和慢性等4種類(lèi)型。最急性非洲豬瘟往往不表現(xiàn)典型癥狀，有時(shí)豬剛出現(xiàn)精神沉郁、飲食下降后，第2～3天就突然死亡。急性非洲豬瘟在臨床上的表現(xiàn)主要是高燒，肢體末端出血性紫斑，病理變化為主要臟器的出血和淋巴結(jié)腫大，如脾臟嚴(yán)重腫大出血、肺臟腫大出血、膀胱出血、心內(nèi)膜出血、胃和腸黏膜出血，頜下淋巴結(jié)、腹腔淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)等腫大出血[17]。臨床上一頭豬不一定能全部顯現(xiàn)出所有癥狀，但多剖檢幾頭基本上可以看到這些癥狀。因此，在臨診上排除ASF疑似病例時(shí)要慎重，不可輕易放過(guò)任何一個(gè)可疑病例。另外，ASF很容易與古典豬瘟和高致病性豬藍(lán)耳病引起的病變相混淆，所以在臨床診斷和病理剖檢時(shí)要注意鑒別。

4.1.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) 目前，如果臨床上發(fā)現(xiàn)類(lèi)似豬瘟或者高致病性豬藍(lán)耳病病例時(shí)，一定要進(jìn)行ASF排查，一旦發(fā)現(xiàn)可疑樣品，就必須進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)?，F(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法主要有血清學(xué)方法和病原學(xué)方法。血清學(xué)方法主要有間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、阻斷酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和間接熒光抗體試驗(yàn)等，其中酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)已經(jīng)有商品化的試劑盒出售。ASFV的病原學(xué)方法也有很多，如病毒的細(xì)胞培養(yǎng)和分離、直接免疫熒光法、雙抗體夾心ELISA法、普通PCR和熒光PCR方法等，其中OIE推薦的普通PCR和熒光PCR方法最為常用[1]。我國(guó)《非洲豬瘟防治技術(shù)規(guī)范（試行）》中提到了3種ASFV病原學(xué)檢測(cè)方法：雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（OIE官方網(wǎng)站都有這些方法詳細(xì)操作步驟[1]）。除此以外，還要加大ASF防控技術(shù)研制工作力度，盡快開(kāi)發(fā)簡(jiǎn)易、高效、特異的診斷試劑和診斷方法，并能夠與古典豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病等其他豬群疫病相鑒別。

4.2 需特別關(guān)注的幾種傳染源

4.2.1 用來(lái)喂豬的泔水 泔水是來(lái)自城市的飯店、餐館、工廠餐廳等的餐余垃圾。一直以來(lái)，泔水喂豬作為處理餐余垃圾的方法很受小型養(yǎng)殖戶(hù)歡迎。這種養(yǎng)殖模式在部分城市城鄉(xiāng)結(jié)合部較多，感染疫病風(fēng)險(xiǎn)極高。如果飯店中使用的豬肉攜帶ASFV，由于病毒存活時(shí)間較長(zhǎng)，ASFV就會(huì)隨泔水飼喂而感染豬群，因此泔水是傳播ASFV的重要傳染源。

4.2.2 屠宰場(chǎng) 如果感染ASFV的病豬進(jìn)入待宰間，會(huì)通過(guò)糞便、尿液以及直接接觸等將ASFV傳遞給健康豬群并能在待宰間長(zhǎng)期存在。當(dāng)感染ASFV的豬進(jìn)入屠宰間后，屠宰時(shí)產(chǎn)生的糞便、血液等會(huì)污染屠宰間，屠宰中使用的刀具、車(chē)間流水間、屠宰工人等都可以使豬肉制品污染ASFV，從而使屠宰場(chǎng)成為ASFV的傳染源。

4.2.3 生豬肉制品 ASFV可在生肉或者未完全煮熟的豬肉制品中存活3個(gè)月，一旦污染豬肉，則會(huì)通過(guò)銷(xiāo)售而污染其他生豬肉，從而導(dǎo)致病毒向外傳播，并通過(guò)泔水飼喂感染健康豬群，導(dǎo)致疫情發(fā)生。

4.2.4 生豬販運(yùn)人或經(jīng)紀(jì)人 一些小型養(yǎng)殖戶(hù)經(jīng)常任由豬販子或經(jīng)紀(jì)人到自己豬場(chǎng)選豬。這些人在不同的豬場(chǎng)和豬舍內(nèi)隨意來(lái)回走竄，導(dǎo)致病原在不同的豬場(chǎng)之間相互傳播。

5 小結(jié)

ASFV在外界環(huán)境中存活時(shí)間長(zhǎng)，對(duì)普通消毒劑抵抗力強(qiáng)，導(dǎo)致難以清除 ；病毒基因型多，易變異，導(dǎo)致無(wú)有效疫苗預(yù)防；感染源和傳播途徑多，可長(zhǎng)距離傳播，導(dǎo)致防控難度大。因此防控本病的最主要措施就是監(jiān)測(cè)和滅源。需要通過(guò)嚴(yán)格控制泔水喂豬以及屠宰場(chǎng)、生豬肉制品、生豬販運(yùn)人或經(jīng)紀(jì)人等4種傳染源，防止疫情擴(kuò)散；通過(guò)臨床和實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)研發(fā)與培訓(xùn)，加強(qiáng)監(jiān)測(cè)，及早發(fā)現(xiàn)疫情。