施紀(jì)文

（上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬第七人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 上海 200137）

梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)主要有梅TPPA、梅毒螺旋體血細(xì)胞凝集試驗(yàn)（TPHA）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、快速免疫層析檢測(cè)法（RT）、CLIA、熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（FTA -ABS）和免疫印跡法（WB）等[1]。本研究用CLIA、TPPA和TRUST進(jìn)行梅毒血清學(xué)檢測(cè)，分析各檢測(cè)方法的優(yōu)缺點(diǎn)，為臨床選擇最佳的梅毒篩查方法提供參考。

1.材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源

2017年1月至2017年12月本院門(mén)診及住院患者血清樣本15045例，其中男7500例,女7545例，年齡1～99歲。

1.2 儀器與試劑

儀器為CHEMCLIN 1500全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀（日本富士瑞必歐株式會(huì)社）；CLIA試劑盒（北京科美東雅生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品），TPPA試劑盒（日本富士瑞必歐株式會(huì)社產(chǎn)品）,TRUST試劑盒（上海榮盛生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品）。

1.3 方法與結(jié)果判斷

1.3.1 CLIA 用TP抗原包被固相微孔板，用辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記相同蛋白抗原，與樣本中的TP抗體形成雙抗原夾心復(fù)合物后，加入化學(xué)發(fā)光底物液，測(cè)定發(fā)光值。根據(jù)cutoff值判斷結(jié)果。

1.3.2 TPPA 樣本1:80稀釋后出現(xiàn)凝集反應(yīng)判定為陽(yáng)性，不出現(xiàn)凝集反應(yīng)判定為陰性。

1.3.3 TRUST 出現(xiàn) 1+～4+ 強(qiáng)度的凝集反應(yīng)判定為陽(yáng)性，不出現(xiàn)凝集反應(yīng)判定為陰性。

本院梅毒篩查使用CLIA和TRUST定性試驗(yàn)。CLIA陽(yáng)性樣本用TPPA和TRUST定量試驗(yàn)復(fù)檢。

2.結(jié)果

2.1 CLIA和TRUST定性試驗(yàn)初篩結(jié)果

15045例血清樣本，CLIA檢測(cè)647例陽(yáng)性，TRUST定性試驗(yàn)206例陽(yáng)性（見(jiàn)表1）。

2.2 CLIA陽(yáng)性樣本用TPPA和TRUST定量試驗(yàn)復(fù)檢

TPPA復(fù)檢618例為陽(yáng)性，比例為95.5%，29例為陰性，比例為4.5%。TRUST定量試驗(yàn)測(cè)得194例為陽(yáng)性比例為30.0%，453例為陰性，比例為70.0%，陽(yáng)性滴度為1:1陽(yáng)性～1:256陽(yáng)性。

表1 15045例血清樣本 CLIA和TRUST定性試驗(yàn)結(jié)果[n（%）]

3.討論

血清學(xué)檢測(cè)是目前梅毒實(shí)驗(yàn)室篩查的主要方法。梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)，陽(yáng)性說(shuō)明現(xiàn)在或既往有TP感染，但不能作為療效觀察的指標(biāo)[2]。TRUST是常用的非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)，定性試驗(yàn)可用于現(xiàn)癥梅毒診斷，定量試驗(yàn)可用于療效觀察和判斷愈后。

本研究15045例血清樣本，CLIA檢測(cè)14398例陰性樣本中TRUST定性試驗(yàn)有12例陽(yáng)性，與TRUST不具有特異性有關(guān)，可引起TRUST假陽(yáng)性的常見(jiàn)原因有：感染因素如細(xì)菌性心內(nèi)膜炎、軟下疳、病毒性肝炎、傳染性單核細(xì)胞增多癥、結(jié)核、麻風(fēng)、麻疹、瘧疾、水痘、支原體及肺炎雙球菌引起的肺炎、雅司病等；非感染因素如真空采血管中有添加劑、妊娠、老年人、多發(fā)性骨髓瘤、系統(tǒng)性紅斑狼瘡和吸毒等。

CLIA靈敏度和特異性均較高。本研究中CLIA初篩陽(yáng)性標(biāo)本，用TPPA復(fù)檢有95.5%（618/647）陽(yáng)性，兩種方法符合率高。TPPA復(fù)檢有4.5%（29/647）陰性，與TPPA靈敏度略低于CLIA有關(guān)，也可能是CLIA假陽(yáng)性。

TPPA是一種經(jīng)典的梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)，特異性和準(zhǔn)確度較高；但結(jié)果判斷主觀性強(qiáng)，手工操作，不利于大量標(biāo)本檢測(cè)。

綜上所述，CLIA比TRUST更適合梅毒篩查。CLIA初篩陽(yáng)性標(biāo)本，用TPPA作確認(rèn)試驗(yàn)并用TRUST定量試驗(yàn)復(fù)檢，這種方法是可行的，值得推薦。